基质金属蛋白酶12在放射性肺损伤组织异常重建和肺纤维化启动中的作用及治疗靶点的探索

发布时间：2021-08-11 01:46

　　目的和意义:放射性肺纤维化是放射性损伤所引起的肺组织无效重建的终级阶段,其详细的发生机理至今仍未完全揭示。在放射性肺损伤的早期,MMP-12酶活性升高与肺纤维化的启动过程似乎存在特定的关系。本研究拟探索放射性肺损伤后,MMP-12在肺组织异常重建中的作用以及肺重建与肺纤维化启动之间的内在联系,阐明早期启动放射性肺纤维化的机制;并应用吡啡尼酮（Pirfenidone）研究其对放射性肺损伤后肺重建的影响与作用。方法:首先在放射性肺损伤早期,采用广谱基因芯片技术筛选差异表达的相关基因,对经过60Coγ射线照射的大鼠肺组织,分别应用明胶酶谱分析、Western Blot和免疫组织化学染色检测MMP-12的酶活性和蛋白表达变化;组织特殊染色法观察肺泡壁弹力纤维降解情况,透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺间质细胞间的“信号交流”（cross talking）现象,ELISA检测肺组织纤维化相关因子TGF-β、IL-1β、TNF-α的含量,免疫组化检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况。原代分离大鼠肺泡Ⅱ型细胞（AT-Ⅱ）、间质细胞（MA和Fb）,酶谱分析法检测细胞上清中MMP-12的酶活... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

γ射线照射后早期大鼠肺泡壁弹力纤维变化（维多利亚蓝弹力纤维染色，×400）

新春硕士学位论文 第一部、肺组织超微结构的变化电镜观察发现，照射后肺组织内超微结构的格局发生改变，肺泡Ⅱ型上皮明显增生，胞浆内嗜锇板层小体数量丰富，与此同时，在某些部位，肺泡隔底膜物质明显减少或消失，可见Ⅱ型上皮细胞与毛细血管内皮细胞、间隔内维细胞和巨噬细胞相接触，发生“信号交流”（cross talking）现象（图 1-3）

***00.511.522.53ctr 1 wk 2 wk 4 wk照后时间（周）光度吸（A值）图 1-4 照射后大鼠肺组织 TGF-β1表达的时效关系注：与前一组相比*P<0.05六、 照射后大鼠肺组织 α-SMA 表达变化正常对照组肺内成纤维细胞未见 α-SMA 蛋白合成；照射后 1~2 周，肺组织中可见少数表达 α-SMA 的成纤维细胞出现，分布于增厚的肺泡间隔内；照射后4 周，肺泡间隔进一步增厚并相互融合，其内出现大量 α-SMA 免疫反应阳性的肌成纤维细胞（图 1-5）。


本文编号：3335195