运动疲劳经20-HETE和PKC诱导心肌细胞凋亡的研究

发布时间：2017-05-15 10:08

  本文关键词：运动疲劳经20-HETE和PKC诱导心肌细胞凋亡的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：运动疲劳是指机体的机能无法保持在某一特定的水平或不能维持预定的运动强度的机体能力暂时性下降的现象。其产生的机制比较复杂且涉及到身体的多个器官。20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)是花生四烯酸在细胞色素P450ω-羟化酶催化下所生成的一种代谢产物,是一种重要的血管收缩剂。为了揭示运动疲劳是否导致了心肌细胞中内源性物质20-HETE的释放,从而通过20-HETE诱导心肌细胞凋亡,以及运动疲劳后是否激活了PKC,进而引起心肌细胞凋亡,我们设计如下实验来探讨运动疲劳对心肌细胞凋亡的影响及其诱导心肌细胞凋亡的机制。将大鼠随机分为4组：对照组,运动疲劳组,运动疲劳+20-HETE抑制剂HET0016组和运动疲劳+PKC抑制剂白屈菜赤碱(CHE)组。对照组大鼠每天腹腔注射生理盐水lml。其余三组大鼠在每次游泳运动前10min分别腹腔注射生理盐水、HET0016(lmg/kg)和CHE(5mg/kg)。随后进行15天的游泳运动疲劳训练。实验方法及结果如下：(1)通过Hoechst染色检测发现,运动疲劳后大鼠的心肌细胞核体积较对照组明显减小,并出现了核固缩、染色质趋边等现象；而运动前腹腔注射20-HETE合成的抑制剂HET0016或PKC抑制剂白屈菜赤碱(CHE)后,明显抑制了运动疲劳引起的细胞核形态变化。(2)通过TUNEL法检测心肌细胞凋亡发现,运动疲劳大鼠心肌细胞凋亡率显著上升(从对照组的3.054%±0.96%到17.36%±1.11%)；而运动疲劳+HET0016组和运动疲劳+CHE组,细胞凋亡率较运动疲劳组显著下降(分别为6.82%±0.72%和7.12%±0.67%)。(3)利用RT-PCR的方法对抑凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax mRNA的表达进行检测发现,运动疲劳组Bax mRNA的表达较对照组显著升高,而Bcl-2mRNA的表达明显降低；运动前腹腔注射HET0016和CHE后则明显抑制了运动疲劳引起的如上变化。上述研究结果表明,运动疲劳诱导了心肌细胞凋亡,并且运动疲劳能够促进心肌内源性物质20-HETE的释放,此外运动疲劳还激活了PKC,从而引起心肌细胞凋亡的发生。
【关键词】：运动疲劳 心肌细胞凋亡 20-HETE PKC
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R87
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 目录6-7
• 引言7-12
• 1. 运动疲劳的产生机制7
• 2. 运动疲劳与骨骼肌损伤及细胞调亡7-8
• 3. 运动疲劳与肝脏损伤和肝细胞调亡8
• 4. 运动疲劳与淋巴细胞调亡8-9
• 5. 运动疲劳与心肌损伤和心肌细胞调亡9
• 6. 20-HETE对心肌损伤及心肌细胞调亡的影响9-10
• 7. PKC在运动中的作用10-12
• 材料和方法12-17
• 1. 实验材料12
• 1.1 实验动物12
• 1.2 实验仪器12
• 1.3 试剂及药品12
• 2. 实验方法12-17
• 2.1 运动疲劳大鼠模型的制备13
• 2.2 取材13
• 2.3 冰冻切片的制备13
• 2.4 Hoechst染色检测心肌细胞核形态变化13-14
• 2.5 TUNEL法检测心肌细胞凋亡14-15
• 2.6 RT-PCR检测心肌Bcl-2和Bax mRNA表达水平15-16
• 2.7 数据的统计学处理16-17
• 实验结果17-22
• 1. HET0016和CHE对运动疲劳诱导的心肌细胞核形态变化的影响17-18
• 2. HET0016和CHE对运动疲劳诱导的心肌细胞凋亡的影响18-20
• 3. HET0016和CHE对运动疲劳后心肌细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的影响20-22
• 讨论22-25
• 结论25
• 创新点25-26
• 参考文献26-29
• 英文缩写29-30
• 致谢30

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：367451