积雪草酸通过诱导凋亡和调节EMT抑制舌鳞癌Tca8113细胞的生长和迁移

发布时间：2020-04-20 04:33

【摘要】：目的通过积雪草酸(Asiatic acid,AA)对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、凋亡、迁移作用的影响及小鼠移植瘤模型的影响探讨其体内外抗舌癌的作用及其抗肿瘤机制。方法1、用MTT法检测不同浓度的AA对Tca8113细胞的增殖抑制作用,根据结果筛出合适的药物浓度及时间用于后续实验。2、利用集落形成实验观察AA对Tca8113细胞克隆形成的影响。3、通过Hoechst 33342染色观察AA对细胞凋亡形态的影响,进一步用流式细胞术检测细胞凋亡率情况。4、用流式细胞术分析AA对Tca8113细胞周期分布的情况。5、通过细胞划痕实验检测AA对Tca8113细胞迁移变化的影响。6.、通过Western blot法检测AA对Tca8113细胞中细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、p53、p21及细胞迁移相关蛋白N-Cadherin、E-Cadherin、Vimentin表达情况的影响。7、通过比较人舌鳞状细胞癌异种移植瘤模型,观察AA对小鼠舌鳞癌移植瘤的抑制作用,采用TUNEL法分析AA对肿瘤组织中肿瘤细胞凋亡的情况。结果1、AA能够有效的抑制Tca8113细胞的增殖且具有剂量依赖性,其24h的IC_(50)值为42.13μmol·L~(-1)(P0.05)。2、AA能抑制Tca8113细胞克隆的形成(P0.05)。3、与对照组相比,AA处理组凋亡细胞数和凋亡率均升高(P0.05)。4、AA处理后细胞周期逐渐阻滞在G_2/M期(P0.05)。5、与对照组相比,AA处理组其细胞迁移愈合能力降低(P0.05)。6、Western blot结果显示:Tca8113细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2表达量降低,Bax、cleaved capase-3和p53、p21表达量升高;同时迁移相关蛋白E-cadherin表达增加,而N-cadherin、Vimentin表达呈剂量依赖性降低(P0.05)。7、AA抑制裸鼠舌鳞状细胞癌移植瘤的生长,同时促进肿瘤组织中癌细胞凋亡(P0.05)。结论AA能抑制舌鳞癌Tca8113细胞的增殖及迁移,能诱导舌鳞癌Tca8113细胞凋亡,以上作用与AA呈一定浓度依赖性,其促凋亡机制可能与p53相关通路有关,其对迁移的抑制可能与调节上皮细胞向间充质细胞转变(Epithelial to Mesenchymal Transition,EMT)相关因子有关。
【图文】：

图 1AA 对 Tca-8113 细胞增殖的影响(x±s，n = 6注:*P <0.05，**P <0.01vs Control Tca8113 细胞克隆形成能力的影响30、40、50 μmol·L-1浓度的 AA 作用舌鳞癌 1 周后克

图 2AA 对 Tca-8113 细胞克隆形成的影响( x±s，n = 3)注：*P <0.05，**P < 0.01vs Control三、AA 对 Tca8113 细胞凋亡的影响当 Hoechst33342 染色时，正常细胞在荧光显微镜下显示弱蓝光，而凋亡细
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2634158