黄藤总生物碱抗阿尔茨海默症作用及机理研究
发布时间：2020-04-24 12:29
【摘要】：阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)是一种慢性神经系统退行性疾病,临床主要表现为认知能力下降、记忆力减退,占老年痴呆总数的60-80%。目前市场上治疗AD的药物较少,合成类药物是治疗该病的最重要的方法之一,主要有乙酰胆碱酯酶抑制剂和谷氨酸受体拮抗剂两类。大量的研究表明,虽然合成药物能改善AD患者的各项机能,但该类治疗只是缓解症状,且只对发病过程中某个或某几个环节起效,因此不能阻止疾病的恶化,而且不良反应明显。相对于目前市场上毒副作用较大的化学合成类药物而言,天然药物具有多靶点、多环节的作用特点,在治疗中起到越来越重要的作用。目前,国内外学者广泛开展了药用植物抗阿尔茨海默症的研究,发现了较多具有抗AD作用的有效成分。黄藤为防己科天仙藤属植物黄藤(Fibraurea recisa Pierre.)的干燥藤茎,主要含有以黄藤素为代表的异喹啉生物碱类成分,具有抗肿瘤、抗骨关节炎、抗病毒和神经保护等药理作用,其制剂在临床上主要用于各种感染,安全有效。我们课题组首次发现黄藤总生物碱对阿尔茨海默症动物模型具有明显改善作用,该发现获得国家授权发明专利。本论文研究目的旨在深入研究和探讨黄藤总生物碱的抗AD作用及作用机制,为黄藤总生物碱的进一步开发利用提供科学依据。本研究采用D-半乳糖/AlCl_3诱导小鼠阿尔茨海默症模型,采用行为学检测、HE病理检查、ELISA方法、免疫组化、蛋白免疫印迹等技术手段研究了黄藤总生物碱的抗AD作用及作用机制。行为学检测结果表明黄藤总生物碱能显著提高AD模型小鼠在Y迷宫测试中的空间短期工作记忆能力以及Morris水迷宫中的空间学习记忆能力。ELISA测定结果显示黄藤总生物碱能显著降低AD模型小鼠脑组织中淀粉样蛋白(Aβ)、磷酸化Tau蛋白(P-Tau)、Tau、细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)和乙酰胆碱酯酶(AchE)的水平,可显著升高模型小鼠脑组织中神经递质乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)和微管相关蛋白2(MAP2)的水平。在对黄藤总生物碱抗氧化作用研究中发现:黄藤总生物碱能显著升高D-半乳糖/AlCl_3诱导的AD模型小鼠中谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,降低氧化应激产物丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的水平。在对黄藤总生物碱抗炎作用研究中发现:黄藤总生物碱能显著降低AD小鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的水平,显著降低模型小鼠脑组织中核转录因子-κB(NF-κB)、环氧合酶-2(cox-2)和诱导一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平。此外,免疫组化法还检测到黄藤总生物碱显著降低模型小鼠脑组织中炎症因子白介素-33(IL-33)和ST2蛋白表达水平。在对黄藤总生物碱抗神经元凋亡作用研究中发现:黄藤总生物碱显著抑制了AD模型小鼠脑组织中Caspase-3、cleaved Caspase-3和Bax的蛋白表达,增加了Bcl-2的蛋白表达,具有抗神经元细胞凋亡的作用。HE和TUNEL染色结果表明黄藤总生物碱显著抑制了神经元细胞凋亡。以上研究结果表明黄藤总生物碱对D-半乳糖联合三氯化铝诱导的小鼠阿尔茨海默症具有明显改善作用,其抗AD作用是通过抗氧化应激、抗神经炎症和抗神经细胞凋亡实现的。
【图文】：
吉林农业大学硕士学位论文 第二篇 研究内容 第三章黄藤总生物碱抗炎作用研究升高；盐酸多奈哌齐组表达量较模型组减低，黄藤总生物碱高剂量组中 COX-2 与 iNOS 蛋白表达明显减少（p<0.05）；黄藤总生物碱中剂量组 COX-2 与 iNOS 蛋白表达明显减少（p<0.05），黄藤总生物碱低剂量组 COX-2 与 iNOS 蛋白表达减少，比较模型组呈现减少趋势。蛋白免疫印迹实验中，与空白对照组相比，模型组中 COX-2 与 iNOS 蛋白表达量显著升高（p＜0.01），，与模型组相比，盐酸多奈哌齐组明显有所改善（p＜0.01），黄藤总生物碱高剂量也可显著抑制 COX-2 与 iNOS 蛋白表达量的增加（p＜0.01），黄藤总生物碱中剂量组表达量有所降低（p<0.05），黄藤总生物碱低剂量组无统计学意义。结果见图 3.1、3.2 表 3-4、3-5。空白 模型阳性 高中低
农业大学硕士学位论文 第二篇 研究内容 第三章黄藤总生物碱抗炎作 3-4 黄藤总生物碱对 AD 模型小鼠脑中 IL-33、ST2、NF-κB、COX-2、iNOS 水平影响( x±sab.3-4 Effects of Fibraurea recisa Pierre alkaloid on the levels of IL-33, ST2, NF-κB, COX-2, iNOSmodel mice( x±s，n=8 )IL-33（IOD） ST2（IOD） NF-κB（IOD） COX-2（IOD） iNOS(IOD空白0.23±0.01 0.21±0.10 0.25±0.11 0.20±0.02 0.20±0.11模型0.28±0.11**0.27±0.13**0.51±0.12**0.25±0.11**0.26±0.10**阳性0.26±0.11△0.26±0.10△0.40±0.12△0.21±0.11△0.24±0.11△高0.25±0.12△0.25±0.11△0.42±0.12△0.20±0.12△0.23±0.12△中0.26±0.13△0.26±0.04△0.45±0.12△0.23±0.13△0.24±0.10△低0.27±0.10 0.27±0.12 0.49±0.10 0.24±0.10 0.25±0.17注：与空白组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01，△P＜0.05。空白 模型 阳性 低 中 高
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285
【图文】：
吉林农业大学硕士学位论文 第二篇 研究内容 第三章黄藤总生物碱抗炎作用研究升高；盐酸多奈哌齐组表达量较模型组减低，黄藤总生物碱高剂量组中 COX-2 与 iNOS 蛋白表达明显减少（p<0.05）；黄藤总生物碱中剂量组 COX-2 与 iNOS 蛋白表达明显减少（p<0.05），黄藤总生物碱低剂量组 COX-2 与 iNOS 蛋白表达减少，比较模型组呈现减少趋势。蛋白免疫印迹实验中，与空白对照组相比，模型组中 COX-2 与 iNOS 蛋白表达量显著升高（p＜0.01），，与模型组相比，盐酸多奈哌齐组明显有所改善（p＜0.01），黄藤总生物碱高剂量也可显著抑制 COX-2 与 iNOS 蛋白表达量的增加（p＜0.01），黄藤总生物碱中剂量组表达量有所降低（p<0.05），黄藤总生物碱低剂量组无统计学意义。结果见图 3.1、3.2 表 3-4、3-5。空白 模型阳性 高中低
农业大学硕士学位论文 第二篇 研究内容 第三章黄藤总生物碱抗炎作 3-4 黄藤总生物碱对 AD 模型小鼠脑中 IL-33、ST2、NF-κB、COX-2、iNOS 水平影响( x±sab.3-4 Effects of Fibraurea recisa Pierre alkaloid on the levels of IL-33, ST2, NF-κB, COX-2, iNOSmodel mice( x±s，n=8 )IL-33（IOD） ST2（IOD） NF-κB（IOD） COX-2（IOD） iNOS(IOD空白0.23±0.01 0.21±0.10 0.25±0.11 0.20±0.02 0.20±0.11模型0.28±0.11**0.27±0.13**0.51±0.12**0.25±0.11**0.26±0.10**阳性0.26±0.11△0.26±0.10△0.40±0.12△0.21±0.11△0.24±0.11△高0.25±0.12△0.25±0.11△0.42±0.12△0.20±0.12△0.23±0.12△中0.26±0.13△0.26±0.04△0.45±0.12△0.23±0.13△0.24±0.10△低0.27±0.10 0.27±0.12 0.49±0.10 0.24±0.10 0.25±0.17注：与空白组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△△P＜0.01，△P＜0.05。空白 模型 阳性 低 中 高
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 甘秀海;张燕;王超英;赵超;周欣;;酸木瓜总生物碱的提取及其抗菌活性[J];贵州农业科学;2015年08期
2 柯敏;陈永刚;李居怡;王雄;吴金虎;;复方“前愈”总生物碱部位的分离纯化及含量测定[J];时珍国医国药;2014年04期
3 何军,祝林,奉建芳;附子总生物碱含量测定方法比较[J];现代中药研究与实践;2003年06期
4 龙子江,董宏超,盛炎炎;土鳖虫总生物碱对家兔心泵功能的影响[J];安徽中医学院学报;1989年03期
5 朱尚勤;莫少泽;;芭蕉茎总生物碱对犬血压的影响[J];现代应用药学;1989年04期
6 欧阳强;;川芎炮制前后总生物碱含量的变化[J];中成药;1989年09期
7 董佳悦;刘美琳;任波;张梅;;四川不同产地厚朴总生物碱的含量分析[J];中药与临床;2016年06期
8 扈本荃;徐s
本文编号：2638963
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2638963.html
