miRNAs参与ApoE（-/-）小鼠Toll样受体4免疫作用机制的干预研究

发布时间：2021-08-26 06:34

　　研究目的：本研究以ApoE（-/-）小鼠为研究对象,采用中小强度的有氧运动和辛伐他汀药物干预手段。探讨动脉粥样硬化Toll样受体4（TLR4）信号转导通路及非编码基因nicroRNAs （miRNAs、miRs）的调控对其血管炎性损伤修复的影响及可能分子机制。研究方法：应用ApoE基因敲除和高脂高胆固醇饲料诱发动脉粥样硬化小鼠（10周龄C57BL/6J）,将其分为安静组（n=16）、运动组（n=16）、用药组（n=16）；定期测定尾血清CHO、LDL、HDL含量以检验实验模型；酶联接免疫吸附反应法（ELISA）检测血清炎性因子IL-6、TNF-a、IL-10的含量及血管ET1、AngⅡ激素水平；胶原蛋白酶消化法收集血管内皮细胞；免疫组化法检测TLR4通路相关因子Toll样受体4（TLR4）、TRAF6、NF-Kb及内皮细胞EGF、TGF-β的蛋白水平；RT-PCR法检测CRP、MCP-1mRNA表达水平；Real time qPCR法检测miRNAs的表达；利用PicTar, TargetScan等数据库预测miRNA靶基因,并采用双荧光酶报告载体验证niRNA-146a的靶基因。研究... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1. 前言
2. 材料和方法
    2.1 实验动物
    2.2 主要试剂与仪器
        2.2.1 主要试剂
        2.2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 实验动物分组
        2.3.2 运动方案及给药
        2.3.3 样本采集与处理
        2.3.4 生物学分析
        2.3.5 组织学与免疫组化
        2.3.6 RT-PCR检测mRNA的表达
        2.3.7 定量PCR检测差异表达的miRNAs
        2.3.8 Western blot
        2.3.9 靶基因预测
        2.3.10 双荧光酶报告载体靶基因验证
    2.4 统计学分析
3. 实验结果
    3.1 AS病理学诊断
    3.2 AS小鼠血清炎性因子的变化
    3.3 AS小鼠血管组织和内皮细胞免疫标记
    3.4 AS小鼠血管组织与内皮细胞激素水平
    3.5 AS小鼠血管组织CRP、MCP-1的表达
    3.6 AS小鼠miRNA的转录水平
    3.7 靶基因的预测及验证
    3.8 miRNA-146a对TRAF6的调控及其在组织中的表达
4. 讨论
    4.1 ApoE(-/-)AS小鼠血管炎症损伤
    4.2 ApoE(-/-)AS小鼠TLR4信号转导通路
    4.3 ApoE(-/-)AS小鼠mircoRNAs的转录调控
    4.4 ApoE(-/-)AS小鼠血管内皮损伤的修复
    4.5 有待进一步研究
5. 结论
参考文献
综述
    参考文献
缩略词表
科研情况
后记


【参考文献】：
期刊论文
[1]微小RNA及其心血管病理生理学作用[J]. 汪南平,郝广华.  西安交通大学学报(医学版). 2010(04)
[2]血清MCP-1与急性冠脉综合征的关系[J]. 贾立娟,吕树铮,李海涛.  中国误诊学杂志. 2010(01)
[3]C-反应蛋白与动脉粥样硬化炎症的关系[J]. 徐索文,刘培庆.  中国病理生理杂志. 2009(12)
[4]TLR4信号通路与动脉粥样硬化的研究进展[J]. 盛富强,程龙献.  心脏杂志. 2009(04)
[5]Toll样受体4和肿瘤坏死因子αmRNA在动脉粥样硬化中表达的相关性研究[J]. 马克娟,马克威,赵利华.  中华心血管病杂志. 2004(10)
[6]过度训练对大鼠心肌肾素——血管紧张素系统及有关酶的影响[J]. 田振军,熊正英.  体育科学. 1999(05)



本文编号：3363742