黄芪总黄酮对氧损伤小鼠胚胎ROS水平及抗氧化酶表达的影响

发布时间：2020-04-14 00:57

【摘要】：胚胎体外培养是体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术的关键部分。然而高质量胚胎的缺乏会造成移植效率低下,也是IVF-ET失败的关键因素。有研究已经证实,在胚胎发育过程中发现的各种有害因素中,由过量ROS引起的影响被认为是最显著的。因此,为了清除过量的ROS,抗氧化剂已被广泛的应用在胚胎培养中。本试验选取天然型抗氧化剂黄芪总黄酮(TFA),在细胞及分子水平上来研究TFA对昆明小鼠胚胎体外发育的影响,以及TFA对体外培养小鼠囊胚的ROS水平和相关抗氧化酶基因的影响。在TFA对小鼠胚胎体外发育的影响试验中,将TFA浓度分为5组进行筛选,分别为0mg/L,25mg/L,50mg/L,75mg/L和100mg/L,其中0mg/L为对照组;后续试验分组为对照组,H2O2处理组和最佳浓度TFA+H2O2处理组,通过DCFH-DA荧光染色测定各组小鼠囊胚ROS水平,利用 RT-PCR 测定CAT SOD1、SOD2、SOD3、GPx1、GPx2 和 GPx4 基因的表达量。结果显示:1、在TFA对小鼠胚胎体外发育的影响中,各浓度组之间在2细胞率方面差异不显著;在4细胞率方面,75 mg/L组显著高于其他各组(P0.05);在囊胚率方面,50 mg/L组显著高于Omg/L组和100 mg/L组(P0.05),75 mg/L组显著高于 25 mg/L 组和 50 mg/L(P0.05)。2、在TFA对小鼠囊胚ROS水平的影响中,H2O2组极显著高于对照组(P0.01);TFA+H2O2 组显著低于 H2O2 组(P0.05)。3、在TFA对小鼠囊胚相关抗氧化酶基因的影响中,TFA+H2O2组的SOD1和SOD2的表达量都显著高于H202组(P0.05),CAT、GPx1和GPx4的表达量都极显著高于H2O2组(P0.01)。综上,我们可得出结论:1.在本研究中,TFA体外胚胎培养的最适浓度为75 mg/L。2.TFA处理可降低氧损伤小鼠囊胚ROS水平,提高CAT,SOD1、SOD2,GPx1和GPx4的表达水平。
【图文】：

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组（Ｐ＜０．０１）。逡逑３．邋３．邋２邋ＴＦＡ对氧损伤小鼠囊胚ＳＯＺ？基因表达的影响逡逑小鼠囊胚ＳＯＤ基因表达量ＲＴ－ＰＣＲ检测结果如图３－３。逡逑１．２邋－逡逑３逦３逦３逡逑１逦＿逦逦邋逦邋ｊ逦逦逡逑ｇ邋０．８邋－逦ｂ逦■逦ｂ逡逑１－邋ｍ邋ｎ｜邋ｎｉ邋ｆ逡逑°：１１邋Ｉｎｌ邋１邋１１１．邋１邋ＩＩＩ，，逡逑ＳＯＤｌ逦Ｓ０Ｄ２．逦Ｓ０Ｄ３逡逑图３－４．ＴＦＡ对氧损伤小鼠囊胚ＳＯＤ基因表达的影响逡逑其中Ｃ：对照组；Ｈ：邋Ｈ２0２组；ＴＨ：邋ＴＦＡ＋Ｈ２Ｏ２组逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３－４．Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ＴＦＡ邋ｏｎ邋ＳＯＤ邋ｇｅｎｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ邋Ｄａｍａｇｅ邋Ｍｏｕｓｅ逡逑２３逡逑
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2626665