调控Runx2的重力敏感miRNA的筛选研究

发布时间：2022-05-08 16:41

　　目的在预测可能调控Runx2表达的miRNA中,筛选出具有重力敏感性的miRNA,为失重性骨丢失的在体靶向干预提供研究靶点。方法通过生物信息学分析方法预测出与Runx2结合的4条miRNA;利用2D回转器对前成骨细胞MC3T3-E1进行模拟失重处理;向MC3T3-E1细胞中转染miR-135a-5p mimic或inhibitor;采用qRT-PCR方法检测miRNA及Runx2 mRNA的表达变化;采用Western blot方法检测Runx2蛋白的表达变化。结果生物信息学预测miR-135a-5p、miR-137-3p、miR-205-5p和miR-217-5p可与Runx2结合,其中模拟失重条件下miR-135a-5p的表达可发生显著改变。与对照组相比,模拟失重48 h后miR-135a-5p的表达明显上调,且72 h内呈现稳定上调趋势（P<0.05）;与对照组相比,模拟失重72 h内Runx2的mRNA和蛋白表达明显下调（P<0.05）;转染miR-135a-5p mimic或inhibitor后,Runx2的mRNA表达无显著改变,Runx2的蛋白表达则分别显著下... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 细胞培养
    3 模拟失重
    4 细胞转染
    5 实时荧光定量PCR
    6 Western blot检测
    7 生物信息学方法
    8 统计学方法
结 果
    1 生物信息学预测与Runx2具有结合位点的4条miRNA
    2 模拟失重条件下MC3T3-E1细胞miRNA的表达变化
    3 模拟失重72 h内MC3T3-E1细胞miR-135a-5p表达变化
    4 模拟失重72 h内miR-135a-5p与Runx2的表达呈负相关
    5 miR-135a-5p可调控Runx2的蛋白表达
    6 miR-135a-5p可部分缓解模拟失重条件Runx2的表达降低
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-132-3p靶向的重力敏感长链非编码RNAs的筛选及调控探讨[J]. 王可,胡泽兵,王艺璇,张丽君,曹新生,石菲,张舒.  解放军医学院学报. 2018(05)
[2]模拟微重力通过调节AKT磷酸化抑制前成骨细胞的增殖[J]. 周骅,曹新生,胡泽兵,王瀚,王艺璇,张舒.  现代生物医学进展. 2017(02)
[3]丝裂原活化蛋白激酶与骨重建平衡的研究进展[J]. 方清清,李志忠,陈克明.  解放军医药杂志. 2016(10)



本文编号：3652007