模拟微重力抑制间充质干细胞增殖及成骨分化机制的研究

发布时间：2017-09-09 12:26

  本文关键词：模拟微重力抑制间充质干细胞增殖及成骨分化机制的研究

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【摘要】：微重力对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的抑制可能是太空飞行过程中骨形成降低的原因之一，其机制可能涉及与细胞生长和分化的信号传导相关的细胞粘附性和细胞骨架的变化。 本课题以小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）为实验对象，利用随机定位仪（RPM）模拟微重力（SMG），研究模拟微重力对骨髓间充质干细胞增殖，细胞骨架，细胞核，成骨分化，以及对细胞的粘附，增殖和成骨分化的重要信号分子的表达的影响。 实验内容包括：BMSCs生长曲线的测定，免疫荧光染色法研究细胞微管和微丝骨架的变化、细胞核骨架成分LaminA和SUN1的改变、粘着斑蛋白VCL的变化，，免疫印迹法检测增殖相关重要信号分子ERK、p-ERK、AKT、p-AKT、p85α、p85β的蛋白表达量和活性的变化。免疫荧光染色法和免疫印迹法结合检测粘附相关分子粘着斑激酶FAK蛋白表达量和活性的变化。在SMG和1G条件下用成骨诱导液定向诱导培养小鼠BMSCs，采用茜素红染色、碱性磷酸酶ALP测定BMSCs向成骨细胞分化的情况，RT-PCR法测定分化相关基因OC的表达，免疫印迹法检测分化相关重要信号分子ERK、p-ERK、AKT、p-AKT、p85β的蛋白表达量和活性的变化 实验结果显示，在模拟微重力条件下，骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化受到抑制；骨髓间充质干细胞微丝结构和分布异常；细胞形态改变；细胞粘附性降低，粘着斑蛋白VCL和黏着斑激酶FAK的表达下降；细胞生长和分化信号分子ERK1/2和AKT的磷酸化水平以及p85β表达下降。 上述研究结果表明，模拟微重力条件下的细胞骨架改变、细胞粘附性降低和细胞增殖以及成骨分化的信号通路相互作用，导致对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的抑制作用。
【关键词】：模拟微重力 骨髓间充质干细胞 小鼠 细胞增殖 成骨分化 信号通路
【学位授予单位】：北京理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R85
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 目录8-10
• 注释表10-11
• 第1章 绪论11-20
• 1.1 研究背景及目的11
• 1.2 国内外研究现状及发展趋势11-15
• 1.2.1 微重力及地面模拟微重力的模型11-13
• 1.2.2 骨髓间充质干细胞（BMSCs）13
• 1.2.3 微重力对骨髓间充质干细胞影响的研究进展13-15
• 1.3 课题的研究内容和意义15-20
• 1.3.1 课题的研究内容15-17
• 1.3.2 技术路线17-19
• 1.3.3 课题的研究意义19-20
• 第2章 模拟微重力（SMG）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的影响及机制研究20-43
• 引言20-21
• 2.1 模拟微重力（SMG）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的影响21-32
• 2.1.1 实验材料21-22
• 2.1.2 实验方法22-24
• 2.1.3 实验结果24-32
• 2.2 模拟微重力（SMG）影响骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的机制32-41
• 2.2.1 实验材料32-34
• 2.2.2 实验方法34-37
• 2.2.3 实验结果37-41
• 2.3 本章小结41-43
• 第3章 模拟微重力（SMG）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨分化的影响及机制研究43-62
• 引言43-44
• 3.1 模拟微重力（SMG）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨分化的影响44-53
• 3.1.1 实验材料44-45
• 3.1.2 实验方法45-50
• 3.1.3 实验结果50-53
• 3.2 模拟微重力（SMG）影响骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨分化的机制 .53-60
• 3.2.1 实验材料53-55
• 3.2.2 实验方法55-58
• 3.2.3 实验结果58-60
• 3.3 本章小结60-62
• 结论与展望62-64
• 结论62-63
• 展望63-64
• 参考文献64-70
• 致谢70

【参考文献】

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本文编号：820439