桦木酸对环磷酰胺致小鼠肠黏膜损伤的保护作用及其机制的探讨

发布时间：2020-04-03 01:24

【摘要】：随着畜牧业的迅速发展,氧化应激随之成为规模化养殖中普遍存在的问题之一。氧化应激给动物机体及畜牧业带来的危害越来越不容小觑。这使多种抗氧化剂的开发和研究应运而生。桦木酸(betulinic acid,BA)是一种从白桦树上萃取出来的五环三萜类化合物,具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗癌、抗氧化应激、免疫调节、抗病毒以及抗炎等,而BA在肠道氧化应激方面鲜见报道。本研究通过动物体内实验,环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)诱导小鼠肠道黏膜损伤模型,探讨BA对小鼠肠道黏膜损伤的保护作用及其机制,为建立缓解肠道黏膜损伤的新方法提供理论依据和探索新的途径,为畜禽免疫增强剂,抗氧化剂,畜禽健康养殖等提供理论依据。目的:1)阐明BA对肠黏膜的保护作用与抗氧化应激的相关性;2)阐释BA对肠黏膜损伤中的作用及其调控机理,为BA的深入研究和科学应用提供理论依据。方法:将50只健康雄性KM小鼠随机分为5组,即空白对照组、Cy组、BA低、中、高剂量(0.05、0.5、5.0 mg/kg)+Cy组。对照组和Cy组灌服1%的可溶性淀粉,三个剂量组分别灌服混悬于1%可溶性淀粉中不同剂量的BA,1/d,连续14d。第15、16 d,对照组除外,其余4组均腹腔注射Cy(50 mg/kg bw)诱导肠黏膜损伤模型,对照组腹腔注射等积体生理盐水,1/d。16 h后,收集血清,处死小鼠,淋巴器官、肝脏和肠。检测回肠黏膜中免疫球蛋白SIgA和血清中23种细胞因子水平;组织切片观察肠绒毛变化;检测肝脏和小肠的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;实时荧光定量RT-PCR检测肠黏膜紧密连接相关蛋白封闭蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)和密封蛋白(Claudin-1)基因表达以及肠道中整合素(ανβ6)基因的表达量。结果:1)BA预处理后,缓解了Cy引起小鼠肠黏膜SIgA分泌下降;降低了肠黏膜GSH水平,以及肠道、血清和肝脏中MDA含量及SOD活力,保护了Cy对肠绒毛形态的损坏。2)BA降低了血清中AST、ALT和UREA活性,和IL-5、IL-12(p70)、IL-17、TNF-α、IL-10等细胞因子的分泌。3)BA能提高小鼠肠黏膜细胞紧密连接相关蛋白Occludin、ZO-1和Claudin基因表达以及小鼠肠中整合素(ανβ6)基因的表达量,保护肠黏膜屏障。结论:BA对Cy诱导肠黏膜损伤具有保护作用。这种保护作用与增强肠道抗氧化能力,提高肠黏膜免疫力,增强肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白的表达有关。
【图文】：

（9） 读板：在450 nm波长读取各孔的OD值。2.1.6 数据分析与处理采用 SPSS17.0 统计软件对实验数据进行分析与处理，确定P<0.05时差异具有统计学意义，比较组间均数，采用单因素方差分析，采用t检验两两比较，结果以x±s表示。2.2 结果与分析2.2.1 BA 对 Cy 致小鼠脏器指数、抗氧化和免疫球蛋白 SIgA 的影响2.2.1.1 BA 对 Cy 致小鼠器官指数的影响BA连续灌胃14 d，小鼠表现未见异常反应，也无死亡现象，表明BA对小鼠并无显著毒性。由图2-1、2-2可知，与正常对照组相比，Cy组小鼠脾脏指数、胸腺指数、肝脏指数极显著降低（P<0.01）。与Cy组相比，BA低中剂量组脾脏指数和胸腺指数有所增加，但差异不显著（P>0.05），，肝脏指数以BA中剂量组显著性升高（P<0.05）。A B

图2-2 BA对Cy致小鼠肝脏指数的影响( ± s，n =5)Effect of BA on the liver index induced by Cy in mice ( 鼠血清和肠道氧化还原系统和抗氧化酶的影响、2-5可知，与正常对照组相比，Cy组血清中MDASH水平变化无明显影响；小肠组织中MDA含量升变化，但GSH含量显著上升（P<0.05）。与Cy组比含量呈下降趋势，而SOD和GSH水平无明显变化（BBA对Cy致血清（A）和小肠（B）中MDA的影响 ( ± sxxx
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2612729