模拟微重力条件下昆明小鼠早期胚胎体外发育及其G6PD基因表达

发布时间：2019-11-24 21:28

【摘要】：目的研究模拟微重力条件下培养的小鼠早期胚胎体外发育与1g重力条件下体外发育的差异。方法检测葡萄糖代谢关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)在昆明小鼠早期胚胎体外不同重力条件下培养各个时期基因的转录与表达。结果模拟微重力培养条件下,胚胎体外发育受到明显的抑制,模拟微重力不利于小鼠胚胎的体外发育。用CZB+10%FCS进行培养,2-细胞期培养的囊胚率为零,显著低于常规培养的23.92%;4-细胞期培养的囊胚率为18.44%,显著低于常规培养的80.12%。利用G6PD的内、外两对引物,检测昆明小鼠早期胚胎体外发育各个阶段的G6PD基因的转录与表达。从2-细胞期开始体外常规培养的胚胎,发育至4-、8-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚及退化囊胚都有G6PD基因的转录与表达。在模拟微重力条件下,从2-细胞期开始培养的胚胎,发育至4-细胞期、桑椹期、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的转录和表达,而退化的2-细胞胚胎没有检测到G6PD基因的转录与表达。结论两种培养方式之间,G6PD基因的转录与表达不存在差异,说明早期胚胎都存在磷酸戊糖途径。
【图文】：

可见从22细胞期开始体外常规培养的胚胎,早期胚胎42细胞、82细胞、桑椹胚、囊胚都可扩增出一条378bp的特异性条带(见图1)。说明体外培养的胚胎从42细胞到囊胚期皆有G6PD基因的转录和表达,亦表达G6PD。　　小鼠22细胞期胚胎开始在模拟微重力条件下进行体外培养,各期胚胎通过巢式RT2PCR扩增实验检测G6PD的表达情况,可见早期22细胞开始培养,体外退化的22细胞胚胎没有扩增出特异性条带;发育到42细胞期、桑椹期、囊胚期(4细胞开始培养)的胚胎都可扩增出一条378bp的特异性条带,退化桑椹胚(细胞出现碎片、囊胚腔缩图1　巢式RT2PCR扩增1g重力条件下昆明小鼠体外培养早期胚胎G6PD的结果Fig.1　Results of expressions of G6PD by nested RT2PCR in Kunm ing early embryos cultured undernormal gravityLane127: negative contro,l m ouse liverRNA as positivecontro,l42cell embryos

m ouse liverRNA as positivecontro,l42cell embryos,82cell embryos, m orula, blas2tocyst, degenerate blastocyst小等)亦扩增出一条378bp的特异性条带(图2)。说明体外发育42细胞、桑椹胚、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的转录和表达,而在体外退化的22细胞期胚胎(细胞出现大量碎片、体积缩小)检测不到G6PD基因的转录。图2　巢式RT2PCR扩增模拟微重力条件下昆明小鼠体外培养早期胚胎G6PD的结果Fig.2　Results of expressions of G6PD by nested RT2PCR in Kunm ing early embryos cultured undersimulated m icrogravityLane127: negative contro,l m ouse liverRNA as positivecontro,l degenerate22cell embryos,42cell embryos,m orula, blastocyst, degenerate m orula讨　论模拟微重力条件下小鼠胚胎的旋转培养　模拟微重力条件下

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

1 张守全,孙拓;昆明白小鼠1细胞胚胎体外培养系统的研究[J];动物学报;1995年04期

2 江青艳,张守全,劳全林,高淑静,傅伟龙;模拟微重力条件下大鼠肝细胞的三维培养及其功能[J];动物学报;2002年06期

3 张守全,杨关福,戴文滔;巢式RT-PCR检测昆明小鼠早期胚胎中G6PD基因表达[J];华南农业大学学报;1999年01期

4 江青艳,张守全,傅伟龙;微重力组织工程的产生与发展[J];中国生物工程杂志;2002年03期

5 张守全,高淑静,江青艳,冯定远,彭智勇;模拟微重力环境对昆明小鼠早期胚胎体外发育的影响(简报)[J];实验生物学报;2002年01期

6 张守全,王，

本文编号：2565625