补肾解毒方在辐射条件下对树突细胞的调控机制研究

发布时间：2020-04-09 19:16

【摘要】：目的研究低、中、高辐射剂量对小鼠骨髓树突细胞(DC)的损伤,通过给予补肾解毒方观察此方对DC的保护作用,并比较防治结合与预防给药两种给药方式抗不同剂量辐射DC损伤的效应。系统研究补肾解毒方对辐射后DC的防护作用和调控机制。方法将270只小鼠采用随机数表法随机分为3批,其中每批小鼠再随机分为5组(18只/组),分别为:空白对照组、辐射模型组、氨磷汀组、补肾解毒方防治结合组、补肾解毒方预防组。每天上午9:00给予补肾解毒方预防各组和补肾解毒方防治结合各组灌胃中药,给予空白对照组、辐射模型各组、氨磷汀各组等容积的生理盐水,灌胃容积为0.25 mI。实验开始后第11d,3批小鼠分别接受2Gy、4Gy、6Gy不同剂量的Coγ-射线全身辐照,并于辐射后第1d、7d、14d采用随机数表法每组抽取6只小鼠,取其股骨骨髓,流式细胞术检测小鼠骨髓树突细胞MHC-II分子的阳性细胞百分比,和DC表面4个主要共刺激分子CD80、CD83、CD86、CD284的阳性细胞百分比,并通过细胞免疫荧光观察DC成熟、活化情况。结果(1)流式细胞术检测DC阳性细胞表达率情况:(1)2Gy低剂量辐射:辐射后第7d,防治组MHC-II+分子细胞百分比和CD80、CD83、CD86、CD284阳性细胞百分比都增加,表现出了较强的防护效应,预防组次之。辐射后第14d,预防组阳性细胞表达率明显下降,而防治组仅表现出微弱下降。(2)4Gy、6 Gy剂量辐射:预防组阳性细胞表达率较高,保护作用优于防治组,同时预防组和防治组对树突细胞的保护效应弱于2Gy辐射条件下同组状况;而氨磷汀组在辐射后第1d表现出不同程度的防护作用。(2)细胞免疫荧光观察DC成熟、活化情况:不同的辐射剂量下,空白组骨髓细胞能较好的分化成成熟的DC细胞;而辐射抑制了骨髓细胞向DC分化、成熟的能力,随着辐射剂量的增加,可以观察到辐射组DC分化、成熟的能力逐步减弱;补肾解毒方防治组和预防组能够较好的逆转辐照引起的骨髓细胞向DC细胞分化、成熟的能力,氨磷汀组仅在辐射后第1d表现出了防护作用。结论补肾解毒方能促进DC成熟、活化,增强机体对辐射的防护作用:(1)在不同的辐射剂量下,防治组和预防组MHC-II分子表达率均有不同程度的增加,表明补肾解毒方能促进DC成熟。(2)DC表面4个主要共刺激分子CD80、CD83、CD86、CD284表达率增强,表明补肾解毒方能促进DC成熟、活化。(3)细胞免疫荧光观察DC成熟、活化情况,辐射后第1d,防治组和预防组未表现出防护效应,辐射后第7d、14d防治组和预防组均能够较好的逆转辐照引起的骨髓细胞向DC细胞分化、成熟的能力。(4)2Gy低剂量辐射条件下,防治组防护效应优于预防组;4Gy、6Gy中、高剂量辐射条件下,预防组防护效应优于防治组。
【图文】：

流式,骨髓细胞,骨髓,小鼠

细胞表达率高于余 4 组（P<0.01，P<0.05），空白组低于余 4 组（P<0.01，P<0.05）；辐射后第 14d，空白组低于余 4 组（P<0.01）。见图 1-1、1-2。图1-1 骨髓DC中MHC-II+分子表达注：五组小鼠分别接受相应处理后于辐射后第 1d，第 7d 以及第 14d，分离其骨髓细胞，进行流式染色分析其 DC 表面 MHC-II 分子的表达

氨磷汀,空白,无差异,组间

图 1-2 辐射后第 1d、7d、14d 各组 MHC-II+分子表达比较注：五组间差异统计学分析使用单因素方差分析进行，若有差异，在使用Beferoni校正α后，再使用Turkey法进行分析。（以P<0.05为差异具有统计学差异。* P<0.05; ** P<0.01; ***P<0.001）2、不同处理组 MHC-II+DC 中 CD83 表达辐射后第 1d，氨磷汀组 CD83 阳性细胞百分比高于空白组（P<0.01），同时空白组、辐射组、防治组和预防组 4 组间无差异；辐射后第 7d，防治组与预防组CD83 阳性细胞表达率高于空白组、辐射组、氨磷汀组（P<0.01，P<0.05），同时防治组和预防组间无差异；辐射后第 14d，氨磷汀组优于预防组（P<0.05），同时空白组 CD83 阳性细胞百分比低于余 4 组（P<0.01，P<0.05）。见图 1-3、1-4。
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】