模拟失重对大鼠背根神经节形态和GDNF的影响

发布时间：2017-09-03 03:29

  本文关键词：模拟失重对大鼠背根神经节形态和GDNF的影响

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【摘要】：目的观察模拟失重环境下大鼠背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)髓鞘形态学改变；探讨尾部悬吊模拟失重对大鼠DRG内胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)的影响；比较模拟失重下雌雄性大鼠DRG髓鞘形态学及GDNF变化的性别差异。方法模拟失重对大鼠DRG髓鞘的影响及性别因素的差异：选取健康成年Sprague-Dawley大鼠160只,其中雄性80只,雌性80只,随机分为正常对照(NC)组(n=80,雄性40只,雌性40只)和尾部悬吊(HU)组(n=80,雄性40只,雌性40只)。HU组通过悬吊大鼠尾部,后肢不负重来模拟失重状态,NC组不做任何处理。4周后,通过手术摘取各组Sprague-Dawley雌雄大鼠右侧腰5背根神经节。HE染色观察各组大鼠DRG细胞的大体形态,免疫组化下观测各组大鼠DRG髓鞘的情况,电镜下观察各组大鼠DRG髓鞘的超微结构。对雌雄大鼠之间的变化进行对比。模拟失重对大鼠DRG内GDNF的影响及性别因素的差异：选取健康成年Sprague-Dawley大鼠200只,其中雄性100只,雌性100只,随机分为尾部悬吊(HU)组(n=100,雄性50只,雌性50只)和正常对照(NC)组(n=100,雄性50只,雌性50只)。按上述方法对各组大鼠进行模型建立,4周后摘取各组Sprague-Dawley大鼠右侧腰5背根神经节。甲苯氨兰染色观察各组DRG内尼氏小体变化,电镜下观察各组大鼠DRG细胞内线粒体的微观结构,免疫组化观察GDNF含量的变化,Western-blot方法检测GDNF的蛋白表达,RT-PCR检测G DNF mRNA表达情况。对比雌雄大鼠之间的变化差异。结果1.HE染色结果显示,与NC组相比,HU组背根经节细胞间隙轻度增宽,部分节细胞与卫星细胞分离。髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)免疫组化结果显示,NC组DRG髓鞘MBP免疫组化染色及IOD值较HU组增加(雄性组P0.01,雌性组P0.001),退变的髓鞘碱性蛋白(degenerated myelin basic protein, Degen MBP)免疫组化显示,NC组DRG髓鞘Degen MBP免疫组化染色及IOD值较HU组降低(雄性组P0.001,雌性组P0.001)。电镜下可见HU组髓鞘板层结构变得紊乱、松散。2.甲苯氨兰染色结果显示,与NC组相比,HU组DRG内尼氏体染色浅,尼氏体变小,弥散分布。电镜下可见HU组DRG内线粒体肿大、变形。免疫组化结果显示,与NC组比较,HU组GDNF量及I OD值减少(雄性组P0.001,雌性组P0.001)。Western-blot结果显示,HU组较NC组GDNF蛋白表达减少(雄性组P0.001,雌性组P0.001)。RT-PCR结果显示,与NC组相比,HU组GDNFmRNA表达降低(雄性组P0.001,雌性组P0.01)。3.性别之间具有差异(P0.05)。结论1.模拟失重可引起大鼠DRG损伤,髓鞘发生退变性变化。2.模拟失重状态下可引起大鼠DRG内尼氏小体形态发生变化,GDNF含量减少,GDNF蛋白表达及mRNA表达降低,DRG内线粒体发生损伤。3.性别不同,模拟失重引起的DRG损伤程度不同。
【关键词】：模拟失重 背根神经节 动物模型 髓鞘 GDNF
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R856
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-13
• 参考文献11-13
• 第一部分：模拟失重对大鼠背根神经节髓鞘形态的影响及性别因素的差异13-27
• 引言13
• 材料与方法13-16
• 结果16-21
• 讨论21-23
• 结论23-24
• 参考文献24-27
• 第二部分：模拟失重对大鼠背根神经节内GDNF的影响及性别因素的差异27-37
• 引言27
• 材料与方法27-29
• 结果29-34
• 讨论34
• 结论34-36
• 参考文献36-37
• 文献综述37-49
• 参考文献43-49
• 攻读学位期间发表文章情况49-51
• 致谢51

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王春雨;吴继华;宋淑军;张军;景青萍;张建中;周金莲;;尾悬吊模拟失重大鼠卵巢组织中缺氧诱导因子-1α表达变化[J];解放军医学杂志;2012年09期

2 印宗毅;陈东英;;模拟微重力对生物体机能影响的研究新进展[J];航空航天医学杂志;2013年01期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 王春雨;尾悬吊模拟失重对大鼠卵巢功能及其组织中HIF-1α表达的影响[D];安徽医科大学;2012年

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本文编号：782614