FTA卡采集和常温保存肋软骨组织的方法

发布时间：2021-12-11 13:07

　　目的建立一种快捷有效的肋软骨组织采集和保存方法。方法用FTA卡采集尸体肋软骨匀浆,使肋软骨组织吸附在FTA卡上,采用直扩法检验STR分型。肋软骨FTA卡采用真空物证袋密封,常温下保存两年,采用直扩法检验STR分型。结果肋软骨FTA卡采用直扩法检验可得到完整的STR分型图谱,158份检材检出率为93.0%。有效检出分型的肋软骨组织在FTA卡上常温保存两年,STR分型检出率为100%。结论本方法既可通过直扩来替代传统肋软骨组织提取DNA的繁琐步骤,又可解决肋软骨在常温下难以保存的难题。 

【文章来源】：刑事技术. 2020,45(05)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

肋软骨FTA卡直接扩增得到的STR分型

对照组肋软骨的STR分型

图2 对照组肋软骨的STR分型DNA检验人员在收到肋软骨FTA卡后，打孔直接扩增即可，省去了繁琐的消化过程，大大节省了提取时间。在实验过程中，可通过打孔器孔径的大小和打孔纸片的数目来控制扩增的DNA模板量。同时，采用FTA卡保存肋软骨组织不影响DNA二次纯化，对于杂质多的检材，可通过水洗法快速纯化，亦可采用其他方法如硅珠法对肋软骨DNA进行二次纯化和提取，以获得更高质量的模板DNA。FTA卡上的肋软骨组织常温保存两年检出率能达到100%，未见等位基因丢失现象，证实了FTA卡保存肋软骨DNA的有效性，已满足日常物证送检与保存的需求。当然，由于DNA在保存过程中会存在降解，上述结果呈现刚制成的肋软骨FTA卡直接扩增图谱在PCR产物峰高波动范围、同一基因座上杂合间峰值比、同一荧光染料不同基因座间的均衡性等好于两年后的肋软骨FTA卡直扩结果的现象。本研究中的158份肋软骨组织通过常规方法（Chelex-100法）提取，均得到了完整的STR分型，将其全部转移到FTA卡上，直接扩增，有147份肋软骨FTA卡得到了完整的STR分型，有11份FTA卡未检出有效的STR分型。这11份属于高度腐败尸体肋软骨，采用常规的Chelex-100法提取需要加大检材的量，否则也不能检出有效STR分型。高度腐败尸体肋软骨组织DNA含量低，采用本方法不适用于直扩。

【参考文献】：
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本文编号：3534733