葛根素对AD及2型糖尿病模型大鼠脑内Tau蛋白磷酸化水平的影响及部分机制的研究

发布时间：2020-03-24 11:12

【摘要】：目的:随着人口老龄化问题日益严重,阿尔兹海默病(AD)和2型糖尿病(T2DM)发病率急剧增加,为现代社会与家庭带来极大困扰。AD与T2DM的防治目前已成为现代社会关注的焦点。AD的发病率随年龄增加而明显增高,研究发现T2DM是AD的独立重要危险因素之一。过度磷酸化tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结是AD病人脑内特征性的病理改变之一。现代医学研究发现,葛根素对T2DM大鼠的胰岛β细胞具有保护作用,对大鼠海马神经元损伤也具有明显的保护作用,可以改善AD小鼠的认知功能障碍等作用。本研究旨在观察葛根素对AD及T2DM模型动物脑内tau蛋白磷酸化水平的影响,探讨其可能的作用机制,为临床应用葛根素防治AD及T2DM性认知功能障碍提供理论基础及实验依据。方法:1.通过连续腹腔注射D-半乳糖(160mg/kg/d)的方法复制AD模型大鼠,将SD雄性大鼠随机分为3组:正常对照组(简称对照组)、AD模型组(简称模型组)、葛根素(80mg/kg/d)治疗组(简称Pue组),采用免疫印迹法检测大鼠嗅球组织内tau-1、PS396、和tau-5的表达水平及GSK-3β的磷酸化水平。为进一步明确不同剂量的葛根素对AD模型大鼠的影响是否存在差异,随后将SD大鼠分为AD模型组、葛根素低剂量(40mg/kg/d)治疗组,葛根素中剂量(80mg/kg/d)治疗组及葛根素高剂量(160mg/kg/d)治疗组,治疗4周后取材,采用免疫印迹法检测大鼠嗅球组织内tau-1、PS396的表达水平。2.选用SD雄性大鼠,随机分为造模组和正常对照组(简称正常组),造模组连续高脂高糖饲料喂养4周后通过一次性腹腔注射30mg/kg的链脲佐菌素(STZ)溶液制作T2DM大鼠模型。造模成功后将T2DM大鼠随机分为T2DM模型组(简称模型组),葛根素(80mg/kg/d)治疗组(简称Pue组),罗格列酮治疗组(简称RSG组)。治疗期间监测各组大鼠的体重、血糖、摄食量、饮水量。治疗4周后取材,采用HE染色法观察大鼠胰岛的组织结构,采用免疫印迹法对大鼠海马组织内tau-1、PS396、tau-5、OGA和OGT的表达水平进行检测,采用免疫组化检测大鼠海马内tau-1及PS396在CA1区、CA3区及齿状回(DG)区的表达。结果:1.葛根素可明显缓解AD模型大鼠嗅球内tau蛋白磷酸化水平的增高。2.不同剂量葛根素均可有效降低AD模型大鼠嗅球内tau蛋白磷酸化水平的增高(P0.01),但其作用并未呈现量效反应。3.与正常对照组相比,AD模型大鼠嗅球内GSK-3β活性水平明显增高(P0.01),葛根素可有效缓解AD模型大鼠嗅球内GSK-3β活性水平增高(P0.05)。4.葛根素对T2DM模型大鼠体重的影响,与正常组比较,模型组的大鼠体重表现为负增长(P0.01);葛根素治疗可有效增加T2DM大鼠的体重(P0.01)。5.葛根素可有效降低T2DM模型大鼠的空腹血糖(P0.05)。6.葛根素可有效改善T2DM模型大鼠摄食量、饮水量的增加(P0.01)。7.与正常组相比,模型组大鼠的胰岛组织结构破坏明显,其形态不规则、胰岛面积及数量明显减少,胰岛内细胞胞浆减少,部分细胞内呈现空泡变性的现象;Pue给药治疗可明显改善模型大鼠胰岛组织结构的破坏。8.与正常组相比,模型组大鼠海马内Tau-5表达升高(P0.01);Tau-1表达降低(P0.05);葛根素治疗未能有效改善T2DM模型大鼠海马内总tau蛋白及tau蛋白磷酸化水平的增加。9.与正常组相比,模型组大鼠海马内OGT水平降低(P0.05),OGA变化无明显差异;葛根素治疗未能有效改善T2DM模型大鼠海马内糖基化水平的降低。结论:1.葛根素可有效减缓AD模型大鼠嗅球内tau蛋白磷酸化水平的增加,其作用机制可能与其降低GSK-3β活性水平有关。2.葛根素可以降低T2DM模型大鼠空腹血糖,增加大鼠体重,降低大鼠摄食量、饮水量。3.葛根素治疗对T2DM模型大鼠海马内tau蛋白的磷酸化水平及糖基化水平无明显影响。
【图文】：

⑵与模型组相比，，Pue组大鼠嗅球内Tau-1表达增强（P<0.05）。⑶与对照组大鼠相比，模型组及Pue组大鼠嗅球内Tau-5表达及PS396位点磷酸化水平均无明显影响（P>0.05）。具体见图1.实验结果表明：D-半乳糖连续皮下注射6周可明显降低Tau-1在大鼠嗅球内的表达（表明tauSer199/202位点磷酸化水平明显增加），而经过葛根素（80mg/kg/d）连续治疗4周后，Tau-1在嗅球内的表达显著增强。同时，结果也显示，D-半乳糖和葛根素对嗅球内总Tau蛋白（Tau-5）的表达及Ser396位点磷酸化水平均无明显影响。

⑵与对照组相比，模型组大鼠嗅球内pS9-GSK-3β表达降低（P<0.01）；与模型组比较，Pue组大鼠嗅球内pS9-GSK-3β表达升高（P<0.05）。具体见图2.实验结果表明：D-半乳糖可显著降低 pS9-GSK-3β在嗅球内的表达，
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R-332

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 武清斌;刘明明;修瑞娟;;阿尔茨海默病与2型糖尿病关系的研究进展[J];中国老年学杂志;2017年03期

2 陶乐维;陆灏;;浅析《备急千金要方》对消渴病论述的继承与创新[J];中华中医药杂志;2016年12期

3 刘云;吴晓球;;老年痴呆症危险因素的研究进展[J];医学综述;2016年12期

4 矫增金;陈民;;论老年性痴呆中医病因病机[J];辽宁中医药大学学报;2016年06期

5 马玲;;从Tau蛋白过度磷酸化探讨2型糖尿病所致神经纤维化的机制[J];中国现代医学杂志;2016年02期

6 章雷;顾健;李佳川;谭睿;;葛根黄连有效组分配伍对STZ复合高脂大鼠2型糖尿病模型的防治作用[J];西南民族大学学报(自然科学版);2016年01期

7 梁静涛;金硕果;吴丽娟;杨东东;;糖尿病认知功能障碍中医病因病机分析[J];实用临床医药杂志;2015年24期

8 李林;;中国阿尔茨海默病研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2015年05期

9 洪小平;陈涛;周珍;邱斌;向雄;余晨;朱潇旭;韩永明;;葛根素对老年大鼠学习记忆功能及海马内Tau蛋白磷酸化水平的影响[J];中国老年学杂志;2015年14期

10 高霞;管庆波;;2型糖尿病对认知功能的影响[J];药品评价;2015年13期

相关硕士学位论文 前1条

1 王露;肥胖与非肥胖2型糖尿病患者外周血C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的比较研究[D];中国医科大学;2006年

本文编号：2598240