基于mTOR信号转导通路的补阳还五汤拮抗肺纤维化机制研究

发布时间：2020-03-20 20:17

【摘要】：目的:基于促纤维化生成的重要通路蛋白mTOR探讨补阳还五汤拮抗博来霉素致大鼠肺纤维化的作用机制。方法:1.采用体重200±20g的SD雄性大鼠144只随机分为空白对照组、模型组、强的松组、补阳还五汤高、中、低剂量组,每组24只。除空白组外其余各组均采用一次性气管注射博来霉素法诱导肺纤维化模型。造模后24h给予相应药物,各组分别于第7、28天随机抽取8只大鼠进行股动脉放血处死,收集支气管肺泡灌洗液(Broncho alveolar fluid,BALF)和肺组织,采用HE、Masson染色法观察肺组织肺泡炎、纤维化程度,免疫组化染色法(链霉素亲和素一过氧化物酶,SABC法)检测肺组织切片mTOR蛋白的分布及表达。结果:1.一般情况:空白组大鼠外形肥硕,反应灵敏,毛发柔顺有光泽,食欲食量正常。模型组大鼠表现出精神不振,目光呆滞,反应敏捷度下降,呼吸急促,部分小鼠倦卧少动甚至不动,毛发粗糙枯萎,食量减少较明显,形体消瘦。其余各给药组大鼠精神较好,反应灵敏,呼吸节奏、频率正常,毛发光泽润滑。其活动能力、进食量下降等程度随着时间均有一定的改善。2.病理形态学:(1)HE染色:空白对照组大鼠肺组织正常未见有明显的病变形态,;与空白对照组比较,模型组大鼠的肺泡结构有破坏,发现大量炎性细胞及增殖的胶原纤维;同模型组对照,在不同时间点各给药组的肺泡炎症及肺纤维化程度都出现一定程度的改善。(2)Masson染色空白组组大鼠在支气管壁发现的胶原层较稀薄,肺泡区仅发现较少蓝色胶原纤维。模型组大鼠第7d肺泡出现明显增厚,在支气管壁、肺泡间隔均都发现有蓝色的胶原纤维;第28d在细支气管、纤维化实变区发现大量蓝色胶原纤维,出现弥漫性的肺纤维化。强的松组同补阳还五汤各剂量组都使肺纤维化程度得到改善。3.mTOR的含量:空白组内各时间点之间比较无明显差异(P0.05),说明空白组大鼠肺组织内有一定量的mTOR蛋白的表达。各时间点模型组肺组织中mTOR的表达较空白组明显增多(P0.05),说明博来霉素气管滴注诱导的肺损伤具有引起mTOR在肺组织内过度表达的作用;与模型组相比,各时间点强的松组和补阳还五汤各剂量组大鼠肺组织中mTOR的表达明显下调(P0.05);说明补阳还五汤与强的松均有抑制mTOR蛋白表达的作用;与强的松组比较,补阳还五汤高剂量组有明显差异(P0.05),说明补阳还五汤高剂量组在抑制mTOR表达方面优于强的松组;补阳还五汤高剂量组分别与低中剂量组相比有明显差异(P0.05)。实验结论:肺纤维化病程中成纤维细胞的增生伴随着mTOR信号通路的过度活化。补阳还五汤可以有效的抑制mTOR的过度活化,从而起到干预肺纤维化的作用。
【图文】：

HE染色,低剂量,阳性对照,空白

28d各组大鼠肺组织病理学改变（HE染色，100）

低剂量,阳性对照,空白

7d各组大鼠肺组织病理学改变（Masson染色，100）
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】