hCDMP-2基因转染比格犬成肌细胞促进半月板纤维软骨组织损伤修复的研究
发布时间:2023-05-10 03:44
目的:通过设立相应的实验组与对照组探索比格犬成肌细胞在转染了hCDMP—2基因后对比格犬半月板纤维软骨组织损伤修复的作用。方法:在PubMed上检索hCDMP—2 CDS序列,进行CDS序列合成,hCDMP—2基因PCR产物的克隆,阳性克隆的筛选与鉴定,序列测定与BLAST分析。用慢病毒载体系统将hCDMP—2基因转染至体外分离纯化后的比格犬成肌细胞,采用实时荧光定量PCR(Real-time Fluorescence Quantitative PCR)方法进行转染成功率及转染后细胞hCDMP—2基因表达的鉴定,同时采用westernblot方法鉴定转染后细胞hCDMP—2蛋白的表达。使用进口PGA支架材料,通过特定的模具成形,滴加PLA,进行PLA/PGA支架的制作。制作比格犬半月板损伤模型:半月板前角距离前缘0.5cm处横贯整个半月板横径不保留基底部、宽2mm、关节囊缘厚2mm、关节腔缘厚1.5mm的缺损,损伤区涉及红—红区、红—白区与白—白区。进行比格犬半月板损伤修复体内分组动物实验:设立单纯缝合组(A组)、加有hCDMP—2细胞因子的PLA/PGA支架缝合组(B组)、单纯转染慢...
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本文编号:3812961
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