三醇组人参皂苷对肠道菌的调节及肠道的保护作用

发布时间：2020-04-08 16:36

【摘要】：肠道微生物与机体的消化吸收、免疫系统的发育和功能的发挥有着密切的关系,但其易受宿主基因及外界环境的影响,尤其是抗生素的使用严重威胁着肠道微生物的稳态平衡,长期滥用抗生素会使肠道微生物在数量和组成上发生变化,出现肠道菌失调现象,所以探讨如何消除抗生素造成的肠道微生物失调以及其它的副作用具有重要的作用。人参皂苷作为人参草本植物的主要活性成分,具有良好的药理作用,同时也可以调节肠道菌。原人参三醇型皂苷(PPT)作为人参皂苷的主要成分之一,具有很好的抗肿瘤、抗糖尿病的作用,因此,探讨其对肠道微生物的调节具有重要的意义。因此,本课题旨在研究PPT对抗生素造成的C57/BL6小鼠肠道健康破坏的调节作用。本实验通过给小鼠灌胃300 mg/kg的头孢菌素,建立肠道菌失调模型,然后给模型组小鼠25,50,100 mg/kg的PPT,连续灌胃4周之后,观察PPT对头孢菌素造成的小鼠肠道健康损坏的治疗作用。采用16S rRNA技术分析不同处理组的小鼠粪便中微生物的丰度以及组成结构,GC-MS技术分析不同处理组小鼠粪便中短链脂肪酸(SCFAs)的含量,RT-qPCR技术分析不同处理组小鼠结肠组织中紧密连接蛋白(ZO-1,occludin)和炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-1β和IFN-γ)基因水平的表达含量;Western blot(WB)技术用来分析不同处理组小鼠结肠组织中短链脂肪酸受体蛋白(GPR109A、GPR43和GPR41)和TLR4信号通路相关蛋白(TLR4、JNK和NF-κB)的表达。实验结果表明:抗生素的使用会造成肠道菌失调和结肠炎症,破坏肠道屏障的完整性,减少SCFAs的含量和短链脂肪酸受体蛋白的表达。PPT的使用会改善抗生素引起的肠道菌紊乱和结肠炎症以及肠道健康破化的状态,对肠道微生物具有保护作用,并且可以增强肠屏障的完整性以及减轻抗生素引起的结肠炎症,改善肠道健康。
【图文】：

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图 2.1 动物实验处理过程Figure 2.1 Animal experiment process在小鼠适应环境一周后，随机选取 15 只小鼠作为正常组（Normal group），其余45 只为模型组（Model group）。实验期间模型组小鼠每天灌胃服用 300 mg/kg 头孢菌素诱导肠道菌失调模型，灌胃 4 周；正常组的小鼠也采用灌胃的方法服用同样量的超纯水。建模 4 周后，随机选取正常组小鼠 5 只和模型组小鼠 5 只，各收集粪便 1.0 g，储存在-80℃进一步分析，然后，将小鼠禁食 12 个小时后通过断颈法处死，同时通过眼眶静脉取血收集血液样品以制备血清，收集结肠，，盲肠等组织，称重后储存在-80℃备用。（2）PPT 治疗实验把剩余 40 只模型组的小鼠随机分为 4 组（每组 N = 10）：第 1 组：对照组（Controlgroup），在治疗期间每天给小鼠服用相同量的溶剂（PEG 400：H2O = 1：3）；第 2 组（L-PPT group），第 3 组（M-PPT group）和第 4 组（H-PPT group）分别给予 25，50

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第二章 PPT 对小鼠机体的影响2.4 结果与讨论2.4.1 PPT 的成分组成由图 2.2 可以得出，通过 HPLC 分析 PPT 中存在的人参皂苷成分，结果显示在 45.23分钟的时候，检测出了人参皂苷 Rh1（S）；在 45.80 分钟的时候，检测出了人参皂苷Rh1（R）；在 54.50 分钟的时候，检测出了人参皂苷 Rk3；在 56.32 分钟的时候，检测出了人参皂苷 Rh4。检测结果表明，PPT 中含有人参皂苷 Rh1、Rk3 以及 Rh4。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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