电击死大鼠心脏S100A1、iNOS、Fn蛋白变化的研究

发布时间：2017-05-02 06:18

  本文关键词：电击死大鼠心脏S100A1、iNOS、Fn蛋白变化的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：电流通过人体之后可以引起感知的物理效应，称之为电击。当电流通过人体可引起局部皮肤和其他组织损伤和器官功能障碍，称为电流损伤或电损伤。若是因电流作用导致机体死亡，称作电击死（electricdeath）。在日常生活和工农业生产中，由电流所造成的伤亡目前较为常见。根据9695例电击造成事件资料的统计结果表明，电击死的比例达到了3.1％。电流斑（electric mark）又称电流印记，其形成是由于带电导体与皮肤接触，电流通过完整皮肤时，在接触处产生的焦耳热及电解作用所造成的一种特殊皮肤损伤。电流斑是诊断电击死的主要形态学依据，根据统计在220V电压所致电击伤（死)中只有1/3的案例出现典型的皮肤电流斑。尽管学者们对电击死皮肤及其他组织器官的形态学及分子生物学水平的变化进行了研究，但目前无电流斑电击致死的法医病理学诊断尚缺乏形态学依据，生前与死后电击的鉴别仍是法医病理学鉴定的难点问题之一。因此，本研究在建立大鼠电击死模型的基础上，观察电击死心脏组织形态学的变化，并对心脏S100A1、iNOS、Fn蛋白的变化进行研究，以期为电击死的法医病理学诊断提供依据。 方法：健康Sprague-Dawle（SD）大鼠56只，雌雄不限，体重220g±10g。适应环境喂养7天，随机7组，每组8只。 对照组、死后30分钟对照组、死后60分钟对照组：对照组采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后仰卧位固定在鼠架上断头处死，立即开胸后取出心脏，放入4％的多聚甲醛固定液中固定。死后30分钟组和死后60分钟组采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后断头处死大鼠，室温放置至相应时间点后开胸取出心脏放入4％的多聚甲醛固定液中固定。心脏组织制备石蜡切片，进行HE和Heidenhain染色观察，应用免疫组织化学方法观察心脏S100A1、iNOS、Fn蛋白进行观察。 电击死组：采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后将大鼠仰卧位固定在鼠架上，对侧的前后肢连接自制的电击设备，闭合电路后用220V电压电击大鼠2分钟致死，关闭电源后撤去电击设备后即刻取开胸取出心脏，实验内容等同上。 死后电击组、死后30分钟电击组、死后60分钟电击组：采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后断头处死大鼠，仰卧位固定在鼠架上，分别在死后即刻、死后30分钟、死后60分钟用220V家用电压电击大鼠2分钟，关闭电源后撤去电击设备即刻取开胸出心脏，实验内容同上。 数据以“均数±标准差(Mean±SD)”表示，用SPSS16.0统计软件进行统计学分析，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，用最小显著差法(least significant difference， LSD)作两两比较，以P0.05为有显著统计学差异。 结果： 1心脏HE染色结果 对照组的心肌组织结构清晰可见，心肌细胞大小一致，以心肌动静脉为中心呈索状整齐排列，死后30分钟组、死后60分钟组的心肌细胞染色仅见部分区域有水肿表现，局部嗜酸性变。 电击死组心肌细胞间质有水肿表现，，胞浆染色变淡，胞核染色变淡、增大，心肌层有断裂的表现，心肌收缩带坏死，部分心肌细胞有嗜酸性变。 死后电击组的心肌细胞有轻度的水肿，胞浆染色变淡，胞核染色变淡、增大，部分心肌细胞有嗜酸性变；死后30分钟电击组、死后60分钟电击组的心肌细胞染色仅见部分区域有水肿表现，局部嗜酸性变。死后电击各组心肌无明显断裂。 2心脏海登汉氏染色（Heidenhain染色）结果 对照组大鼠心脏Heidenhain染色下心肌细胞胞浆染成红色，细胞核呈黑色，细胞大小一致，死后30分钟对照组、死后60分钟对照组心脏Heidenhain染色仅见部分区域染色为黑色。电击死组大鼠心肌Heidenhain染色大部为黑色，呈片状或条状的着色。可见心肌纤维断裂和心肌收缩带坏死，死后电击组的大鼠心肌组织Heidenhain染色局部为黑色，死后30分钟电击组、死后60分钟电击组较死后电击组黑染有所扩大。 3心脏S100A1、iNOS蛋白和Fn蛋白表免疫组织化学染色(IHC)结果 S100A1：对照组心肌细胞浆呈现均匀一致的棕黄色阳性染色。死后30分钟对照组、死后60分钟对照组镜下观察与对照组比较无明显差异。电击死组阳性表达面积变小。死后电击组的镜下观察阳性表达面积介于正常组和电击死组之间，死后30分钟电击组、死后60分钟电击组镜下观察与对照组比较无明显差异。 iNOS：对照组心肌细胞内胞浆着色，死后30分钟对照组、死后60分钟对照组与对照组比较无明显差异。电击死组心肌细胞胞浆胞浆黄染增强。死后电击组的变化介于对照组和电击死组之间，死后30分钟电击组、死后60分钟电击组镜下观察与对照组比较无明显差异。 Fn：对照组心肌细胞未见阳性着色，死后30分钟对照组、死后60分钟对照组与对照组比较无明显差异。电击死组心肌细胞出现阳性着色。死后电击组阳性着色介于正常组和电击死组之间，死后30分钟电击组、死后60分钟电击组与对照组比较无明显差异。 结论：本研究通过HE染色、Heidenhain染色和免疫组织化学方法观察电击死心脏的法医病理学改变，得出以下结论： 1HE染色及Heidenhain染色所见心肌纤维断裂及心肌收缩带坏死对电击死诊断有一定意义。 2心脏S100A1、iNOS、Fn蛋白免疫组化染色提示，电击死引起心肌上述蛋白发生变化，对无电流斑诊断、生前电击和死后电击的鉴别有一定意义。
【关键词】：法医病理学 电击死 心脏 S100A1 iNOS Fn
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：D919.4
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-19
• 结果19-21
• 附图21-37
• 附表37-40
• 讨论40-45
• 结论45
• 参考文献45-50
• 综述 电击死研究的新进展50-59
• 参考文献54-59
• 致谢59-60
• 个人简历60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：340448