一次性力竭运动对大鼠大脑皮质线粒融合分裂基因表达的影响

发布时间：2017-05-21 14:00

  本文关键词：一次性力竭运动对大鼠大脑皮质线粒融合分裂基因表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的：通过研究力竭运动后大鼠大脑皮质的线粒体融合蛋白Mfn-1和分裂蛋白Drp-1的基因表达的变化，及其与细胞凋亡之间存在的关系。对力竭运动导致大脑皮质细胞凋亡的作用机制进行初步的探讨。研究方法：选取180～220g的成年雄性大鼠40只，随机将大鼠分为5个组即：空白组、运动后即刻组、运动后12小时组、运动后24小时组、运动后48小时组并建立模型。空白组未进行任何干预处理，力竭运动后即刻取材的为运动后即刻组，力竭运动后12小时、24小时、48小时取材的分别为运动后12小时组、运动后24小时组、运动后48小时组。用免疫组化观察各组大脑皮质细胞中凋亡基因Bax和Caspase-3的表达；用实时荧光定量PCR技术观察大脑皮质细胞Mfn-1和Drp-1的mRNA表达量；采用Western blot方法观察大脑皮质细胞Mfn-1和Drp-1的蛋白表达情况。研究结果：(1)免疫组化：一次性力竭游泳运动后引起凋亡调控基因Bax和Caspase-3表达上升，Bax,Caspase-3蛋白阳性率表达水平：空白组蛋白表达水平与其他各组有明显差异(P＜0.01);运动后即刻组蛋白表达水平增高，与其他各组有显著差异(P＜0.01);运动后12小时蛋白表达水平最高与其他各组有显著差异(P＜0.01);运动后24小时蛋白表达水平降低，与其他各组与各组有显著差异(P＜0.01);运动后48小时蛋白表达水平降低但比空白组高，与其他各组有显著差异(P＜0.01);各组数据有统计学意义。 (2)RT-PCR:一次性力竭游泳运动后大鼠大脑皮质线粒体Drp-1、Mfn-1mRNA表达量同免疫组化结果呈上升趋势。空白组Drp-1，Mfn-1mRNA表达量与其他各组有明显差异(P＜0.01);运动后即刻组表达量开始增加，与其他各组有显著差异(P＜0.01);运动后12小时表达量逐渐增加，与其他各组有显著差异(P＜0.01);运动后24小时表达量最高，与其他各组与各组有显著差异(P＜0.01)；运动后48小时表达量降低但高于空白组，与其他各组有显著性差异(P＜0.01)。 (3) Western Blot: Drp-1基因蛋白表达量在空白组中表达量最低与其他各组间有显著性差异(P＜0.01)；运动后即刻组和运动后12小时中的Drp-1基因蛋白表达水平增高，两组间无显著性差异(P＞0.01)，与其他各组有显著性差异(P＜0.01)；运动后24小时与运动后48小时组中Drp-1基因蛋白表达水平增高，两组间无明显差异(P＞0.01)，与其他各组有显著性差异(P＜0.01)。Mfn-1基因蛋白表达量在空白组中表达量与运动后即刻组基因蛋白表达水平两组间无显著性差异(P＞0.01)，与其他各组有显著性差异(P＜0.01)；运动后12小时与运动24小时组基因蛋白表达水平增高，两组间无显著性差异(P＞0.01)；与其他各组有显著性差异（P＜0.01）；运动后48基因蛋白表达水平最高，与其他各组有显著性差异(P＜0.01)。研究结论：一次性力竭运动后大鼠皮质细胞线粒体融合分裂基因表达改变与细胞凋亡相关蛋白的表达一致，力竭运动可能是改变线粒体融合分裂基因的表达影响细胞凋亡。
【关键词】：一次性力竭运动 大脑皮质 线粒体融合分裂 Drp-1 Mfn-1 细胞凋亡
【学位授予单位】：成都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R87
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 前言10-11
• 2 文献综述11-19
• 2.1 运动中枢性疲劳11-13
• 2.1.1 大脑皮质与运动性中枢疲劳11-12
• 2.1.2 线粒体与运动性中枢疲劳12-13
• 2.2 运动对线粒体的影响13-14
• 2.2.1 线粒体的作用、功能13
• 2.2.2 线粒体的形态、结构13
• 2.2.3 运动对线粒体的影响13-14
• 2.3 线粒体的融合与分裂14-16
• 2.4 线粒体调控基因16
• 2.4.1 Drp-1 的结构、功能、作用16
• 2.4.2 Mfn-1 的结构、功能、作用16
• 2.5 细胞凋亡16-19
• 2.5.1 运动与细胞凋亡17
• 2.5.2 线粒体与细胞凋亡17-18
• 2.5.3 Bax，Caspase-3 凋亡基因18
• 2.5.4 线粒体融合分裂与细胞凋亡18-19
• 2.6 运动对 Mfn-1、Drp-1 的影响19
• 3 研究方法19-26
• 3.1 实验材料19-21
• 3.1.1 实验动物19-20
• 3.1.2 实验主要仪器20-21
• 3.2 实验方法21-26
• 3.2.1 实验动物模型建立与分组21-22
• 3.2.2 实验取材与固定22
• 3.2.3 测试指标22
• 3.2.4 免疫组化的检测步骤及方法22-23
• 3.2.5 荧光定量 PCR 的检测方法及步骤23-24
• 3.2.6 Western Blot 的检测方法及步骤24-26
• 3.3 统计学分析26
• 4 实验结果26-37
• 4.1 免疫组化结果26-30
• 4.2 荧光定量 PCR 的结果30-32
• 4.2.1 RNA 提取后电泳鉴定结果30-31
• 4.2.2 荧光定量 RT-PCR 反应特异性结果31-32
• 4.3 Mfn-1，Drp-1 RT-PCR 结果32-33
• 4.4 Mfn-1 ，Drp-1 Western Blot 结果33-37
• 5 讨论37-41
• 5.1 力竭运动与大脑细胞凋亡37-38
• 5.2 线粒体与细胞凋亡38-40
• 5.3 力竭运动对大脑皮质线粒体影响40
• 5.4 运动对线粒体融合分裂基因影响40-41
• 6 结论41-42
• 7 参考文献42-47
• 致谢47-48
• 在读期间发表的学术论文与研究成果48-49
• 附件49-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 宋丹云,张文光,郑敏麟;超负荷训练后小鼠心肌线粒体超微结构的形态计量学研究[J];福建中医学院学报;2004年03期

2 郝希纯;王东明;;Drp1蛋白调节线粒体分裂机制及其在疾病中的作用[J];广东医学;2011年08期

3 李伟;;运动性疲劳中枢机制的研究进展[J];甘肃联合大学学报(自然科学版);2012年06期

4 张昊楠;;一次性力竭运动对大鼠血细胞形态学的影响[J];黑龙江科技信息;2011年25期

5 刘晓婷;王延让;张明;;线粒体介导细胞凋亡的研究进展[J];环境与健康杂志;2013年02期

6 朱玉山;陈俭;;线粒体与细胞凋亡调控[J];生命科学;2008年04期

7 刘红梅;蒋继志;廖祥儒;;线粒体的研究[J];生物学通报;2006年02期

8 白云;;OPA1与细胞色素C释放的关系及其在细胞凋亡中的作用[J];实用医技杂志;2007年08期

9 张勇;大鼠力竭性运动后心肌和骨骼肌线粒体膜脂质过氧化水平变化[J];天津体育学院学报;1994年01期

10 张勇,张薇,时庆德,李静先,陈家琦;急性运动心肌缺氧对大鼠心肌纤维和线粒体膜结构及功能的影响[J];天津体育学院学报;1997年01期

  本文关键词：一次性力竭运动对大鼠大脑皮质线粒融合分裂基因表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：383832