咳喘宁口服液调节Sema4D对RSV复合OVA哮喘模型大鼠NGF的影响

发布时间：2020-04-28 05:20

【摘要】：目的:观察哮喘模型大鼠肺及内脏感觉传入神经中NGF的表达,探讨Sema4D与NGF的关系及咳喘宁调节Sema4D对NGF的影响,为进一步阐明咳喘宁整体调节作用机理提供依据。方法:幼龄Wistar大鼠72只,按随机数字表法选取12只作为正常组,其余组作为模型组,模型组按照幼龄大鼠RSV复合OVA哮喘模型方法造模,于致敏14天后,从正常组中及模型组中分别随机选取6只观察大鼠精神状态及心率、呼吸并检测气道高反应性判断模型是否成功。待哮喘模型造模完成后,将造模成功后的大鼠按随机数字表法分为9组,每组6只,即哮喘大鼠组(模型组)、哮喘大鼠Sema4D干预组(Sema4D组)、哮喘大鼠Sema4D抗体干预组(Sema4D抗体组)、哮喘大鼠低、中、高剂量咳喘宁干预组(咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)、哮喘大鼠Sema4D+不同剂量咳喘宁干预组(联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)。除正常组6只外,其余9组大鼠按分组情况分别予以药物干预:Sema4D组予以Sema4D腹腔注射,Sema4D抗体组予以Sema4D抗体腹腔注射,咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别给予咳喘宁低、中、高剂量灌胃,Sema4D+不同剂量咳喘宁干预组分别予以Sema4D腹腔注射及咳喘宁低、中、高剂量灌胃(按临床量效关系观察结果拟定咳喘宁口服液高剂量1ml/100g,中剂量0.3ml/100g,低剂量0.033ml/100g),每天1次,治疗2周。上述处理连续2周后,取出各组大鼠动物模型肺组织与脊髓组织,分别采用Real-time PCR技术、免疫组织化学方法及Western blotting技术检测NGF含量的表达变化。结果:1.哮喘发病时Sema4D对NGF的影响:与模型组相比,Sema4D组中NGF表达明显增高,P0.01,差异有显著的统计学意义。Sema4D抗体组与模型组相比,NGF的表达明显减低,p0.01,差异有显著的统计学意义。2.哮喘发病时咳喘宁调节Sema4D对NGF的影响:(1)空白组NGF表达最少,各组与空白组对比,NGF表达均有增高,P0.01,差异有显著的统计学意义。(2)与模型组相比,Sema4D抗体组及咳喘宁各组中NGF的含量均有减低,p0.01,差异有显著的统计学意义。联合Ⅰ组与模型组相比,NGF表达稍高,p0.05,差异无统计学意义。联合Ⅱ、Ⅲ组与模型组相比,NGF表达减低,P0.01,差异有显著的统计学意义。(3)Sema4D抗体组与咳喘宁各组相比,咳喘宁Ⅱ、Ⅲ组中NGF表达减低,P0.01,差异有显著的统计学意义。咳喘宁Ⅰ组NGF表达比抗体组增高,P0.01,差异有显著的统计学意义。(4)与咳喘宁Ⅲ组相比,模型组、Sema4D组、Sema4D抗体组、咳喘宁Ⅰ组、联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组NGF表达均有明显增高,P0.01,差异有显著的统计学意义。与咳喘宁Ⅲ组相比,咳喘宁Ⅱ组NGF含量稍低(p0.05),差异无统计学意义。结论:1.哮喘发病时,Sema4D促进NGF的表达,加重哮喘发展。2.哮喘发病时,咳喘宁口服液可抑制NGF的表达,Sema4D对NGF的促进作用可被咳喘宁削弱,咳喘宁中、高剂量组的调控作用最佳,即咳喘宁口服液可能通过调控Sema4D而影响NGF的表达发挥治疗作用。
【图文】：

曲线图,气道阻力,大鼠,曲线图

表 2 各组大鼠气道阻力比较（ x±s）Rl 升高率%正常组模型组浓度（mg /kg）生理盐水 20.50±2.81 21.17±3.371.56 42.17±3.25 44.50±1.523.12 60.50±3.33 105.00±7.32◇6.25 82.50±4.14 152.83±7.31◇12.5 107.83±7.00 324.33±4.89◇25 158.67±4.84 575.00±4.34◇注：与正常组相比，◇表示 P＜0.01，，差异有显著的统计学意义，未标记表示无统计学意义。

肺组织,组图

肺组织NGF的表达（100×）
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5;R-332

【参考文献】