基于中空纤维液相微萃取技术的人参皂苷酶解转化规律的研究

发布时间：2020-03-30 00:59

【摘要】：在西洋参、三七等药材中,主要活性成分之一为人参皂苷,人参皂苷分子结构种类较多、物理性质差异较大、影响着多重代谢。并且其在药材中含量较低、理化性质及药效活性差异较大。因此建立一种简便、快捷、多组分同时提取人参皂苷的方法具有重要意义。在此基础上通过高效的方法制备稀有人参皂苷、实现人参皂苷成分之间的相互转化。本论文研究的主要内容和结果如下:(1)采用中空纤维混合溶剂棒同时萃取西洋参中的四种人参皂苷耦合HPLC-UV进行检测分析。在混合溶剂棒萃取的过程中,选择甲醇为解吸剂,主要考察混合溶剂棒的溶剂种类、溶剂棒比例对同时提取四种人参皂苷的影响。在此基础上对影响人参皂苷萃取的其他因素如中空纤维液相微萃取的时间、萃取的温度、中空纤维棒的数目、样品溶液的pH进行了考察。在最优的条件下,人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd分别在7.5-37.5μg/mL、30-150μg/mL、75-375μg/mL、39.15-195.75μg/mL(R~20.9990)范围内具有良好的线性关系,萃取的回收率介于93.91%-97.83%之间,且相对标准偏差(RSD)3.37%。这种同时提取西洋参四种人参皂苷的方法,具有较高的提取效率。(2)基于中空纤维液相微萃取研究混合酶水解西洋参转化人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rd,实验过程中考察影响酶解的因素如:酶解pH、酶解时间、酶解温度以及混合酶的比例,对人参皂苷Rd生成的影响。采用响应面法优化生成人参皂苷Rd酶解最佳条件:酶解时间为91.2 min、酶解温度为52.5℃、漆酶为0.27 mL、酸性纤维素酶为0.4 mL、0.12 M盐酸20μL。通过本实验方法,结合HPLC-UV分析得到了混合酶水解下,人参皂苷Rb1转化提取人参皂苷Rd含量为0.76%。(3)基于中空纤维液相微萃取研究混合酶水解转化三七中人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rd。采用漆酶、酸性纤维素组成的混合酶,实现人参皂苷定向转化,提高其提取效率和药用价值。采用响应面法优化混合酶转化水解三七人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rd的最佳条件如下:酸性纤维素酶为0.2 mL、漆酶为0.284 mL、酶解时间为73.90 min、酶解温度为55.8℃,得到三七中人参皂苷Rd的提取效率为1.13%。
【图文】：

萃取效率,皂苷,中空纤维,萃取时间

最大的提取效率和良好的实验重现性[132]。在动态萃取键的。实验考察中空纤维微萃取的时间分别为 30 mi90 min。如图 2.1 所示，萃取 30 min 到 45 min 的时in 的时候，中空纤维孔的有机溶剂减少，导致萃取的中空纤维液相微萃取的时间为 30-60 min，与本文吻合

萃取效率,皂苷,萃取温度,异戊醇

图 2.2 萃取温度对人参皂苷萃取效率的影响对人参皂苷的萃取效率影响维液相微萃取中，选择有机溶剂是至关重要的。有机溶易于固定在中空纤维孔中；（2）它可以使分析物与载体溶性和挥发性较低，防止溶剂在萃取过程中损失；（4）通过膜的分析物含量；（5）该溶剂的毒性应比较低[133]一有机溶剂对萃取效率的影响六点要求，本文研究选择正丁醇、异戊醇、正已醇、正，考察其对中空纤维微萃取效率的影响，观察不同的有取效率不同，选出对不同皂苷成分提取效率最佳的溶高皂苷总含量的提取效率。从图 2.3 中可以看出，正丁率最佳，异戊醇对人参皂苷 Rg1、Re 的萃取效率较好Rd 的萃取效率较，，选择正丁醇、异戊醇、正庚醇制成
【学位授予单位】：齐鲁工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.2;O658.2

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