平堂五号胶囊改善非酒精性脂肪肝的作用及机制研究

发布时间：2020-04-18 10:39

【摘要】：目的:我们前期的实验结果表明平堂五号胶囊能够改善肝脏脂质代谢,但是其机制尚不明确。有人研究证实自噬在非酒精性脂肪肝病的治疗中起着重要作用,因此本课题重点通过观察平堂五号胶囊对非酒精性脂肪肝细胞模型的干预,兼以通过观察平堂五号胶囊对非酒精性脂肪肝动物模型的干预,探究平堂五号胶囊是否能通过增强自噬治疗非酒精性脂肪肝病。方法:体外细胞实验:将HepG2细胞实验分为五组,第一组为对照组,其余四组用0.25mM的棕榈酸(PA)诱导,第二组为模型组,剩下组分别加入平堂五号胶囊含药血清、平堂五号胶囊含药血清+3-MA、雷帕霉素。培育72h后分别进行相关检测:甘油三酯含量的检测、油红O染色;Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、P62、Beclin-1;透射电镜观察细胞自噬体;PCR检测各组细胞炎症因子IL-1β、iNOS、TNF-α基因及自噬基因Beclin-1、P62表达水平;试剂盒检测各组细胞氧化应激产物SOD、GSH、MDA。体内动物实验:将小鼠适应性喂养一周后,随机分为对照组、模型组及给药组,每组各5只:对照组予正常饲料喂养,模型组和给药组给予60%高脂饲料喂养,两周后开始进行药物干预处理,正常组和模型组小鼠同时予生理盐水灌胃,给药组予平堂五号胶囊灌胃,10周后取材。用试剂盒测定小鼠血液TC和TG含量;Western Blot检测各组小鼠肝脏组织自噬蛋白Beclin-1、P62的表达情况;PCR检测各组小鼠肝脏组织炎症因子IL-1β、COX-2、iNOS、TNF-α基因和自噬基因P62、Beclin-1的表达水平。结果:体外细胞实验:与对照组相比,模型组HepG2细胞甘油三酯含量增加,氧化应激与炎症反应活跃,自噬受到抑制;与模型组相比,平堂五号胶囊组HepG2细胞脂质堆积、氧化应激与炎症反应均得到缓解,自噬增强;当在平堂五号胶囊含药血清中加了3-MA后,其治疗非酒精性脂肪肝的效果受到抑制。体内动物实验:与对照组相比,模型组小鼠血液TC和TG水平升高,肝脏组织炎症反应增强,其自噬受到抑制;与模型组相比,平堂五号胶囊组小鼠血液TC和TG水平降低,肝脏组织炎症反应减轻,其自噬水平上调。结论:平堂五号胶囊能通过增强自噬而降低肝脏细胞内的甘油三脂含量、减轻氧化应激反应与炎症反应,从而治疗非酒精性脂肪肝。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2632010