放射性核素 99m Tc标记新型凋亡显像分子探针Tat 49-57 -DEVD的实验研究

发布时间：2021-10-21 02:34

　　研究99mTc标记穿膜肽HIV-Tat49-57修饰的Caspase-3底物多肽Tat49-57-DEVD的制备方法；及其体外人乳腺癌MCF-7细胞经环磷酰胺诱导的肿瘤细胞凋亡凋亡模型中标记物摄取动力学实验；以及在正常昆明小鼠体内的生物学分布特征；并进一步结合单光子发射计算机断层（SPECT）显像技术,评价其应用于在荷瘤裸鼠模型活体内实时、动态地检测靶组织细胞凋亡程度的可行性研究。方法1.99mTc-HYNIC-HIV-Tat-DEVD标记条件和生物分布的研究：（1）多肽探针标记条件的研究：合成穿膜肽HIV-Tat49-57修饰的Caspase-3底物多肽Tat49-57-DEVD,以双功能联结剂联肼尼克酰胺（HYNIC）为螯合剂,采用间接标记法,三羟甲基甘氨酸（tricine）与乙二胺二乙酸（EDDA）作为协同配体,99mTc标记后经Sep-PakC18反相层析柱进行纯化后,并对其标记率、放化纯、稳定性进行研究。（2）正常小鼠体内生物学分布研究：正常昆明小鼠25只,随机分为5组,分别于尾静脉注射99mTc-HYNIC-Tat49-57-DEVD,每只动物注入标记物7.4MBq,注射后... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

三种不同的凋亡途径，最终均可使capaso3激活活

casPase一3不断重复切割形成亲水性产物，并“陷入”细胞内产生放射性信号放大，从而可获得更高的靶/非靶显像比值，具有更好的理化、生物学性能及高质量图像(见图2)。因此，在本实验研究中根据Caspase一3底物的共有结构特点，设计及筛选CasPase一3能特异性识别的小分子肚，并通过化学修饰、与穿膜肤 HlvTat49一5:连接，再通过以HYNIc作为双功能鳌合剂首次采用放射性核素”gmTc对穿膜肤Hlv-Tat49_57修饰的easpase一3底物多肤(多肤序列为RKKRRQRRRDEVD，简称为Tat49一57一DEVD)进行间接标记方法的摸索;同时对标记物进行体外肿瘤细胞凋亡模型摄取动力学以及其在正常昆明小鼠体内的生物学分布特征的研究;并进一步探讨了结合单光子发射式计算机断层(SPECT)显像技术，评价其应用于在荷瘤裸鼠模型活体内实时、动态地检测靶组织细胞凋亡程度的可行性研究。实验结果显示标记物的标记率高，体外稳定性好;标记物在人乳腺癌细胞株MCF一7细胞凋亡模型中的细胞摄取具有特异性

HYNIC一RKKRRQRRRDEvn的HPLe结果


本文编号：3448072