姜黄素对神经胶质瘤生长与迁移的影响及机制研究

发布时间：2020-03-27 13:47

【摘要】：目的:探讨天然中药小分子化合物姜黄素(Curcumin)对神经胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并进一步探讨其调节机制。方法:体外培养试验中,以人胶质母细胞瘤U251细胞株为研究对象,观察不同浓度姜黄素处理对U251细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。采用MTT法检测不同浓度姜黄素在24 h、48 h和72 h对U251细胞增殖的作用;通过划痕实验检测不同浓度下姜黄素对神经胶质瘤U251细胞迁移能力的影响;Transwell方法检测姜黄素对U251细胞侵袭能力的调节;Annexin V-FITC染色法检测不同浓度姜黄素对U251细胞凋亡的作用;以Western blotting检测姜黄素刺激后对增殖相关蛋白Akt/PTEN表达的影响;检测姜黄素刺激后对凋亡相关蛋白NF-κB、p53和Caspase-3表达影响;检测姜黄素刺激后对侵袭相关蛋白CD133和Drp1表达影响。在体内实验中,构建裸鼠皮下成瘤模型,检测姜黄素对皮下移植瘤生长的影响;瘤体组织采用HE染色并进行病理学特征分析。结果:与对照组相比,姜黄素浓度达到10μM以上时,对U251细胞增殖具有抑制作用;并能显著性抑制U251的迁移与侵袭能力和显著性促进U251细胞凋亡;与对照组相比,姜黄素抑制p-Akt、NF-κB、CD133和p-Drp1蛋白表达、促进PTEN、p53和Caspase-3蛋白表达;与对照组相比,姜黄素对裸鼠移植瘤生长有显著性抑制作用;与对照组相比,姜黄素组移植瘤坏死明显。结论:姜黄素抑制神经胶质瘤的增殖作用与下调p-Akt蛋白、上调PTEN蛋白表达有关。神经胶质瘤的迁移、侵袭能力降低与姜黄素下调黏附分子CD133和p-Drp1蛋白表达有关;而促进胶质瘤凋亡与姜黄素上调p53、caspase-3蛋白和下调NF-κB表达有关。
【图文】：

1 姜黄素抑制 U251 细胞增殖肿瘤细胞增殖是影响肿瘤生长的条件之一。我们检测姜黄素对U251细胞增殖的抑制影响。如图1A所示，在姜黄素刺激24 h的条件下，对照组细胞生长状态良好，细胞未发现皱缩；当姜黄素浓度达到10 μM时，视野下细胞数目明显少于对照组，较少细胞出现皱缩；当姜黄素浓度达到20 μM时，细胞间隙增加，部分细胞出现皱缩；当姜黄素浓度达到40 μM时，大量细胞皱缩，并与周围的细胞脱离；前期药理实验显示

姜黄素对 U251 细胞增殖能力影响的显微图（100X）；B 姜黄素处理对胶质瘤细胞增殖能力影响的数据统计图，与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，n=3。2 姜黄素抑制 U251 细胞迁移肿瘤细胞迁移是肿瘤侵袭性的重要表现之一。在不同浓度的姜黄素刺激后，，U251 细胞迁移能力进行比较，迁移结果如图 2A 所示。与对照组相比，姜黄素组 U251 细胞迁移能力呈下降趋势。在 10 μM 姜黄素刺激下，细胞迁移能力显著性降低至 76.5%；在 20 μM 姜黄素刺激下，细胞迁移能力显著性降至 37.6%，结果如图 2B。说明姜黄素能有效抑制神经胶质瘤的细胞迁移能力。
【学位授予单位】：湖北科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285

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本文编号：2603044