葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量及药效作用的影响

发布时间：2020-03-17 13:17

【摘要】：目的:通过HPLC检测葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量的影响;通过致热法、致急性炎症法、致痛法、致咳法复制感冒相关动物模型,观察葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤解热作用、抗炎作用、镇痛作用、止咳作用、免疫功能的影响。探讨葛根在升麻葛根汤中最佳煎煮时间,为葛根特殊煎煮方法的临床应用提供实验依据。方法:采用HPLC检测葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量的影响,色谱条件:Agilent 5 TC-C_(18)液相色谱柱(250×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(25:75),柱温30℃,流速1 mL/min,检测波长250 nm,进样量10μL。采用15%酵母混悬液致热法、蛋清致急性炎症法、热板致痛法、25%氨水致咳法复制感冒相关动物模型,观察感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、脾脏系数、胸腺系数和免疫因子(IL-6)含量。结果:HPLC检测,葛根素在0.02~0.12mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r~2=0.9996);1号汤剂供试品溶液中葛根素含量是30.0 mg/g;2号汤剂供试品溶液中葛根素含量是34.8 mg/g;3号汤剂供试品溶液中葛根素含量是38.4 mg/g;4号汤剂供试品溶液中葛根素含量是43.6mg/g;5号汤剂供试品溶液中葛根素含量是42.4mg/g;6号汤剂供试品溶液中葛根素含量是41.2mg/g;7号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是39.6mg/g;8号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是36.4 mg/g;9号汤剂的供试品溶液中葛根素的含量是36.0mg/g。体温检测,与空白组比较,模型组注射15%酵母混悬液后1h、2.5h、3-8h时,体温明显升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,阳性对照组1、阳性对照组2在给药后1h、2.5h、3-8h时,体温明显降低(P0.01);葛根煎煮30min、35min、40min组在给药后2.5h、3-8h时,体温明显降低(P0.05或P0.01);葛根煎煮25min组在给药后4-7h时,体温明显降低(P0.05)。足趾肿胀率检测,与空白组比较,模型组在注射蛋清液后0.5h、1-4h时,足趾肿胀率明显升高(P0.01);与模型组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min、55min、60min组在给药后0.5h、1-3h时,足趾肿胀率明显降低(P0.05或P0.01或P0.01);葛根煎煮20min、25min组在给药后0.5h、1-2h时,足趾肿胀率明显降低(P0.05)。痛阈值检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min组痛阈值明显升高(P0.05)。咳嗽潜伏期、咳嗽次数检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min组咳嗽潜伏期明显升高(P0.05或P0.01);阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮35min、40min组咳嗽次数明显降低(P0.05)。脾脏、胸腺指数检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min、55min组脾脏系数明显升高(P0.05或P0.01);阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮30min、35min、40min、45min、50min组胸腺系数明显升高(P0.05或P0.01)。酶联免疫法(ELISA)检测,与空白组比较,阳性对照组1、阳性对照组2、葛根煎煮25min、30min、35min、40min、45min组IL-6含量明显升高(P0.05或P0.01或P0.001)。结论:煎煮过程中,当葛根煎煮35min时升麻葛根汤中葛根素含量相对最高,对感冒相关模型动物体温、足趾肿胀率、痛阈值、咳嗽潜伏期、咳嗽次数、免疫功能均能产生明显改善作用。葛根在升麻葛根汤中使用“先煎”的特殊煎煮方法,可能起到提高临床疗效的作用。
【图文】：

线性关系图

葛根不同煎煮时间对升麻葛根汤免疫功能的影响方法：在“2.2.2.5”项下实验结束 2h 后，将各组小鼠取血后处死，分及胸腺，酶联免疫法（ELISA）检测血清中免疫因子（IL-6）含量、胸腺系数。方法 SPSS 19.0 软件进行统计学处理。结果以均数±标准差（ x±s ）表较采用单因素方差分析。以 P＜0.05 为差异有统计学意义。果不同煎煮时间对升麻葛根汤中葛根素含量的影响结果定色谱条件实验结果定的色谱条件下，葛根素色谱峰与相邻色谱峰的分离度、理论塔板要求，分离度大于 1.5，理论塔板数大于 3000。见图 2-3。
【学位授予单位】：长春中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5;R284

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本文编号：2587534