β-环糊精衍生物包合齐墩果酸的生物利用度研究

发布时间：2017-05-15 22:02

  本文关键词：β-环糊精衍生物包合齐墩果酸的生物利用度研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：齐墩果酸具有多种药理活性，但由于其溶解度极低，生物利用度很差，限制了其应用。环糊精是一类具有中空圆筒状结构的化合物，在制剂中应用非常广泛，主要用于改善难溶性药物的溶解度，提高药物的生物利用度等。环糊精种类较多，其中以β-环糊精的应用较多。近年来，开发出了多种β-环糊精的衍生物，在药物制剂中具有非常良好的应用前景。齐墩果酸与羟丙基β-环糊精的包合物具有较好的增溶作用，但是，对齐墩果酸与β-环糊精衍生物的热力学稳定性及齐墩果酸/羟丙基β-环糊精的生物利用度研究尚未见报道。 目的：β-环糊精的衍生物具有良好的对难溶性药物的增溶作用，能够有效的改善难溶性药物的吸收，提高生物利用度。本研究建立了不同齐墩果酸的β-环糊精的衍生物包合物的高效液相色谱的测定方法，通过相溶解度法对齐墩果酸的β-环糊精的衍生物包合过程的热力学稳定性进行研究，并对齐墩果酸的羟丙基β-环糊精包合物的大鼠体内药代动力学行为及生物利用度进行研究，为齐墩果酸的制剂研究奠定基础。 方法：（1）建立不同齐墩果酸的β-环糊精的衍生物包合物的高效液相色谱测定方法并进行方法学验证。色谱条件采用Agilent ZORBAX SB-C18colum（n150mm×4.6mm,5μm）色谱柱，流动相为甲醇-乙腈-水=36：59：5（V/V），检测波长为：210nm，流速为1mL·min~(-1)，柱温为30℃，进样量为20μL。（2）配制浓度为0，10，20，40，80和160mmol·L~(-1)的甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精及磺丁基醚-β-环糊精的系列水溶液。分别取上述各溶液适量，分别加入过量的齐墩果酸固体粉末，密塞，置于恒温振荡器中分别在25，35和45℃下振荡包合3d，取样用0.45μm微孔滤膜过滤，，按上述色谱条件进样测定，计算齐墩果酸含量。以β-环糊精衍生物浓度为横坐标，以齐墩果酸浓度为纵坐标绘制相溶解度图，计算不同齐墩果酸的β-环糊精的衍生物包合过程的超分子包合常数及热力学参数，进行热力学稳定性研究。并对齐墩果酸和羟丙基-β-环糊精的包合条件进行筛选。（3）建立大鼠血浆中齐墩果酸的LC-MS测定方法，并进行了方法学考察。以Agilent Zorbax Eclipse Plus C18（150mm×2.1mm,5μm）为色谱柱，流动相采用甲醇~(-1)0mmol·L~(-1)-醋酸铵水溶液=90:10（v/v），流速为0.4mL·min~(-1)，柱温为35℃，进样量为5μL，内标为甘草次酸；质谱条件为检测方式：MRM，离子极性：正离子，检测离子：齐墩果酸：m/z455.7，裂解电压：180V，甘草次酸：m/z469.7，裂解电压：200V。（4）大鼠随机分为静脉组和口服组，口服组采用齐墩果酸/羟丙基-β-环糊精包合物进行灌胃，静脉组采用齐墩果酸/羟丙基-β-环糊精包合物进行尾静脉注射。口服组分别于给药前及给药后10、20、30、45、60、120、240及360min眼球取血1mL，静脉组分别于给药前及给药后2、5、10、20、30、60、120、240及360min眼球取血，分离血浆，以建立的LC-MS法进行测定。将试验所测得的数据采用药动学统计软件DAS2.0进行处理，求算齐墩果酸在大鼠体内的药动学参数，并计算其绝对生物利用度。 结果：（1）干扰性试验结果显示齐墩果酸与其他成分的分离效果良好，阴性对照未对齐墩果酸的测定产生干扰，线性范围为0.0625～2mg·mL~(-1)，精密度结果RSD值为0.59%，表明仪器精密度良好，稳定性结果显示在24h内样品溶液稳定。齐墩果酸/甲基-β-环糊精、齐墩果酸/羟丙基-β-环糊精及齐墩果酸/磺丁基醚-β-环糊精包合物的回收率分别为0.66%、1.0%和1.0%。（2）随着温度的升高，齐墩果酸/甲基-β-环糊精的相溶解度曲线斜率增加，而齐墩果酸/羟丙基-β-环糊精及齐墩果酸/磺丁基醚-β-环糊精的相溶解度曲线斜率减小；在25、35及45℃时齐墩果酸/甲基-β-环糊精的超分子包合常数分别为6.916、10.39和27.80L·mol~(-1)，热力学参数ΔH~0为54.59kJ·mol~(-1)，ΔS~0为198.4J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0为-4.555、-6.538和-8.522kJ·mol~(-1)，齐墩果酸/羟丙基-β-环糊精的超分子包合常数分别为10.58、8.733和6.160L·mol~(-1)，热力学参数ΔH~0为-21.24kJ·mol~(-1)，ΔS~0为-51.41J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0为-5.917、-5.403和-4.889kJ·mol~(-1)，齐墩果酸/磺丁基醚-β-环糊精的超分子包合常数分别为5.530、3.353和2.805，热力学参数ΔH~0为-26.89kJ·mol~(-1)，ΔS~0为-76.36J·mol~(-1)·K~(-1)，ΔG~0为-4.119、-3.356和-2.592kJ·mol~(-1)。（3）建立了大鼠血浆中齐墩果酸的LC-MS测定方法，方法学验证结果表明本方法提取回收率良好82%，最低定量限为0.05μg·mL~(-1)，准确度和日内、日间精密度均良好RSD15%，灵敏度好，特异性高，无基质效应，满足齐墩果酸口服后的药代动力学研究。（4）大鼠口服齐墩果酸/羟丙基β-环糊精包合物的平均滞留时间为84min，达峰时间出现在45min，其绝对生物利用度为2.010%。 结论：（1）所建立的不同齐墩果酸的β-环糊精衍生物包合物中齐墩果酸的高效液相色谱测定方法经方法学验证能够满足测定要求。（2）本研究首次从能量的角度对甲基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精及磺丁基醚β-环糊精对齐墩果酸分子进行包合过程的驱动力的阐述。三种β-环糊精衍生物对齐墩果酸的包合过程均为自发过程，甲基-β-环糊精对齐墩果酸的包合过程为吸热、无序化增加、熵驱动过程，羟丙基β-环糊精及磺丁基醚β-环糊精对齐墩果酸的包合过程为放热、无序化降低、焓驱动过程。（3）建立的大鼠血浆中齐墩果酸的LC-MS测定方法符合对生物样品的测定要求。（4）齐墩果酸的羟丙基β-环糊精包合物的生物利用度研究结果显示以羟丙基β-环糊精为辅料对齐墩果酸进行包合可以有效的改善其口服生物利用度。
【关键词】：齐墩果酸 环糊精 热力学稳定性 相溶解度 生物利用度
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R96
【目录】：

• 缩略语表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-14
• 文献回顾14-35
• 第一部分 不同齐墩果酸的β-环糊精衍生物包合物中齐墩果酸的 HPLC 测定方法的确立和验证35-44
• 1 材料35-36
• 2 方法36-37
• 3 结果37-42
• 4.讨论42-44
• 第二部分 不同齐墩果酸的β-环糊精衍生物包合物超分子包合常数的测定及热力学稳定性研究44-55
• 1 材料44-45
• 2 方法45-47
• 3 结果47-53
• 4 讨论53-55
• 第三部分 血浆中的齐墩果酸的测定方法的建立及确证55-65
• 1 材料55-56
• 2 方法56-57
• 3 结果57-63
• 4 讨论63-65
• 第四部分 齐墩果酸的羟丙基-β-环糊精包合物生物利用度的研究65-70
• 1 材料65-66
• 2 方法66-67
• 3 结果67-69
• 4 讨论69-70
• 小结70-71
• 参考文献71-79
• 个人简历和研究成果79-81
• 致谢81

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 林伟兰;江溱;;HPLC法测定肝喜乐片中齐墩果酸的含量及含量均匀度[J];中国民族民间医药;2012年16期

2 姬琦;马秋霞;;中药对四氯化碳致急性肝损伤保护作用的研究进展[J];海军医学杂志;2012年05期

3 杨蕊;苏乐群;黄欣;;齐墩果酸自微乳的制备及质量评价[J];食品与药品;2008年01期

4 郭功玲,李吉华,臧炳亮,戚焕贞,郝建华;纳米粒给药系统研究进展[J];山东医药;2003年02期

5 张钰,程度胜;β-环糊精及其衍生物在生物制药领域中的应用[J];生物技术通讯;2003年05期

6 汤新慧;严丽芳;徐力致;高静;;齐墩果酸乌苏酸积雪草酸护肝及抗氧化作用的比较研究[J];时珍国医国药;2010年11期

  本文关键词：β-环糊精衍生物包合齐墩果酸的生物利用度研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：368980