枸杞ACE化学合成多肽对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究

发布时间：2020-03-26 21:26

【摘要】：目的:以枸杞血管紧张素转换酶(ACE)化学合成多肽为受试物,对自发性高血压大鼠(SHR)进行灌胃实验,探讨枸杞ACE化学合成多肽对SHR的降压效果,观察枸杞ACE化学合成多肽对肾素血管紧张素系统(RAS)的影响及其可能的降压机制,为防治高血压病提供理论依据。方法:选用SPF级SHR大鼠30只,分成5个实验组:模型对照组、阳性对照组(10 mg/kg卡托普利)、枸杞ACE化学合成多肽低剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(10 mg/kg)、高剂量组(20 mg/kg);另以Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只为正常对照组。正常对照组和模型对照组给予相应剂量的生理盐水。适应性喂养一周后开始一次性给药及连续灌胃8 w长期给药,实验期间大鼠自由饮食饮水,每周定时在灌胃后2 h测量大鼠收缩压(SBP)和舒张压(DBP),实验结束后腹腔动脉采血并采集心脏和肾脏、下丘脑、垂体组织。采用酶联免疫吸附法测定血浆和肾脏组织中血管紧张素1-7(Ang-(1-7))、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、ACE、血管紧张素转换酶2(ACE2)水平。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法测量心脏、肾脏、下丘脑、垂体组织中ACE、ACE2、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1-R)和Mas受体(Mas-R)mRNA表达水平。采用蛋白印迹法(western-blot)检测心脏和肾脏组织中ACE、ACE2、AT1-R和Mas-R蛋白表达水平。结果:1.大鼠体重和血压值:与WKY组相比,SHR大鼠的体重均显著降低(p0.05);与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽干预中、高剂量组SHR体重增量显著降低(p0.05)。与WKY组相比,SHR大鼠的SBP与DBP均显著升高(p0.05);与模型对照组相比较,第6、8w阳性对照组、低、中、高剂量组SHR大鼠DBP明显降低(p0.05);实验期间随着灌胃时间的延长SBP有降低趋势。2.大鼠血浆和肾脏组织RAS系统相关酶含量的变化:与WKY组相比,SHR大鼠血浆和肾脏组织中血浆AngII和ACE浓度均显著升高,Ang-(1-7)浓度均显著降低(p0.05);与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽干预组可以显著降低血浆和肾脏中的ACE浓度(p0.05),升高ACE2浓度。3.大鼠心脏和肾脏RAS系统相关因子表达的变化:与WKY大鼠比较,SHR大鼠心脏和肾脏组织中ACE与AT1-R mRNA表达水平均显著上调(p0.05),ACE2与Mas-R mRNA表达水平均显著下调(p0.05);而与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽干预组SHR肾脏组织中ACE mRNA表达水平显著下调(p0.05),心脏和肾脏组织中AT1-R mRNA表达水平显著下调(p0.05)。ACE2 mRNA在心脏和肾脏组织中表达水平均显著上调(p0.05),Mas-R mRNA表达有不同程度的升高(p0.05)。相关蛋白的表达具有一致性,与WKY大鼠相比,SHR大鼠心脏和肾脏组织中ACE与AT1-R蛋白表达水平均显著增高(p0.05),ACE2蛋白表达水平显著降低(p0.05);而与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽干预组SHR大鼠心脏和肾脏组织中ACE与AT1-R蛋白表达水平均显著降低(p0.05),中、高剂量组ACE2蛋白表达水平均显著增高(p0.05),Mas-R蛋白表达水平差异不具有统计学意义(p0.05)。4.大鼠下丘脑和垂体RAS系统相关因子表达的变化:与WKY大鼠相比,模型对照组SHR大鼠下丘脑和垂体组织中ACE与AT1-R mRNA表达水平均显著上调(p0.05),ACE2与Mas-R mRNA表达水平均显著下调(p0.05);而与模型对照组相比,枸杞ACE化学合成多肽干预组SHR大鼠下丘脑组织中ACE与AT1-R mRNA表达水平均显著下调(p0.05)。中剂量组ACE2 mRNA在下丘脑和垂体组织中表达水平均显著上调(p0.05),Mas-R mRNA有不同程度上调趋势(p0.05)。结论:枸杞ACE化学合成多肽可以有效降低SHR大鼠的血压,其可能通过ACE-AngII-AT1-R和ACE2-Ang-(1-7)-Mas-R通路的平衡发挥降压作用。
【图文】：

图 1 枸杞 ACE 化学合成多肽一次给药对大鼠尾动脉收缩压的影响杞 ACE 化学合成多肽长期给药对 SHR 和 WKY 大鼠血压的影响枸杞 ACE 化学合成多肽长期给药对 SHR 和 WKY 大鼠尾动脉收缩压的影响经重复测量方差分析表明：因素“时间”F＝3.28，，P＝0.014<0.05，说明 0 w、6 w、8 w 时的大鼠 SBP 差异有统计学意义；因素“分组”F＝60.09，P＝0.000<不同组间大鼠 SBP 差异有统计学意义；时间与分组两因素有交互作用（F＝1033<0.05）；与 WKY 组相比，SHR 阳性对照组、模型对照组、低、中、高剂 SBP 均显著升高（p<0.05）；与模型对照组相比，阳性对照组大鼠 SBP 显著0.05），低、中、高剂量组相比于模型对照组有降低趋势，差异不具有统计学意分析结果显示，阳性对照组和低剂量组的 SBP 具有较平稳的下降趋势。0 w、6 w、8 w 时各组之间进行单因素方差分析结果表明：在第 0 周至第 8 周，S照组、模型对照组、低、中、高剂量组大鼠 SBP 均高于 WKY 组（p<0.05）；

表 2 枸杞 ACE 化学合成多肽长期给药对大鼠尾动脉收缩压的影响（ ± ，mmHg）组别时间（周）Total (m0 w 2 w 4 w 6 w 8 w常对照组 137.17±5.79 145.67±4.63 134.50±12.00 131.72±12.22 129.84±9.39 135.78±性对照组 177.55±6.31* 174.83±8.04* 166.11±14.31*#176.05±7.93* 163.28±8.37*#171.57±2型对照组 173.83±10.55* 181.00±2.72* 181.83±3.10* 179.08±1.93* 180.83±4.66* 179.32±剂量组 177.56±8.81* 171.67±6.42*#173.22±6.90* 173.78±8.03* 171.33±5.41* 173.51±剂量组 180.17±9.10* 177.75±5.16* 174.72±11.47* 175.22±5.18* 172.11±7.61* 176.00±剂量组 178.78±8.60* 174.67±9.27* 180.00±9.47* 180.06±4.81* 175.50±6.58* 177.80±*P<0.05 vs 正常对照组；#P<0.05 vs 模型对照组。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2601984