龙胆苦苷对关节炎大鼠抗炎及保肝作用研究

发布时间：2020-05-07 04:34

【摘要】：目的:建立SD大鼠佐剂性关节炎(Adjuvant-induced arthritis,AA)模型,研究龙胆苦苷(Gentiopicroside GPS)高中低剂量对于AA大鼠的足厚度、足周长、足体积、ALT、AST水平、以及滑膜组织IL-6、TNF-α水平的影响。并通过病理组织学检查以及X-光实验研究GPS对于AA大鼠关节炎的保护作用。方法:SD大鼠右后足趾皮内注射0.1ml弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)对大鼠进行关节炎造模。除空白组外,造模成功的SD大鼠随机分为5组,分别为:弗氏完全佐剂诱导的关节炎模型组、GPS高剂量组(120mg/kg)、GPS中剂量组(60mg/kg)、GPS低剂量组(30mg/kg)、阳性对照甲氨蝶呤(MTX)组(0.2mg/kg),于致炎成功后d1-d7内按试验设计各组给药剂量分别给大鼠灌胃给药。每天用游标卡尺、足趾容积测量仪对大鼠原发侧足厚度、足周长、足体积进行测量,评估大鼠爪肿胀程度;光学显微镜下观察踝关节组织病理形态学的变化,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-6、TNF-α的水平,以及肝功能ALT、AST水平。结果:各给药组对AA大鼠的治疗作用造模后3天开始,AA大鼠注射侧后爪出现明显的肿胀,红斑,行动不便等症状,关节滑膜明显增生,分布杂乱,并伴有大量炎性细胞浸润和血管翳形成。连续灌胃给药7天后,GPS高、中、低剂量组(120mg/kg,60mg/kg,30mg/kg)、MTX组(0.2mg/kg)给药均能不同程度的改善AA大鼠足肿胀程度,减轻滑膜组织炎症,且GPS低、中剂量组(30mg/kg,60mg/kg)的抗炎效果较高剂量组(120mg/kg)更为显著(P0.01)。各给药组对AA大鼠骨破坏的抑制作用与正常组相比,AA组大鼠关节出现肿胀,骨破坏,趾间缝隙比较大。与AA组相比,GPS(30、60、120mg/kg)组减少了关节肿胀,骨破坏,趾间缝隙比较小。由此可以看出龙胆苦苷对大鼠佐剂性关节炎有一定的抗炎作用。各给药组对AA组大鼠血清中ALT、AST的下调本实验通过测大鼠血清中ALT、AST变化,发现与正常组相比,AA组AST、ALT明显升高。表明佐剂对大鼠肝脏造成一定损伤。GPS(30、60、120mg/kg)与AA组对比发现,AST、ALT含量都有一定下降,说明龙胆苦苷具有抗炎作用。并且与正常组相比,高剂量组AST水平下调,和正常组相比(P0.05,P0.01)说明高剂量组出现保肝作用。各给药组对AA组大鼠滑膜组织中TNF-α和IL-6下调本实验分析了大鼠血浆中TNF-α和IL-6水平的变化,发现各组大鼠滑膜的TNF-α、IL-6的水平,和正常组比较,AA组TNF-α和IL-6水平均出现上调(P0.01)。但GPS(30、60、120mg/kg)组与AA组相比,TNF-α和IL-6水平均出现下调(P0.01、P0.05)。说明龙胆苦苷对大鼠佐剂性关节炎具有良好的抗炎作用。结论:GPS低、中剂量(GPS:30mg/kg,60mg/kg)对AA大鼠炎症症状的缓解作用高于GPS高剂量(120mg/kg),说明了GPS对AA大鼠抗炎治疗作用与剂量有关,中剂量对抗炎作用更好,从AST、ALT和TNF-α、IL-6的分析中可以看出GPS(30、60mg/kg)对大鼠炎症的有一定抑制作用,同时GPS(120mg/kg)高剂量组还出现保肝作用。
【图文】：

足肿胀,大鼠,程度

5.1 各给药组对 AA 大鼠的治疗作用5.1.1 GPS 对 AA 大鼠关节肿胀度的影响大鼠注射 FCA 3 天后，注射侧的后爪出现轻微的红肿，病情随着时间逐渐加重，约过 7 天后，其症状为踝关节红肿，且已至整个脚掌及趾关节均出现红肿。造模后的 10 天，出现明显的肿胀，说明模型建造成功。各组大鼠的致炎给药后足肿胀程度的结果显示如 Fig.1，表明未给药组脚掌及踝关节仍表现为红肿，给药组的低、中、高剂量及 MTX 组依次对 AA 大鼠炎症有不同程度的改善作用。Fig.2.3.4 为各组大鼠给药后爪肿胀度，关节周长，足厚度的影响,图中发现使用GPS 和 MTX 治疗均表现出 FCA 诱导的关节周长和足厚度明显改善，且肿胀程度也逐渐减轻（P<0.01），从模型组开始显示出显著性，第 2 天炎症达到峰值，第 7 天开始接近其正常的对照值，且 GPS 中剂量和 MTX 与 GPS 低、高剂量相比，，抗炎作用更强（P<0.05 或 P<0.01）。

足体,大鼠,空白

图 2 GPS 对 AA 大鼠足体积的影响(n=6)*代表和空白组相比 P＜0.05 ，**代表和空白组相比 P＜0.01；#代表和模型组相比5 ， ##代表和模型组相比 P＜0.01。图 3 GPS 对 AA 大鼠关节周长的影响(n=6)*代表和空白组相比 P＜0.05，**代表和空白组相比 P＜0.01；#代表和模型组相比
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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