补肾化瘀方对PCOS大鼠血清激素的影响及对卵巢组织的代谢组学分析

发布时间：2020-04-13 21:51

【摘要】：目的:研究补肾化瘀方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠血清维生素D_3、AMH、T、INS及E_2的影响以及药物干预后各组大鼠的卵巢组织内源性代谢物的变化。分析药物干预后各组大鼠血清指标的改变,探讨该方改善PCOS的作用机理;针对卵巢组织的差异代谢物,找出涉及的相关代谢通路与潜在的代谢标志物,从而进一步探索该方治疗PCOS的作用机制。方法:61只SD雌性大鼠随机选取8只设为空白组,剩余大鼠采用来曲唑灌胃法建立PCOS大鼠模型。成模后大鼠随机分为模型组、中药组及西药组,给予相应药物干预后腹主动脉取血并摘取双侧卵巢。利用酶联免疫吸附法测定药物干预后各组大鼠血清激素(AMH、INS、T、25(OH)VD_3与E_2)含量,分析各组血清水平的差异。同时采用UPLC-MS技术对补肾化瘀方及达英-35药物干预后PCOS大鼠的卵巢组织进行代谢组学分析。筛选出的差异代谢物也可以作为PCOS潜在的代谢标志物,并以此构建相关的代谢通道。结果:血清指标结果为空白组、中药组以及西药组的血清E_2与25(OH)VD_3浓度高于模型组,而AMH与INS浓度均低于模型组,数据结果具有统计学意义(P0.05)。代谢组学研究结果显示模型组卵巢组织的代谢物、Nicotine(烟碱)、N1,N10-Diferuloyl-spermidine(N~1,N~(10)二阿魏酰亚精胺)以及PG(18:3(9Z,12Z,15Z)/20:4(5Z,8Z,11Z,14Z))(多聚半乳糖醛酸酶)水平较空白组下降,而其他代谢物如Ajoene(阿藿烯)、Thioxan thine mono phosphate(单磷酸硫化黄嘌呤)、Diethyl sulfate(硫酸二乙酯)、Methyl2,6-dihydroxy-4-quinoline carboxylate(2,6二羟基-4-喹啉羧酸甲酯)、L-Anserine(鹅肌肽)等较空白组呈上升趋势。通过药物干预后筛选的差异代谢物构建出补肾化瘀方治疗PCOS最相关的代谢通路,分别为细胞色素P450外源性物质代谢途径、β-丙氨酸代谢途径和组氨酸代谢途径。结论:补肾化瘀方对灌服来曲唑所致多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型血清AMH、INS、25(OH)VD_3与E_2等激素水平有调节作用,能有效改善PCOS的无排卵、卵泡发育停滞及糖脂代谢紊乱等问题。同时,补肾化瘀方能通过调节PCOS大鼠体内的细胞色素P450外源性物质代谢途径与氨基酸代谢途径改善机体代谢物失衡问题。
【图文】：

模型大鼠,卵巢,HE染色,形态

图 1 模型大鼠卵巢局部形态（HE 染色，x100）g.1 The local morphology of the model rat ovary（HE stain，，×1明：来曲唑灌胃法成功构建了 PCOS 大鼠模型，可以究 PCOS 大鼠血清激素变化以及卵巢组织的代谢组学

标准曲线图,血清激素,大鼠

9图 2 大鼠各个血清激素标准曲线图注：A 为 AMH 标准曲线图；B 为 25（OH）VD3 标准曲线图；C 为 T 标准曲线图；D 为 E2标准曲图；E 为 INS 标准曲线图。Fig.2 Standard curves of rat serum hormonesNote: A is AMH standard curve diagram; B is 25(OH)VD3 standard curve diagram; C is T standard cudiagram; D is E2 standard curve diagram; E is INS standard curve diagram.
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】