睡莲花Isostrictiniin提取纯化工艺及其保肝活性研究

发布时间：2020-04-07 17:36

【摘要】：目的:研究睡莲花isostrictiniin的提取纯化工艺及其肝保护作用。方法:采用单因素实验结合正交实验设计优化睡莲花isostrictiniin的提取工艺和大孔树脂吸附纯化工艺,通过四氯化碳(CC14)诱导的小鼠化学性肝损伤模型和刀豆蛋白A(ConA)诱导的免疫性肝损伤模型评价isostrictiniin的肝保护活性,并利用对还原能力实验、DPPH自由基清除实验及总抗氧化能力的测定考察其抗氧化活性。结果:通过水醇提取、大孔树脂吸附纯化以及聚酰胺和MCI色谱柱联用技术等方法制备出纯度大于98.0%的isostrictiniin对照品。睡莲花isostrictiniin的最佳提取工艺条件为:药材以50倍量50%乙醇提取2次,每次1.5h;提取物的出膏率为44.46%,isostrictiniin的得率为0.95%。通过静态吸附试验确定H1020大孔吸附数值为最佳树脂,其最佳工艺条件为上样浓度0.354 mg/ml,上样流速2.0mL/min,以50%乙醇解吸附,解吸流速2.OmL/min;isostrictiniin 转移率为 92.42%,纯度为 10.33%。Isostrictiniin 对 DPPH 有较强的清除作用,并且呈现出良好的量效关系,其与Vc的IC50值分别为8.95和6.33μg/mL,Isostrictiniin的总抗氧化能力与Vc的总抗氧化能力较当,其还原能力强于Vc。在四氯化碳致小鼠急性肝损伤实验中,与模型组比较,isostrictiniin中、高剂量组(50、100mg/kg)血清ALT、AST水平及肝脾脏指数降低(P0.05);肝组织匀浆中MDA和NO的含量降低,SOD和GSH的活性升高(P0.05)。isostrictiniin中、高(50、100mg/kg)剂量可以降低CC14对小鼠肝脏组织的病理损伤。刀豆蛋白A致小鼠免疫性性肝损伤实验结果显示,与模型组比较,isostrictiniin中、高剂量组(50、100mg/kg)血清ALT、AST水平和TNFα、IL-1β、IL-6水平,肝脾指数水平降低,差异有统计学意义(P0.05);肝组织匀浆中MDA、NO和TNF-γ、IL-10、IL-18的含量降低,SOD、GSH和IL-2、IL-4的活性升高(P0.05)。病理组织学检查结果可知isostrictiniin中、高(50、100mg/kg)剂量可以降低Con A对小鼠肝脏组织的病理损伤。结果说明睡莲花isostrictiniin具有较好的抗氧化活性,并且对四氯化碳致小鼠急性化学性肝损伤和刀豆蛋白A致免疫性肝损伤均具有明显的防治作用。结论:睡莲花isostrictiniin的制备工艺操作简单、易于生产,且该化合物具有较好的抗氧化和保肝活性。结果可为睡莲及该化合物的开发利用提供依据。
【图文】：

化学结构

、心悸不安、咽痛等疾病的治疗［３Ａ５＇６］，收载于《中华吾尔药分册》等医药文献中。作为一种传统药物，该炎消迪娜尔糖浆等抗炎抗病毒的维吾尔复方制剂中。取物具有较好的抗菌、抗炎、抗氧化、神经保护和保黄酮类化合物是该药材的主要特征性成分。前期研究在雪白睡莲花中含量较高的标识性成分之一，药理学研化、抗炎和抗病毒作用，是该药材发挥药效的主要活ｎ是常见多酚类化合物柯里拉京的异构体。柯里拉京存该药材发挥抗肝炎作用的主要药效物质［９’１（＂１１］。睡莲花肝炎的复方制剂中有着广泛的应用。前期对睡莲花的成分烟花苷进行了保肝作用的探讨，发现它们均有较ｎｉｉｎ，作为保肝有效部位的主要成分之一，，是否有保肝本课题在前期研究基础上，对ｉｓｏｓｔｒｉｃｔｉｎｉｉｎ的提取纯化护肝作用，以期为睡莲花的深入研宄及该成分的开发利０Ｈ逡逑

色谱图,对照品,色谱图,线性关系

（Ａ）逦（Ｂ）逡逑图２Ｉｓｏｓｔｒｉｃｔｉｎｉｉｎ对照品（Ａ）和供试品（Ｂ）邋ＨＰＬＣ色谱图逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２邋ＨＰＬＣ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋ｉｓｏｓｔｒｉｃｔｉｎｉｉｎ邋（Ａ）邋ａｎｄ邋ｓａｍｐｌｅ邋（Ｂ）逡逑２．２．４线性关系考察逡逑
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5;R284.2

【参考文献】