miR-592-3p靶向TMEFF1参与线索诱导的吗啡潜伏心理渴求相关机制研究

发布时间：2021-09-17 00:12

　　毒品戒断后的高复吸率是当今社会严重的公共卫生问题。而戒断者再次接触吸毒相关的环境线索引起的潜伏心理渴求现象是导致复吸的重要因素。TMEFF1（Tomoregulin-1）是一种新型跨膜蛋白,有研究证明TMEFF1是成瘾相关蛋白（addicsin）的调节因子,参与吗啡成瘾过程,而其在吗啡复吸尤其是心理渴求过程中的作用鲜有报道。因此本研究重点关注TMEFF1蛋白在吗啡潜伏心理渴求中的作用。蛋白功能的调控涉及多种机制,其中微小RNA（microRNA,miRNA）发挥着重要作用。miRNA是指长约22个核苷酸的单链非编码RNA,主要在转录后水平调控基因表达。因此本研究拟通过高通量测序、生物信息学分析、转录组学等技术,阐明miR-592-3p靶向TMEFF1调控机制在吗啡潜伏心理渴求过程中的作用。目的:本研究以TMEFF1为目标观察其对吗啡潜伏心理渴求的影响,同时寻找其上游miR-592-3p的调控机制,为预防吗啡复吸提供新思路。方法:小鼠皮下注射（s.c.）生理盐水或吗啡（1 mg/kg或5 mg/kg）交替训练6天,在吗啡戒断后第1天（T1/WD1）、第14天（T2/WD14）进行小鼠CP... 

【文章来源】：河北医科大学河北省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

线索诱导的吗啡潜伏心理渴求模型建立Fig.1Theestablishmentofcue-inducedincubationofmorphinecravingmodel.

232.TMEFF1蛋白细胞定位及伏隔核脑区示意图如图2.A所示，取小鼠伏隔核组织进行TMEFF1蛋白（绿色荧光）、神经元核抗原抗体（NeuN，红色荧光）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP，红色荧光）免疫荧光染色，激光共聚焦显微镜下观察，结果显示绿色荧光标记的TMEFF1蛋白主要表达于细胞膜，少量表达于细胞浆，并且能与标志神经元细胞核（NeuN）的红色荧光共表达，而与标志星形胶质细胞（GFAP）的红色荧光无共存，表明TMEFF1蛋白主要表达于伏隔核神经元细胞膜（少量存在于细胞浆），而非星形胶质细胞。图2.B为小鼠伏隔核脑区示意图，红色箭头表示伏隔核核部（NAcC），蓝色箭头表示伏隔核壳部（NAcSh）。图2TMEFF1蛋白细胞定位及伏隔核脑区示意图Fig.2TMEFF1proteinlocalizationandsketchmapofthenucleusaccumbensFig.2ALocalizationofTMEFF1proteinwasshowedbyimmunofluorescenceanalysisunderlaser-scanningconfocalmicroscope.TMEFF1proteinwaslabeledwithgreenfluorescence.Neuronnuclei(NeuN)andastrocytes(GFAP)werelabeledwithredfluorescence.(Scalebar=75μm).Fig.2BSketchmapofthenucleusaccumbens(NAc).Redarrowsrepresentedthenucleusaccumbenscore(NAcC)andbluearrowsrepresentedthenucleusaccumbensshell(NAcSh).3.TMEFF1蛋白及其mRNA在吗啡潜伏心理渴求过程中的变化如图3.A-F所示，为了研究环境线索刺激对TMEFF1表达的影响，在CPP训练结束后将小鼠分为测试组（Test）和未测试组（Notest）。图3.A

25图3TMEFF1蛋白及其mRNA在吗啡潜伏心理渴求过程中的变化Fig.3ChangesofTMEFF1proteinandmRNAinincubationmodelofmorphinecravingFig.3ANosignificantchangeofTMEFF1mRNAwasobservedatthestagesofT1andT2inBothNAcCandNAcShinTestgroups.Fig.3BInNoTestgroups,therewasn’tTMEFF1mRNAchangesatthestagesofWD1andWD14inBothNAcCandNAcSh.Fig.3CExpressionofTMEFF1proteinatT2increasedintheNAcCinTestgroups,comparedtoT1,*P<0.05,butnochangeintheNAcSh.Fig.3ETheexpressionofTMEFF1proteininNAcCandNAcShinNoTestgroupshowedNosignificantchangeinWD1andWD14.Alldatawereexpressedasmean±S.E.M.(eachgroupn=4).

【参考文献】：
期刊论文
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[2]MicroRNA-132 in the Adult Dentate Gyrus is Involved in Opioid Addiction Via Modifying the Differentiation of Neural Stem Cells[J]. Meng Jia,Xuewei Wang,Haolin Zhang,Can Ye,Hui Ma,Mingda Yang,Yijing Li,Cailian Cui.  Neuroscience Bulletin. 2019(03)
[3]miRNA在植物种子发育过程中的作用[J]. 龚淑敏,丁艳菲,朱诚.  遗传. 2015(06)

博士论文
[1]中脑边缘皮质多巴胺系统在线索触发复吸中的精确调控作用[D]. 景漫毅.军事科学院 2019
[2]超极化激活环核苷酸门控阳离子（HCN）通道对甲基苯丙胺成瘾的调节作用及机制研究[D]. 曹丹旎.中国人民解放军军事医学科学院 2016

硕士论文
[1]伏隔核中不同部位在成瘾机制中的作用[D]. 王庆丰.中国人民解放军第四军医大学 2003



本文编号：3397558