固本防哮饮调控IL-33及其信号通路防治哮喘的机制研究

发布时间：2020-04-11 02:17

【摘要】：目的研究固本防哮饮对哮喘小鼠IL-33及其信号通路相关因子ST2 Caspase3 Caspase7 ERK1/2等表达的影响,探索固本防哮饮防治哮喘的相关机制。方法将24只雌性BALB/C小鼠分为正常组、模型组、中药组(固本防哮饮组)。以卵清蛋白(OVA)联合呼吸道合胞病毒(RSV)构建哮喘持续期小鼠模型。HE染色法观察各组小鼠肺组织病理变化;ELISA WB qPCR法分别测定小鼠肺泡灌洗液、血清、肺组织和支气管中IL-33及其通路中ST2 Caspase3 Caspase7 IL-5 ERK1/2相关蛋白及mRNA表达水平。结果(1)肺组织病理结果显示:与正常组相比,模型组小鼠气道有明显的杯状细胞增生,嗜酸粒细胞聚集,平滑肌增生等病理改变;而中药组较模型组小鼠有明显改善。(2)肺泡灌洗液及血清ELISA结果显示,与模型组相比,中药组小鼠肺泡灌洗液中IL-33蛋白的表达量明显降低;中药组小鼠肺泡灌洗液中sST2蛋白的表达量较模型组增加(P0.05);小鼠血清中IL-33 sST2蛋白的表达量三组间无统计学差异(P0.05)。(3)肺组织及支气管WB结果显示:中药干预后模型小鼠肺组织中IL-33 ERK1/2蛋白的表达量较模型组明显降低(P0.05);肺组织中ST2 Caspase3 Caspase7蛋白的表达量三组间无统计学差异(P0.05)。中药干预后模型小鼠支气管中IL-33 Caspase3 ERK1/2蛋白的表达量明显降低(P0.05);支气管中Caspase7蛋白的表达量三组间无统计学差异(P0.05)。(4)肺组织qPCR结果显示,中药组干预后小鼠肺组织中IL-33 ERK1/2 IL-5 mRNA表达量明显低于模型组(P0.05);与正常组相比较模型组ST2 mRNA未见明显升高(P0.05);与模型组相比中药组ST2 mRNA明显升高(P0.05);与正常组相比模型组Caspase7 mRNA较正常组明显升高(P0.05);但中药组与模型组比较无统计学意义(P0.05);Caspase3 mRNA比较无统计学意义。结论(1)固本防哮饮能减轻哮喘小鼠肺部炎症,改善杯状细胞增生、平滑肌增生肥大,抑制嗜酸粒细胞聚集。说明固本防哮饮能够改善哮喘小鼠气道炎症以及气道重塑。(2)固本防哮饮干预后IL-33表达显著降低,ERK1/2 IL-5表达降低,同时sST2蛋白表达上调(竞争性抑制IL-33的蛋白活性),提示固本防哮饮防治哮喘的作用机制可能与其抑制IL-33表达有关。(3)固本防哮饮改善哮喘小鼠气道重塑的作用,可能与其通过抑制IL-33/ERK1/2信号通路的激活,进而抑制细胞过度修复有关。
【图文】：

信号通路,来源,气道重塑,相似性

和４２ｋＤ，它们有９０％的相似性。ＥＲＫ１／２促进某些基因的转录与表达，和细胞的增殖与分化逡逑密切相关与。最近的研究发现ＩＬ－３３通过激活ＥＲＫ１／２信号通诱导加重了哮喘的气道重塑［４１］。逡逑ＩＬ－３３诱导的信号通路，如图２所示。逡逑１４逡逑

技术路线图,实验动物,中药,大学

图３技术路线图逡逑验材料逡逑实验动物及中药制备逡逑（１）实验动物：ＳＰＦ级ＢＡＬＢ／ｃ雌性小鼠，２４只，４－６周龄，体重１６－１８ｇ，由南大学动物实验中心提供。逡逑（２）中药制备：炙黄芪１５ｇ，党参１０ｇ，白术１０ｇ，茯苓１０ｇ，qF牡蛎１５ｇ，蝉蜕６６ｇ，辛夷６ｇ，防风３ｇ，五味子６ｇ，生甘草３ｇ，３付。购于江苏省中医院，经南大学中药资源产业化过程协同创新中心刘圣金副教授鉴定其均为正品。取１０倍药，浸泡２０分钟，，煅牡蛎先煎１５分钟后加入其它中药，煎煮３０ｍｉｎ后滤出药液后的中药加８倍水煎煮３０ｍｉｎ后过滤，合并两次药液浓缩至含生药量３．６ｇ＊ｍＬ，菌试管中，－８０°Ｃ储存。逡逑１７逡逑
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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