MMP-9、TIMP-1在孕鼠羊水栓塞发病机制的实验性研究

发布时间：2017-06-01 04:10

  本文关键词：MMP-9、TIMP-1在孕鼠羊水栓塞发病机制的实验性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本课题拟使用孕鼠模拟产妇羊水栓塞的过程,通过免疫组化检测孕鼠羊水栓塞后肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达,ELISA法检测血清及羊水中的MMP-9和TIMP-1前后的变化,探讨其与羊水栓塞的关系,为法医学死因鉴定和临床诊断提供参考。方法:30只健康SD孕晚期大鼠,体重300±50g(第三军医大实验动物部提供),随机分为生理盐水组(NS组,n=10)、羊水原液组(AF组,n=10)、羊水-胎粪液组(MAF组,n=10);麻醉生效后先予眼眶取血1ml,子宫次全切除术取下子宫并破膜取羊水5ml,部分用于配成羊水原液;另用胎鼠取胎粪,配成羊水-胎粪液;从腹主静脉注入NS、羊水原液、羊水-胎粪液后,观察1h,再取血2ml,标本离心(3000r/min,10min)、分离,-80℃保存待检。处死大鼠取右肺组织及相连的支气管用于石蜡包埋、切片、HE染色和免疫组化。实验定量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用软件SPSS 17.0进行统计分析,各组数据先进行正态分布检验,符合者组内进行t检验,组间进行方差分析,以α=0.05作为检验水准;不符合者选择秩和检验,以α=0.05作为检验水准。结果:1.临床表现:NS组孕鼠从腹主静脉注入生理盐水后出现短暂性呼吸加快,嘴唇稍发绀,心率增快,1~2min后逐渐恢复,穿刺腹主动脉抽血后止血时间为1~3 min;AF组较NS组出现心率增快早,并伴有呼吸频率加快,然后变慢,且持续时间更长,期间出现局部抽搐、嘴唇发绀、大小便失禁等症状,穿刺后止血时间为3~6 min;MAF组出现类似症状时间更早且更严重,并且伴有凝血功能障碍表现,穿刺后止血时间10~15 min;3组中未见死亡案例。2.病理学检查:肉眼观:NS组肺组织表面光滑,呈暗红色,AF组表面粗糙、淡红色,MAF组表面粗糙、粉红色。HE染色显示:NS组未见明显异常;AF组及MAF组的大鼠肺组织均可见炎性细胞浸润,以MAF组更为明显,部分肺血管内可见到染成淡粉色的不定形物质及丝状物。3.CK16 IHC染色显示:NS组未见明显异常;AF组和MAF组在大鼠肺血管可见呈棕黄色、细丝状角化鳞状上皮。4.大鼠羊水和羊水-胎粪液中MMP-9、TIMP-1 ELISA法检测结果示:MMP-9羊水原液浓度约为(3.105±0.345)μg/L,羊水-胎粪液浓度约为(6.125±0.543)μg/L;TIMP-1的羊水原液浓度约为(99.105±3.145)pg/m L,羊水-胎粪液浓度约为(55.335±2.543)pg/m L。5.大鼠血清MMP-9 ELISA法检测结果示:NS组实验前、后,三组实验前两两比较无统计学意义(p0.05),AF组及MAF组实验前后比较有统计学意义(p0.05),MAF组与AF组及NS组、AF组与NS组比较均有统计学意义(p0.05)。6.大鼠血清TIMP-1 ELISA法检测结果示:NS组实验前、后,三组实验前两两比较无统计学意义(p0.05),AF组及MAF组实验前后比较有统计学意义(p0.05),MAF组与AF组及NS组、AF组与NS组比较均有统计学意义(p0.05)。7.MMP-9/TIMP-1血清实验前后动态平衡情况:NS组实验前(5.856±0.105);注入生理盐水后(6.246±0.135);AF组实验前(5.759±0.128),注入羊水原液后(7.278±0.095);MAF组实验前(5.657±0.123),注入羊水-胎粪液后(10.552±0.996)。8.MMP-9、TIMP-1 IHC结果示:NS组肺泡内组织细胞、浆细胞及中心粒细胞中见MMP-9少量表达,颜色较浅,而TIMP-1大量表达,颜色较深;AF组、MAF组肺泡内组织细胞、浆细胞及中心粒细胞中可见MMP-9中到大量表达,颜色较深,其中MAF组更加明显;以及见TIMP-1一定量表达,颜色较浅。结论:1.通过HE染色、IHC方法证实大鼠羊水栓塞模型建立成功。2.MMP-9和TIMP-1异常可能参与羊水栓塞肺损伤的过程,并加剧了肺损伤发生发展。3.MMP-9/TIMP-1失衡可能参与羊水栓塞的病理生理过程。
【关键词】：羊水栓塞 CK16 MMP-9 TIMP-1 ECM 平衡
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：D919
【目录】：

• 英汉缩略词对照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-13
• 第一部分 实验性孕鼠羊水栓塞模型的制备13-21
• 材料与方法13-17
• 结果17-18
• 讨论18-20
• 结论20-21
• 第二部分 MMP-9、TIMP-1 在孕鼠羊水栓塞发病机制的实验性研究21-31
• 材料与方法21-23
• 结果23-27
• 讨论27-30
• 结论30-31
• 参考文献31-34
• 综述34-41
• 参考文献39-41
• 致谢41-42
• 作者简介42

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杨阳;沈鑫;余舰;;大鼠羊水栓塞动物模型制备方法的改进[J];遵义医学院学报;2015年01期

2 黄兰兵;杨欣建;;核因子-κB表达与SIRS的关系及参附注射液干预作用的实验研究[J];深圳中西医结合杂志;2014年03期

3 刘凤洁;沈汝;杨惠娟;李禾;于莹;;1996年至2010年北京市羊水栓塞孕产妇死亡分析[J];中国妇产科临床杂志;2013年03期

4 Rabenstein D L;赵丽娟;樊志萍;边玲;;肝素和硫酸乙酰肝素的功能[J];食品与药品;2013年01期

5 王茜;袁晓洁;高德红;王丽萍;郝玉凤;;大鼠羊水栓塞后类胰蛋白酶、TNF-α水平变化的研究[J];中国优生与遗传杂志;2012年08期

6 杨艳;;羊水栓塞导致孕产妇死亡21例分析[J];中国社区医师(医学专业);2012年15期

7 赵敏;张国栋;余舰;;实验性大鼠羊水栓塞角蛋白16表达的变化及意义[J];齐齐哈尔医学院学报;2011年17期

8 于家华,王成海;抗角蛋白16抗体免疫组化染色在羊水栓塞病理诊断中的应用[J];中国法医学杂志;2005年05期

9 董文珠,李兆申;细胞外基质、基质金属蛋白酶在急性胰腺炎相关性肺损伤中的作用[J];国外医学(消化系疾病分册);2005年03期

10 周学武,尚涛,田石;实验性大鼠羊水栓塞后补体C_3C_4水平变化的研究[J];中国实用妇科与产科杂志;2005年01期

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本文编号：411579