辐照红景天提取物抑制PC3和LNCaP细胞增殖的研究

发布时间：2020-04-13 20:10

【摘要】：吉林省是红景天的主要生产地之一,红景天是草本药用植物,已有大量实验证明,其具有抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等作用。近年来,因前列腺患者的显著性增多,前列腺癌早期症状不明显,大部分晚期才能得到确诊等原因,对前列腺癌的研究成为重点。前列腺癌的早期治疗主要通过手术治疗,到后期因前列腺癌对药物产生耐药性,雄激素依赖性转变为雄激素非依赖性,最后只能进行去势和化疗治疗。近年来,因天然药用植物资源丰富,本身对人体无毒、无副作用等特点,在肿瘤的研究中越来越受重视。统计结果显示,FDA批准的60%以上的抗癌药物来自于天然化合物,其中包括药用植物。因此本试验用人前列腺癌PC3和LNCaP细胞,研究了辐照红景天提取物对前列腺癌PC3和LNCaP细胞增殖和凋亡的作用机制。本试验中首先将红景天送到四川原子能研究院进行了辐照处理,用辐照剂量分别为5、10、20、30 kGy的60 Co-γ射线进行了辐照处理。之后用辐照红景天提取物在体外细胞试验中,采用CCK-8法检测辐照红景天提取物对前列腺癌PC3和LNCaP细胞活力的影响,用倒置显微镜观察20 kGy辐照红景天提取物作用后前列腺癌PC3和LNCaP细胞形态的变化,通过细胞划痕试验检测了前列腺癌PC3和LNCaP细胞的迁移能力。进一步通过流式细胞仪检测了20 kGy辐照红景天提取物对2种前列腺癌细胞周期分布和凋亡的影响,用Western blot检测20 kGy辐照红景天提取物作用后前列腺癌PC3和LNCaP细胞内有关抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2的表达情况。试验结果表明,经辐照后的红景天提取物与未辐照红景天提取物分别作用前列腺癌PC3和LNCaP细胞48 h后,均能抑制2种前列腺癌细胞的增殖,且辐照后的红景天提取物抑制效果强于未辐照组,其中20 kGy辐照红景天提取物的抑制率最高。通过CCK-8试验得出对于PC3细胞,20 kGy辐照剂量组的最适低、中、高浓度分别为300、600、900μg/mL,LNCaP细胞的最适低、中、高浓度分别为200、400、800μg/mL。细胞划痕试验结果得出,与对照组相比较,20 kGy辐照红景天提取物低、中、高浓度组均抑制前列腺癌PC3和LNCaP细胞的迁移,并呈剂量依赖性,其中对前列腺癌PC3和LNCaP细胞,900 μg/mL和800μg/mL组的抑制迁移效果最好。采用流式细胞仪检测前列腺癌PC3和LNCaP细胞周期和凋亡的结果表明,20 kGy辐照红景天提取物作用前列腺癌PC3和LNCaP细胞48 h后,与对照组相比较,均可对PC3和LNCaP细胞产生阻滞作用,且随着20 kGy辐照红景天提取物浓度的增加,2种前列腺癌细胞的凋亡率呈上升趋势。Western blot检测得出,与对照组相比较,20 kGy辐照红景天提取物使前列腺癌PC3和LNCaP细胞中的抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2下调,且呈剂量依赖性。综上,与未辐照组相比辐照红景天提取物抑制前列腺癌PC3和LNCaP细胞增殖效果明显好于未辐照组。其可能是通过阻滞前列腺癌PC3和LNCaP细胞的周期,下调有关抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2来抑制前列腺癌PC3和LNCaP细胞的增殖。
【图文】：

辐照剂量,抑制率,红景天,细胞的

Ｔａｂｌｅ邋４邋ｙｉｅｌｄ邋ｏｆ邋Ｒｈｏｄｉｏｌａ邋ｓａｃｈａｌｍｅｎｓｉｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ逡逑辐照剂量（ｋＧｙ）逦红景天粉质量（ｇ）逦红景天提取物质量（ｇ）逦提取物得率（％）逡逑未辐照逦２０．０４士０．０５逦６．１６±０．０８逦３０．７４３逡逑５逦１９．９８±０．０７逦６．５０±０．０７逦３２．５３邋３逡逑１０逦１９．９７土０＿０７逦６．０８士０．０９逦３０．４５３逡逑２０逦２０．０５±０．０９逦６．３９±0．0７逦３１．８７ａ逡逑３０逦２０．０５土０．０８逦６．１９±０．０６逦３０．８７ａ逡逑注：同一行凡有不同字母即为差异显著（尸＜０．０５），反之亦然。逡逑由表４可知，本试验中未辐照、５、１０、２０、３０邋ｋＧｙ辐照红景天经过乙醇提取后的红逡逑景天提取物得率分别为３０．７４％、３２．５３％、３０．４５％、３１．８７％、３０．８７％，且不同辐照剂量之逡逑间无显著性差异（Ｐ＞0．0５）。逡逑３．２辐照红景天提取物对ＰＣ３和ＬＮＣａＰ细胞增殖抑制的作用逡逑用ＣＣＫ－８法分析辐照红景天提取物对ＰＣ３和ＬＮＣａＰ细胞增殖作用的影响，并采用统逡逑计分析方法处理得到的结果。逡逑Ａ逦Ｂ逡逑

辐照剂量,细胞,红景天,辐照

逦延边大学硕士学位论文首先分别用相同浓度１０００邋Ｈｇ／ｍＬ的不同辐照剂量红景天提取物作用前列腺癌ＰＣ３ＬＮＣａＰ细胞４８邋ｈ，从而筛选出抑制效果最好的辐照剂量组，结果如图１所示。在前列ＰＣ３和ＬＮＣａＰ细胞中，与未辐照组相比较，辐照红景天提取物组显著抑制前列腺癌Ｐ和ＬＮＣａＰ细胞的活性，其中２０邋ｋＧｙ辐照红景天提取物组的抑制率最高，未辐照与辐之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０５），，而不同辐照剂量组之间没有显著性差异（＾＞０．０５）。由据产品的需要，提高辐照剂量会提高产品质量，且最高抑制率出现现在２０邋ｋＧｙ辐照剂量因此选择２０邋ｋＧｙ进行后续的试验。逡逑Ａ逦Ｂ逡逑
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】