大鼠甲醇中毒后视网膜电图反应及αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的变化及相关性

发布时间：2017-05-26 12:13

  本文关键词：大鼠甲醇中毒后视网膜电图反应及αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的变化及相关性，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：研究甲醇中毒后αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜、玻璃体液中的表达以及视网膜电图反应(electroretinogram, ERG)的变化规律,初步探索两者之间的关联性。方法：将SD大鼠分为对照组(A组)、中毒3天组(B组)和中毒7天组(C组)。于相应时间点分别记录视网膜电图反应,利用色谱法检测心血中甲醇、甲酸浓度以及组织中的甲酸浓度。通过Western blot方法验证aB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜、玻璃体中的表达。结果：①ERG的视杆反应,B组的a波和b波振幅分别下降至对照组的53%和37%(p0.05),C组仅b波振幅约下降至对照组的48%(p0.05)。最大混合反应,B组的a波和b波振幅分别下降至对照组的53%和40%(p0.05),C组仅b波振幅约下降至对照组的44%(p0.05),B组a波的潜伏期延迟了26%(p0.05),C组仅a波潜伏期延迟了28%(p0.05)。振荡电位反应,B组和C组的总振幅分别下降至对照组的53%和57%(p0.05),总时程分别延迟15%和60%(p0.05),与对照组相比,B组的OS1、OS3、OS4和OS5以及C组的OS3、OS4、和OS5的波幅均降低(p0.05),且B组和C组之间OS1之间的差异具有统计学意义(p0.05)。与对照组相比,B组的峰间隔IPI1和C组的IPI1-4均增宽(p0.05),而且C组的IPI1-4比B组增宽的更为明显(p0.05)。视锥反应,B组a波和b波的振幅分别下降至对照组的53%和40%(p0.05),C组仅b波的振幅下降至对照组的69%(p0.05),B组和C组之间b波振幅的差异具有统计学意义(p0.05),C组a波和b波潜伏期分别延迟了29%和9%(p0.05)。②在中毒组,B组的甲醇血浓度为1.0 mg/mL,而C组甲醇血浓度低于顶空气相色谱仪检测阈值；B组的甲酸血浓度为0.61mg/mL,C组甲酸浓度接近B组,为0.60mg/mL,与B组比较,C组脑和胃组织内的甲酸浓度有增加的趋势,而肝和肾组织中的甲酸浓度反而有下降趋势。③在视网膜和玻璃体混合物中,甲醇中毒组aB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的表达量较对照组有增加趋势,且C组的表达量的上调更明显。相对于对照组,B组视网膜组织内未检测到明显的αB晶状体蛋白表达量,ALDH2和ATP5A1的表达没有发现明显的改变；在C组,视网膜组织内的αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的表达均呈现下调的现象。在玻璃体液内,B组αB晶状体蛋白的表达改变不是很明显,但C组αB晶状体蛋白发生上调；在中毒组玻璃体液内ALDH2和ATP5A1的表达均发生上调,且C组玻璃体液内的ALDH2和ATP5A1高表达现象较B组更为明显。结论：大鼠甲醇中毒后ERG损害明显,且中毒7天组的损害比3天组更为严重,可能与其代谢产物甲酸的蓄积作用有关。相较于视网膜,玻璃体液内αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1表达的变化更适宜作为甲醇中毒视网膜毒性的生物学标志。甲醇中毒后视网膜功能改变与甲酸的蓄积以及αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1表达变化之间可能存在潜在的关联,值得进一步探索。
【关键词】：甲醇中毒 甲酸 视网膜电图 αB晶状体蛋白 色谱法
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：D919
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-17
• 1 理论与实践基础11-12
• 2 研究进展12-15
• 3 研究目的15
• 4 研究意义15
• 5 本研究的创新性15-17
• 第一部分 大鼠甲醇中毒后视网膜电图反应的变化17-29
• 1 材料与方法17-20
• 1.1 甲醇中毒模型17-19
• 1.2 统计分析方法19-20
• 2 结果20-25
• 2.1 中毒表现20
• 2.2 视网膜电图反应20-25
• 3 讨论25-28
• 4 小结28-29
• 第二部分 甲醇及其代谢产物甲酸浓度的检测29-41
• 一、血液中甲醇浓度的检测29-33
• 1 材料与方法30
• 1.1 实验材料30
• 1.2 方法30
• 2 结果30-33
• 2.1 甲醇色谱峰与标准曲线30-31
• 2.2 甲醇血浓度31-33
• 3 讨论33
• 4 小结33
• 二、血液及组织中甲酸浓度的检测33-41
• 1 材料与方法34-35
• 1.1 实验材料34
• 1.2 方法34-35
• 2 结果35-38
• 2.1 甲酸色谱峰与标准曲线35
• 2.2 血液及组织中的甲酸浓度35-38
• 3 讨论38-39
• 4 小结39-41
• 第三部分 αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜和玻璃体中的表达41-48
• 1 材料与方法41-42
• 1.1 材料和试剂41-42
• 1.2 实验方法42
• 2 实验结果42-44
• 2.1 在视网膜和玻璃体液的混合物42-43
• 2.2 在视网膜组织43
• 2.3 在玻璃体液43-44
• 3 讨论44-47
• 4 小结47-48
• 结论48-49
• 参考文献49-56
• 综述 αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及作用机制的研究进展56-64
• 参考文献60-64
• 缩略词64-65
• 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文65-67
• 致谢67-69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 俞佳艳;孙爱军;贾建国;徐丹令;王克强;邹云增;葛均波;;转染乙醛脱氢酶2基因对心肌梗死后心衰小鼠心功能的影响[J];中国临床医学;2008年03期

2 王英杰,苏旭;全血甲酸含量的气相色谱测定[J];职业医学;1992年02期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 陈捷敏;甲醇中毒视网膜功能结构和蛋白质组学研究[D];复旦大学;2012年

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本文编号：396790