模拟失重条件下硫氧还蛋白1对神经母细胞瘤细胞的微丝骨架保护作用研究

发布时间：2017-09-20 02:21

  本文关键词：模拟失重条件下硫氧还蛋白1对神经母细胞瘤细胞的微丝骨架保护作用研究

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【摘要】：目的研究回转模拟失重条件下硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y微丝骨架的保护效应及其分子机制。方法转染Trx1入SH-SY5Y细胞,采用回转方法模拟失重,采用免疫荧光化学方法分析细胞微丝骨架的形态和结构变化,采用DCF-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;利用AMS修饰结合聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微丝骨架蛋白半胱氨酸残基的氧化还原状态;使用超速离心法分离细胞内球状肌动蛋白(global actin,G-actin)单体和纤丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)聚合体,Western blot方法鉴定F-actin及G-actin的水平。结果回转模拟失重引起SH-SY5Y细胞微丝骨架排列紊乱,呈弥散不规则分布,Trx1可以保护模拟失重环境导致的微丝骨架的紊乱;回转引起细胞内ROS升高达到对照组2.8倍,而过表达Trx1的细胞回转后ROS的产生仅为对照组的1.7倍;回转模拟失重导致细胞微丝骨架半胱氨酸残基被氧化,而Trx1可以部分阻止半胱氨酸残基氧化;回转模拟失重后SH-SY5Y细胞F-actin发生解聚,G-actin增加,Trx1能够部分对抗F-actin的解聚,维持F-actin/G-actin比率。结论 Trx1可能通过降低细胞内ROS水平,抑制微丝骨架蛋白半胱氨酸残基的氧化,对模拟失重状态下肌动蛋白的解聚与聚合起到重要的调控作用。
【作者单位】： 中国航天员科研训练中心 航天医学基础与应用国家重点实验室;
【关键词】： 模拟失重 Trx 微丝骨架 氧化应激 氧化还原调节
【基金】：留学回国启动基金项目
【分类号】：R852.22
【正文快照】： 太空飞行或地面模拟失重均引起机体氧化程度增加,导致氧化应激(oxidative stress,OS),严重影响航天员健康和安全高效工作。硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)是一种广泛分布的重要的氧化还原酶,能还原蛋白质半胱氨酸残基,使得巯基和二硫化物之间相互转换[1-2],参与调控增殖、抗

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本文编号：885335