灯盏乙素苷元4′-氨甲基苯甲酸酯-7-烟酸酯衍生物的设计、合成及体外活性研究

发布时间：2017-06-05 00:05

  本文关键词：灯盏乙素苷元4′-氨甲基苯甲酸酯-7-烟酸酯衍生物的设计、合成及体外活性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:设计、合成灯盏乙素苷元4′-氨甲基苯甲酸酯-7-烟酸酯类衍生物,改善灯盏乙素苷元的理化性质,提高其抗氧化活性及血脑屏障通透性。方法:(1)灯盏乙素经过硫酸水解、纯化制备灯盏乙素苷元,后者经缩酮化保护后与N,N-双取代氨甲基苯甲酸缩合、并经脱缩酮保护基得到灯盏乙素苷元4′-N-氨甲基苯甲酸酯类衍生物,所得产物与取代烟酸缩合制备灯盏乙素苷元4′-N-氨甲基苯甲酸酯与烟酸/6-取代烟酸酯化获得目标化合物。(2)用HPLC对合成的化合物进行PBS缓冲液(p H=2.0,7.4)及溶解度的测定。(3)采用PC12细胞氧化损伤模型,评价化合物对氧化损伤细胞的保护作用,通过细胞形态学,LDH释放率、细胞内MDA和SOD含量评价目标化合物抗氧化作用。(4)采用Caco-2细胞转运模型,测定目标化合物从AP侧→BL侧和BL侧→AP侧转运量,计算化合物的表观渗透系数(Papp(AP-BL)、Papp(BL-AP))和外排率ER(ER=Papp(BL-AP)/Papp(AP-BL))。(5)采用原代细胞(BMEC-AS-BMPC)三元共培养模型考察了目标化合物体外血脑屏障通透性。结果:(1)合成灯盏乙素苷元4′-氨甲基苯甲酸酯-7-烟酸酯类衍生物14个(6a-6f,7a-7c,6m,6n,6w,6y,6x),经1H-NMR、UV、ESI-MS和ESI-HRMS等手段对获得化合物进行结构确证,证实所得化合物与目标产物结构一致。(2)理化性质研究中发现合成的灯盏乙素苷元取代烟酸酯类部分衍生物水溶性提高,最大值达到779.1μg·m L-1(灯盏乙素苷元为65.93μg·m L-1)。(3)抗氧化活性研究显示,与SC相比,化合物6b、6c、6d、6e、6f、6m、6n及6w能够减少PC12细胞形态学损伤、显著提高氧化损伤的PC12细胞存活率和降低LDH释放率(64.31-89.01);化合物6b、6c、6d、6e、6f、6m、6n及6w能够显著降低细胞内MDA的含量、升高细胞内SOD含量(P0.05)。(4)在Caco-2细胞转运研究中,化合物6b、6c、6d、6n及6w的转运量(1.47-3.11×10-6cm·s-1)显著高于SC(0.53×10-6 cm·s-1)和SC-GA(0.83×10-6 cm·s-1),其中以6c(3.11×10-6 cm·s-1)的转运量最高。(5)体外BBB模型对化合物通透性研究显示,化合物6b、6c、6d及6n从AP侧到BL侧通透量(0.59-1.65×10-6cm·s-1)显著高于SC(0.17×10-6 cm·s-1)和SC-GA(0.18×10-6 cm·s-1)。提示灯盏乙素苷元4′-N-氨甲基苯甲酸酯衍生物结构中引入烟酸片段,能通过增加化合物的水溶性、稳定性,使化合物抗氧化活性增强,细胞通透性增加,具有进一步研究开发的价值。结论:合成了未见文献报道的14个结构确证的灯盏乙素苷元4′-氨甲基苯甲酸酯-7-烟酸酯类衍生物,理化性质以及发现目标化合物的水溶性和体外稳定性得到有效的改善;活性研究发现,烟酸片段的引入提高了化合物对PC12细胞氧化损伤的保护活性,增加了Caco-2细胞转运能力和体外BBB的通透能力,综合以上结果表明,化合物(6b、6c、6d、6n)具有较阳性对照灯盏乙素及其苷元更优的理化与生物学活性,值得进一步深入研究。
【关键词】：灯盏乙素苷元 氨甲基苯甲酸酯 烟酸酯 体外活性
【学位授予单位】：贵阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R91;R914.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 英文缩略词表10-12
• 引言12-15
• 第一部分 目标化合物的设计与合成15-33
• 1.1 目标化合物的设计思路15-19
• 1.1.1 N, N-双取代氨甲基苯甲酸前药特点15
• 1.1.2 单羧酸转运体（monocarboxylate transporters，MCTs）介导的烟酸衍生物转15-17
• 1.1.3 本论文研究目的17-18
• 1.1.4 目标化合物的总体路线设计18-19
• 1.2 目标化合物的合成19-33
• 1.2.1 材料与仪器19
• 1.2.2 合成与结果19-31
• 1.2.3 实验小结31-33
• 第二部分 目标化合物的理化性质研究33-43
• 2.1 实验方法与结果33-42
• 2.1.1 性状的观察及熔点的测定33-34
• 2.1.2 分析方法的建立34-40
• 2.1.3 溶解度的测定40
• 2.1.4 缓冲液中稳定性研究40-42
• 2.2 实验小结42-43
• 第三部分 目标化合物的活性研究43-52
• 3.1 目标化合物PC12细胞抗氧化活性研究43-47
• 3.2 目标化合物Caco-2 细胞细胞转运研究47-49
• 3.4 体外血脑屏障通透性研究49-50
• 3.5 实验小结50-52
• 第四部分 总结与讨论52-53
• 参考文献53-58
• 附录A58-64
• 综述64-76
• 参考文献72-76
• 作者简历76-77
• 致谢77-78
• 学位论文数据集78

【参考文献】

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本文编号：422448