芪贞降糖颗粒对早期DR肝肾阴虚型患者临床疗效评价及对大鼠SOD、MDA及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响

发布时间：2020-04-20 15:54

【摘要】：目的:观察芪贞降糖颗粒对早期糖尿病视网膜病变(DR)患者的临床疗效及血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,并通过动物实验,观察芪贞降糖颗粒对DR模型大鼠视网膜组织SOD活性、MDA含量及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax、半胱天冬酶(Caspase-3)表达的影响,探讨芪贞降糖颗粒对早期DR的作用机制。方法:1.临床研究:纳入60例早期DR患者,按照随机数字表法随机分为两组,即对照组、治疗组各30例。两组患者予以糖尿病健康指导、降糖等基础治疗。对照组加用羟苯磺酸钙,治疗组在对照组基础上加用芪贞降糖颗粒。总疗程24周。观察两组患者中医证候积分、空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清SOD活性、MDA含量和视力、眼底情况等指标在治疗前后的变化情况。探讨芪贞降糖颗粒对早期糖尿病视网膜病变患者临床干预作用。2.实验研究:70只雄性健康SD大鼠,适应性喂养1周后,随机分为空白组10只(普通饲料喂养),其余60只为实验组(高脂饮食喂养)。实验组大鼠在喂养4周后使用链脲佐菌素腹腔注射造DR模型(造模3天内死亡3只)。将造模成功的57只大鼠进行高脂饲料喂养10周,期间死亡2只,最终55只随机分为模型组13只、羟苯磺酸钙组14只、芪贞降糖颗粒低剂量组14只和芪贞降糖颗粒高剂量组14只。各组均每日灌胃,共12周。在治疗前后对大鼠的一般状况以及体重、FPG进行观察,在喂养12周后处死大鼠,分离视网膜组织,部分组织在光镜下观察,并检测每组大鼠视网膜中SOD活性、MDA含量以及Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。(1)总有效率:治疗组为79.31%,对照组为62.50%,差异有统计学意义(P0.05);(2)中医证候积分:同治疗前比较,两组中医证候积分均明显降低(P0.01),且治疗组对证候的改善情况优于对照组(P0.01);(3)FPG、2hPG、HbA1c:同治疗前比较,两组FPG、2hPG、HbA1c均降低(P0.05或P0.01),与对照组相比,治疗组FPG、2hPG、HbA1c下降差异有统计学意义(P0.05或P0.01);(4)血清SOD、MDA:同治疗前比较,两组血清SOD明显上升,MDA水平下降,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),治疗后两组比较差异有统计学意(P0.01);(5)视力水平:同治疗前比较,两组视力均有所升高(P0.05或P0.01),且治疗组改善视力情况优于对照组(P0.01);(6)眼底症状积分:同治疗前比较,两组眼底症状积分均有所降低(P0.01);且治疗组改善眼底症状情况优于对照组(P0.01)。(7)治疗过程中,两组患者均未有血、尿、肝肾功能及心电图等方面的异常。2.动物实验结果:(1)大鼠的一般情况、体重变化:空白组大鼠摄食有所增加,进水适量,精神良好,运动灵活,毛色光滑白洁,毛态柔顺,粪质正常,大鼠的体重随着实验进行持续增加。各模型组造模后1周后即开始出现多饮多食多尿症状,精神倦怠,倦卧懒动,毛色偏黄缺少光泽,毛态偏湿呈绺,粪便偏湿,实验结束后,与模型组相比,各用药组大鼠的一般情况较好。大鼠体重在干预6周、12周时,与空白组比较,各用药组及模型组明显降低(P0.01);与模型组比较,各用药组体重明显升高(P0.01);与羟苯磺酸钙组相比,芪贞降糖颗粒高、低剂量组上升更明显,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结果:1.临床观察结果:(2)FPG:造模成功后,在进行药物干预前,与空白组比较,各用药组及模型组大鼠FPG明显升高(P0.01);与模型组比较,羟苯磺酸钙组FPG无统计学差异(P0.05),芪贞降糖颗粒高、低剂量组FPG明显降低(P0.01);且高剂量组FPG明显低于低剂量组(P0.01)。(3)视网膜光镜下观察:空白组大鼠视网膜各层结构清楚可见,排列整齐,各层细胞排列有序,呈圆形或者椭圆形。与空白组相比,各用药组及模型组大鼠视网膜都存在不同程度的病理形态改变。模型组程度最为严重,节细胞层水肿,细胞排列杂乱,数目减少较多,多层变薄,内、外胞核层细胞数目减少,排列不稠密。羟苯磺酸钙组节细胞层细胞排列不稠密,数目减少较多,外网织层轻度变薄,部分节段出现血管扩张出血。芪贞降糖颗粒高剂量组节细胞层细胞排列杂乱,细胞数量减少不明显,各层无明显变薄。芪贞降糖颗粒低剂量组视网膜各层细胞未见明显数目减少,但节细胞层细胞排列紊乱,有轻度水肿,内胞核层细胞排列稍杂乱。(4)大鼠视网膜SOD、MDA:与空白组比较,各用药组及模型组SOD含量降低,MDA含量升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,各用药组SOD含量升高,MDA含量下降,有显著差异(P0.01);芪贞降糖颗粒高剂量组与低剂量组、羟苯磺酸钙组比较SOD、MDA,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);低剂量组与羟苯磺酸钙组比较SOD、MDA,差异无统计学意义(P0.05)。(5)大鼠视网膜Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA表达:与空白组比较,模型组Bcl-2mRNA表达降低,Bax、caspase-3 mRNA表达升高(P0.01);与模型组比较,各用药组Bcl-2 mRNA表达升高,Bax、caspase-3 mRNA表达降低,有显著差异(P0.01);芪贞降糖颗粒高剂量组与低剂量组、羟苯磺酸钙组比较,Bcl-2、Bax、caspase-3mRNA表达有显著差异(P0.01),低剂量组与羟苯磺酸钙组比较,Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05);(6)大鼠视网膜Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达:与空白组比较,模型组Bcl-2蛋白表达降低,Bax、caspase-3蛋白表达升高(P0.01);与模型组比较,各用药组Bcl-2蛋白表达升高,Bax、caspase-3蛋白表达降低,有显著差异(P0.01);芪贞降糖颗粒高剂量组与低剂量组、羟苯磺酸钙组比较,Bcl-2、Bax、caspase-3的蛋白表达有显著差异(P0.01);低剂量组与羟苯磺酸钙组比较,Bcl-2、Bax、caspase-3的蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.芪贞降糖颗粒可有效改善早期DR患者肝肾阴虚证候,降低血糖,增强SOD活性,降低MDA含量,改善患者视力以及眼底症状,且临床使用安全有效。2.芪贞降糖颗粒可以从一定程度上缓解DM大鼠的视网膜病理形态改变。3.芪贞降糖颗粒改善早期DR的作用机制可能与增强SOD活性,降低MDA含量,上调Bcl-2表达,下调Bax、caspase-3表达,减轻氧化应激反应,减少细胞凋亡有关。
【图文】：

分级标准,国际,诊断标准,《中医内科学》

图 1 国际 DR 分级标准Fig1 International Clinical Diabetic Retinopathy Disease Severity Scale.2.3 中医证候诊断标准.2.3.1消渴病诊断标准（参照2012年“十二五”规划教材《中医内科学》[16]具有口干

光镜,羟苯磺酸钙,低剂量,组图

34A 空白组；B 模型组；C 羟苯磺酸钙组；D 芪贞降糖颗粒高剂量组；E 芪贞降糖颗粒低剂量组图 3 大鼠视网膜光镜下病理形态变化Fig 3 Pathological morphological changes of retinal light in rats
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285

【参考文献】