白藜芦醇对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

发布时间：2017-04-12 06:11

  本文关键词：白藜芦醇对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景和目的肝移植已成为治疗终末期肝脏疾病、急性肝功能衰竭的一种最有效的选择。移植后的肝脏及胆道具有正常生物学功能是评价手术成功的关键。冷、热缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)是引发移植术后肝脏无功能的主要原因。而药物预处理可以降低肝脏、胆道移植的缺血再灌注损伤,从而有可能降低肝脏失功的发生。白藜芦醇(Resveratrol,RES)是一种能从葡萄、虎杖、花生、桑椹等多种植物中提取的具有很强生物活性的多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎症、抗血栓形成、抗衰老、免疫调节及抗肿瘤作用,能够预防心血管疾病、肿瘤的发生。目前白藜芦醇主要被用于研究对心、脑、肾等器官的保护作用,而对肝脏,尤其是肝及胆道缺血再灌注损伤保护方面研究较少。本实验拟通过模拟肝移植的热缺血、冷缺血到再灌注复温的全过程,探索建立一种稳定的、操作简单的小鼠肝脏及胆道的冷、热缺血再灌注损伤模型,然后利用该模型,探讨白藜芦醇预处理对肝脏及肝外胆道的缺血再灌注保护作用及其可能的机制,从而为白藜芦醇更安全、合理的应用于临床提供理论依据。方法本实验分为2个时间阶段,第一阶段为肝脏缺血再灌注模型建立与改进的探索阶段,第二阶段为模型成功后,研究白藜芦醇较长周期给药对接受上述缺血再灌注损伤的肝及胆道的保护作用。第一阶段:选取健康、成年、清洁30只KM小鼠,参考并改进赵宏峰[2]的大鼠自体原位肝移植模型,用4℃含12.5U/ml肝素的乳酸林格氏液分别经小鼠肠系膜上静脉、腹主动脉双重恒压恒温灌注,同时从胆囊置管冷冲洗胆道,并利用“支架法”吻合血管。观察记录手术时间、手术成功率及冷灌注效果;第二阶段:再次选取健康、成年、清洁KM鼠60只,随机分成三组,每组20只。A组为空白对照组,B组为缺血再灌注(IR)组,C组为白黎芦醇预处理+缺血再灌注(IR)组,C组小鼠于实验开始前完成白藜芦醇的预处理:给予RSV 20 mg/kg溶于100 g/L羟丙基-β-环糊精生理盐水中灌胃0.2ml,连续2周,每日1次,B组给予相同体积的0.9%生理盐水。A组仅行单纯的开关腹手术。灌胃2周后的B、C两组小鼠立即给予上述建立的肝脏及胆道冷热缺血再灌注损伤。术后2小时留取标本。比较各组小鼠的存活率、热缺血时间、无肝期时间,肝功能指标血清ALT水平,肝脏、肝外胆总管病理学形态改变和Western-blot检测Gadd45a的表达。结果(1)缺血再灌注模型探索阶段,实际共行手术50例,其中20例为预实验,主要掌握麻醉剂量、手术技巧及其改进方法。定型术30例,死亡10例,手术成功率66.7%(20/30),热、冷缺血和再灌注时间可精确控制,无肝期控制在20分钟以内。双重灌注加胆道冲洗效果好,病理切片示胆道壁毛细血管未见红细胞。该模型达到模拟肝冷热缺血再灌注损伤要求,具有操作简单、稳定性强、手术时间相对较短、专一性强的特点。(2)白藜芦醇较长周期给药实验阶段,1)A组无伤亡,术中B、C组各死亡5例,B组与C组存活率无统计学差异(P0.05)。2)血清ALT水平:A组术后血清ALT水平处于正常范围内;对比A组,B、C两组各时间点的血清ALT水平都显著升高,但C组低于B组,存在统计学意义(P0.05),提示C组较B组肝功能损害轻。3.肝组织及肝外胆总管HE染色病理观察:A组(对照组):肝细胞的形态大小基本正常,肝窦清晰可见,胆总管管壁完整,上皮细胞无脱落坏死。B组:肝细胞明显水肿,胞浆淡染,有空泡变性,肝血窦变窄几乎消失。胆总管上皮脱落坏死,上皮结构模明显不完整。C组较B组,肝细胞轻度水肿,胞浆深染,无空泡变性,肝血窦变窄,但尚可见,胆总管上皮结构尚完整连续,其病理损伤明显减小。4.Western-blot检测结果:空白对照组Gadd45a的表达为弱阳性;B组缺血再灌注组灰度值比值为0.24士0.07;C组白藜芦醇预处理组Gadd45a灰度值比值为0.79士0.09;结果显示C组较A、B组肝脏Gadd45a表达均明显偏高,均具有统计学意义(P0.01)。提示白藜芦醇可提高缺血再灌注肝脏Gadd45a的早期表达。结论1、白藜芦醇可以降低受冷热缺血再灌注损伤的小鼠肝血清转氨酶的水平,减轻肝及肝外胆管缺血再灌注损伤,对肝脏及肝外胆道具有明显保护作用。2、白藜芦醇可促进缺血再灌注的肝组织Gadd45a的早期表达。
【关键词】：白藜芦醇 动物模型 缺血再灌注损伤 Gadd45a
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 主要英文缩略词表13-14
• 第1章 前言14-16
• 第2章 材料和方法16-24
• 第3章 结果24-28
• 第4章 讨论28-34
• 结论34-36
• 参考文献36-40
• 附图40-44
• 综述44-52
• 参考文献48-52
• 攻读学位期间主要研究成果52-54
• 致谢54

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王宇歆;马涛;李凤娟;杨成民;;缺血再灌注损伤机制及其对策的初步探讨[J];中国输血杂志;2010年S1期

2 陶平;雌激素防治缺血再灌注损伤的研究现状(文献综述)[J];国外医学.外科学分册;2003年05期

3 胡佳乐;血管性缺血再灌注损伤的基础与临床[J];海军医学杂志;2003年03期

4 怡悦;续命汤预防脑缺血再灌注损伤[J];国外医学(中医中药分册);2005年05期

5 谢明剑,薛伟新,岑家福;脑缺血再灌注损伤的中医药研究概况[J];华夏医学;2005年05期

6 鲁力;张俐;;骨骼肌缺血再灌注损伤机制研究进展[J];中国中医骨伤科杂志;2005年06期

7 文静;钟森;董继萍;陈丽娜;;脑缺血再灌注损伤中医药防治研究进展[J];中国中医急症;2007年06期

8 王燕荣;爱民;谢军;周建秀;李兰诚;丹丹;;蒙药防治缺血再灌注损伤的研究进展[J];中国民族医药杂志;2007年08期

9 张帮健;刘进;;抗坏血酸在缺血再灌注损伤中的保护机制[J];实用医院临床杂志;2009年05期

10 徐辰;李润平;;氢在治疗缺血再灌注损伤的研究进展[J];基础医学与临床;2010年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 王宇歆;马涛;李凤娟;杨成民;;缺血再灌注损伤机制及其对策的初步探讨[A];中国输血协会第五届输血大会论文专集（摘要篇）[C];2010年

2 吴艳;李春英;贾旭峰;何颖;;椒苯酮胺对脑缺血再灌注损伤的保护作用[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年

3 莫书荣;李德剑;;诺迪康对离体豚鼠心脏缺血再灌注损伤的保护作用[A];中国生理学会第五届全国心血管、呼吸和肾脏生理学学术会议论文摘要汇编[C];2005年

4 朱贤富;;脑缺血再灌注损伤机制的研究现状[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

5 于吉人;严盛;刘小孙;郑树森;;尿胰蛋白酶抑制剂减轻移植肠的缺血再灌注损伤[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年

6 黄贤华;黄常亮;宋微微;方伟;杨芳炬;;迎春花对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用[A];第十届全国中药药理学术会议论文集[C];2007年

7 刘德强;赵德化;盛宝恒;;呋喃二氢吡啶Ⅰ对离体兔心缺血再灌注损伤的保护作用[A];第二届全国心功能学术研讨会论文摘要汇编[C];1990年

8 刘建修;;缺血再灌注损伤发生机制及防治最新进展[A];江西省第四次中西医结合心血管学术交流会论文集[C];2008年

9 黄唯佳;陈寿权;李惠萍;程俊彦;赵初环;李章平;王明山;王万铁;王卫;;家兔脑缺血再灌注损伤时血栓素B_2/6-酮-前列腺素F_(1α)的变化及醒脑静的保护作用[A];2005急诊医学学术研讨会暨《中华急诊医学杂志》第四届组稿会论文汇编[C];2005年

10 高立建;谢荣爱;田建会;;四氢生物喋呤在新西兰兔缺血再灌注损伤中的保护作用[A];中国心脏大会（CHC）2011暨北京国际心血管病论坛论文集[C];2011年

中国重要报纸全文数据库 前7条

1 衣晓峰　岳金凤 记者　 李丽云;我科学家揭示脑缺血再灌注损伤奥秘[N];科技日报;2007年

2 衣晓峰　靳万庆;静脉麻醉药保护脑缺血再灌注损伤机制被揭示[N];中国中医药报;2007年

3 ;抗呆I号可恢复脑缺血再灌注损伤细胞功能[N];中国中医药报;2004年

4 张中桥;黄芪对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用[N];中国医药报;2006年

5 张中桥;黄芪对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用[N];中国中医药报;2006年

6 张茨;扭转的睾丸切还是保——医生有新说[N];健康报;2005年

7 燕海霞 王忆勤 李福凤;川芎嗪在肾脏病中应用前景看好[N];中国医药报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 黄薇园;功能MRI动态监测大鼠急性缺血性脑卒中缺血再灌注损伤及其与预后相关的实验研究[D];复旦大学;2014年

2 王震;不同药物干预心、肾缺血再灌注损伤的作用与机制研究[D];第三军医大学;2015年

3 张小英;兔睾丸缺血再灌注损伤及其保护措施的机理研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

4 尚宪荣;益气活血化瘀法治疗下肢缺血再灌注损伤的临床研究[D];北京中医药大学;2014年

5 阮永乐;一氧化碳对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其新机制研究[D];华中科技大学;2013年

6 林生;右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制[D];山东大学;2013年

7 陈娜;脑缺血再灌注损伤神经保护策略研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年

8 王乾伟;不同血流动力学状态对肝脏热缺血再灌注损伤的影响及干预研究[D];复旦大学;2012年

9 杨金凤;奥曲肽对兔肝缺血再灌注损伤的影响及机理研究[D];中南大学;2007年

10 杨帆;固有免疫分子NLRP3在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制[D];山东大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李盼;肢体缺血后适应对缺血再灌注损伤小鼠脑保护作用及机制研究[D];河北大学;2015年

2 蒲举;远隔缺血后适应对脑缺血再灌注损伤及相关VEGF、MMP-9表达的影响[D];遵义医学院;2015年

3 王富明;针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠外周血清SOD、MDA、miRNA-126及VEGF表达的影响[D];北京协和医学院;2015年

4 赵层闪;化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤大鼠模型VEGF表达及微血管密度的影响[D];河北医科大学;2015年

5 曲欣;解偶联蛋白2通过线粒体介导参与高血糖加重脑缺血再灌注损伤的实验研究[D];宁夏医科大学;2015年

6 程浩;1β-羟基土木香内酯对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究[D];安徽中医药大学;2015年

7 吴建龙;p38MAPK信号通路参与雌二醇减轻皮瓣缺血再灌注损伤机制的初步研究[D];苏州大学;2015年

8 李婷婷;安菲博肽对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[D];安徽医科大学;2015年

9 吴加元;Omi切割Hax-1加剧脑缺血再灌注损伤的机制研究[D];苏州大学;2015年

10 朱田丰;PDCD4在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研究[D];山东大学;2015年

  本文关键词：白藜芦醇对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：300863