氯化镧干预磨损颗粒诱导骨溶解的体内实验研究
本文关键词:氯化镧干预磨损颗粒诱导骨溶解的体内实验研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:观察腹腔注射不同浓度氯化镧对人工关节磨损颗粒刺激的小鼠颅盖骨骨溶解及小鼠血清学相关指标的影响,为氯化镧在防治假体周围骨溶解等领域的进一步应用提供实验基础和理论依据。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、单纯磨损颗粒组、磨损颗粒+低浓度氯化镧组(1 mg kg-1 d-1)和磨损颗粒+高浓度氯化镧组(5 mg kg-1 d-1)四组,通过注射方法将真空球磨法制备的磨损颗粒置入相应组的颅盖骨上,处理后的第14天小鼠眼球取血后处死小鼠,剥离颅盖骨。运用Elisa方法检测小鼠血清TNF-α、IL-1β、CTX-I指标的含量,Micro-CT扫描小鼠颅盖骨后三维重建显像并测算感兴趣区域内的骨矿物质含量(BMC)、骨矿物质密度(BMD)和骨体积分数(BVF)。脱钙后组织切片行HE染色法检测颅盖骨骨溶解、骨组织面积及炎性细胞浸润情况,TRAP染色检测成熟破骨细胞。结果:实验处理期间,两组不同浓度氯化镧处理组小鼠存活均未受到影响。在使用腹腔注射氯化镧干预磨损颗粒诱导的小鼠颅盖骨骨溶解的实验中发现,与单纯磨损颗粒组相比,低浓度氯化镧药物组对炎症细胞因子的生成、破骨细胞的形成和骨组织面积等方面的作用无明显统计学意义。而在高浓度氯化镧药物组中,炎症细胞因子浓度、成熟破骨细胞数量均有所减少,剩余骨组织面积有所增加;在使用Micro-CT对小鼠颅骨标本进行扫描并数据分析后发现,一定区域内小鼠颅盖骨的骨矿物质含量(BMC)、骨矿物质密度(BMD)和骨体积分数(BVF)指标与组织学切片观察数据趋势基本一致。结论:本实验中不同浓度氯化镧均未对C57BL/6J小鼠产生毒性作用;注射磨损颗粒至小鼠颅盖骨表面可产生骨溶解现象;一定浓度的氯化镧可以抑制磨损颗粒诱导的炎症反应及骨溶解现象,以上为氯化镧今后应用于人工关节置换术后磨损颗粒导致的假体周围骨溶解的治疗中提供新方向。
【关键词】:氯化镧 磨损颗粒 骨溶解 破骨细胞 颅骨骨溶解模型
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R965
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 中英文缩略词表7-8
- 第1章 前言8-10
- 第2章 材料与方法10-18
- 2.1 材料10-11
- 2.1.1 实验动物10
- 2.1.2 主要仪器与设备10-11
- 2.1.3 主要试剂11
- 2.2 方法11-18
- 2.2.1 磨损颗粒及氯化镧母液的制备11-12
- 2.2.2 实验动物分组及实验模型的建立12-13
- 2.2.3 小鼠眼球取血、血清制备及大体标本制作13-14
- 2.2.4 Elisa法检测血清中TNF-α、IL-1β、CTX-I指标的含量14
- 2.2.5 Micro-CT扫描14-15
- 2.2.6 小鼠颅盖骨组织标本处理及染色分析15-17
- 2.2.7 统计学分析17-18
- 第3章 结果18-26
- 3.1 实验动物18
- 3.2 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对磨损颗粒诱导的骨溶解的影响18-23
- 3.2.1 实验小鼠颅骨Micro-CT大体图像18-19
- 3.2.2 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对实验区域内 BMC、BMD、BVF 指标的影响19-20
- 3.2.3 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对组织HE染色的影响20-21
- 3.2.4 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对实验区域骨面积的影响21
- 3.2.5 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色的影响21-22
- 3.2.6 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对实验区域阳性破骨细胞计数的影响22-23
- 3.3 氯化镧在颅骨骨溶解模型中对小鼠血清TNF-α、IL-1β、CTX-I指标表达的影响23-26
- 3.3.1 氯化镧对小鼠血清TNF-α 指标表达的影响23-24
- 3.3.2 氯化镧对小鼠血清IL-1β指标表达的影响24
- 3.3.3 氯化镧对小鼠血清CTX-I指标表达的影响24-26
- 第4章 讨论26-31
- 4.1 磨损微粒与人工关节无菌性松动26-27
- 4.2 磨损微粒诱导骨溶解的动物模型27
- 4.3 TNF-α、IL-1β 与人工关节无菌性松动27-28
- 4.4 破骨细胞等与人工关节无菌性松动的关系28-29
- 4.5 镧与磨损颗粒诱导的骨溶解29-30
- 4.6 展望与小结30-31
- 第5章 结论31-32
- 致谢32-33
- 参考文献33-37
- 攻读学位期间的研究成果37-38
- 综述38-49
- 参考文献46-49
【参考文献】
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