肾复康Ⅵ方对肾小球硬化大鼠的治疗作用及调节纤维化机制的研究

发布时间：2020-03-27 14:39

【摘要】：目的:通过观察肾复康Ⅵ方干预局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病综合征大鼠的24小时尿蛋白定量、血生化、肾组织病理学的改变及肾组织中转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(Matrix metallo Proteinase-2 MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2,TIMP-2)、胶原-Ⅳ(collagen-IV,COL-Ⅳ)的表达,探讨肾复康Ⅵ方对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用及可能的调节肾脏纤维化机制。资料与方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾复康Ⅵ方组、泼尼松组、联合组,每组12只。采取大鼠尾静脉隔周注射阿霉素的方法,共注射2次,建立局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠模型。建模6周后肾复康Ⅵ方组每日予肾复康Ⅵ方煎剂灌胃,泼尼松组每日予泼尼松溶液灌胃,联合组每日予肾复康Ⅵ方煎剂联合泼尼松溶液灌胃,持续灌胃治疗4周。观察各组大鼠一般状态,于治疗第0周—第4周每周末测24h尿蛋白定量、尿量、体重,治疗第4周末测血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、血脂、肾功,光镜下观察大鼠肾组织病理变化。应用免疫组化方法测定大鼠肾组织内TGF-β_1,MMP-2,TIMP-2,COL-Ⅳ的表达。采用SPSS 20.0软件进行组间单因素方差分析,数据用(?)±s表示,组间比较采用LSD-t检验。结果:1.成功建立局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠模型,其大量蛋白尿(130.17±25.02)mg·kg~(-1)·d、低白蛋白血症(17.89±2.92 g/L)、高脂血症(总胆固醇7.70±2.97mmol/L、甘油三酯7.81±3.52mmol/L)、水肿症状、光镜下病理改变及免疫组化表达符合局灶节段性硬化型肾病综合征表现。2.一般状态治疗组比模型组大鼠一般状态明显改善。3.24h尿蛋白定量给药期第1周末始,给药组比模型组24h尿蛋白定量明显减少,(P0.01);肾复康Ⅵ方联合泼尼松治疗局灶节段性肾小球硬化型阿霉素大鼠肾病效果较单一服用肾复康Ⅵ方煎剂或泼尼松更突出。4.血清总蛋白、白蛋白、球蛋白治疗组比模型组大鼠明显增多。其中,白蛋白较模型组比较,肾复康Ⅵ方组(21.15±2.59g/L)、泼尼松组(20.68±2.60g/L)、联合组(23.38±5.07g/L)升高明显,差异具有显著统计学意义。5.肾脏病理改变治疗组系膜细胞轻度增生,肾间质炎性细胞浸润减少,部分间质纤维化,偶见硬化灶,病变明显轻于模型组。6.免疫组化治疗组中TGF-β_1,TIMP-2,COL-Ⅳ的表达较模型组减少,MMP-2的表达显著增多。TGF-β_1,COL-Ⅳ的表达联合组较肾复康Ⅵ方组及泼尼松组减少,TIMP-2的表达肾复康Ⅵ方组与联合组较泼尼松组少,MMP-2的表达在治疗组间无明显差异(P0.05)。结论:本实验研究发现,肾复康Ⅵ号方对局灶节段性硬化型阿霉素肾病大鼠的治疗作用:1改善大鼠的一般状态;2减少24小时蛋白尿、提高血浆总蛋白、白蛋白、球蛋白;3减轻肾脏病理损伤;4肾复康Ⅵ方联合泼尼松治疗阿霉素大鼠肾病效果较单一服用肾复康Ⅵ方煎剂或泼尼松更突出。肾复康Ⅵ方的治疗机制可能是通过减少炎性致纤维化因子TGF-β_1的表达,调节MMP-2、TIMP-2参与的基质降解酶系统,抑制COL-Ⅳ构成的细胞外基质的过度积聚,减少尿蛋白的排出,纠正低蛋白血症,减轻肾脏病理损害而实现的。
【图文】：

免疫组化,泼尼松,情况,图像

K L M N OP Q R S T图2 各组SD大鼠肾脏组织免疫组化情况(×400倍)注：A～E 依次为正常组、模型组、肾复康Ⅵ方组、泼尼松组、联合组 TGF-β1 的免疫组化表达图像；F～J 依次为正常组、模型组、肾复康Ⅵ方组、泼尼松组、联合组 TIM-2 的免疫组化表达图像；K～O 依次为正常组、模型组、肾复康Ⅵ方组、泼尼松组、联合组 MMP-2 的免疫组化表达图像；P～T 依次为正常组、模型组、肾复康Ⅵ方组、泼尼松组、联合组 COL-Ⅳ的免疫组化表达图像。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

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