沉默Krüppel样因子5对电离辐射后大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响

发布时间：2021-10-05 01:49

　　目的探讨沉默Krüppel样因子5（KLF5）对电离辐射后体外培养的大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响。方法给予大鼠小肠上皮IEC-6细胞12 Gy照射,分别在照后0、0.5、1、2、3、5、7、24 h,检测KLF5的表达。给予IEC-6细胞0、2、4、8、12和16 Gy X射线照射,照后3 h收集细胞蛋白,采用Western blot法检测IEC-6细胞中KLF5的表达。设计并合成特异性针对大鼠KLF5基因的shRNA靶序列,构建到慢病毒载体中,通过感染人胚肾293T细胞,对慢病毒进行包装和滴度测定。使用包装好的慢病毒感染IEC-6细胞,荧光显微镜下观察转染效率,转染72 h后分别采用实时-PCR和Western blot方法检测感染后细胞中KLF5 mRNA及蛋白的表达。后续实验分为阴性对照组、shKLF5组、单纯照射组、照射+ shKLF5组4组。采用CCK-8法观察8 Gy照射后KLF5沉默细胞的增殖活性,流式细胞术检测8 Gy照射后KLF5沉默细胞的周期分布和凋亡,免疫荧光染色观察2 Gy照射后KLF5沉默细胞中γ-H2AX焦点数量。结果不同剂量射线照射后KLF5... 

【文章来源】：中华放射医学与防护杂志. 2020,40(07)北大核心CSCD

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【参考文献】：
期刊论文
[1]放射性肠损伤发病机制研究进展[J]. 李明,曹建平,张学光.  中华放射医学与防护杂志. 2012 (04)
[2]Krüppel-like factors 4 and 5:the yin and yang regulators of cellular proliferation[J]. Amr M.GHALEB,Mandayam O.NANDAN,Sengthong CHANCHEVALAP,W.Brian DALTON,Irfan M.HISAMUDDIN,Vincent W.YANG.  Cell Research. 2005(02)



本文编号：3418757