逆萎康组方优化研究

发布时间：2020-05-03 20:04

【摘要】：目的对原“逆萎康”组方进行优化,在确保其疗效的基础上,减轻药物副作用,并在细胞层面探讨优化组方的药理作用。方法1、用乙醇水杨酸钠溶液给小鼠灌胃建立胃炎模型,分别用雪胆、黄芪、老龙皮、朱砂七、半枝莲、海螵蛸以及生理盐水给小鼠灌胃,通过观察小鼠食用高岭土和鼠粮的量,筛查原“逆萎康”组方致呕成分。2、分别用原组方、原组方朱砂七减半、原组方朱砂七减半加生姜、原组方朱砂七减半加陈皮、原组方朱砂七减半加半夏、生理盐水给小鼠灌胃,筛选止呕效果最佳的组方。3、分别用优化组方、原组方和生理盐水给小鼠灌胃,通过免疫组化方法测定COX-2和TNF-α,对优化组方和原组方进行效果对比。4、优化“逆萎康”组方作用于MC细胞(模拟癌前病变细胞),使用流式细胞仪检测MC细胞凋零状况;使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定C-myc,CyclinD1基因的表达;用免疫印迹法(Western blot)测定Bcl-2、Bax,Caspase-3、β-catenin、PTEN、GSK-3β和p-GSK-3β蛋白的表达量。结果1、灌胃10天后小鼠精神萎靡,体重减轻,HE染色可见黏膜下水肿和炎细胞浸润、糜烂以及浅溃疡。朱砂七组小鼠食用高岭土与食用鼠粮的比值最高。2、陈皮组和生姜组小鼠食用高岭土与食用鼠粮的比值最低。连续对小鼠进行灌胃2周后,小鼠的精神状态、体重均有明显恢复。3、与模型组相比,原逆萎康组和优化组COX-2和TNF-α的平均光密度值均显著降低(P0.01),原逆萎康组与优化组COX-2和TNF-α的平均光密度值无明显改变。4、优化逆萎康组方能够促进MC细胞的凋零,呈浓度依赖性递增。逆萎康作用MC细胞48 h后,能够显著下调C-myc、CyclinD1基因的表达量。逆萎康作用MC细胞48 h后,显著下调MC细胞Bcl-2、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达量,上调Bax、Caspase-3、PTEN、GSK-3β蛋白表达量。结论1、朱砂七可能是致呕的主要成分,将优化组方中朱砂七的剂量减半。2、陈皮组和生姜组小鼠恶心程度最轻。确定将雪胆15 g、半枝莲15 g、黄芪10 g、朱砂七3 g、老龙皮10 g、海螵蛸10 g、陈皮6 g、生姜6 g作为优化“逆萎康”的组方成分。3、优化组方和原“逆萎康”组方都能够改善小鼠胃炎模型的临床指征,二者疗效相当,没有显著性差异。4、优化“逆萎康”组方能够诱导MC细胞凋亡,该组方可能对Wnt/β-catenin信号通路的激活起到有效的抑制作用。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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