青蒿素对LPS活化的小胶质细胞炎症介质释放的影响

发布时间：2020-05-15 08:22

【摘要】：目的使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导BV2小胶质细胞来建立慢性神经退行性疾病的炎症反应的细胞模型,通过采用细胞生物学、分子生物学、免疫组化等实验方法来探究青蒿素(Artemisinin,ART)对该模型炎症介质释放的影响,旨在研究青蒿素对慢性神经退行性疾病神经细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法常规培养传代小鼠BV2小胶质细胞,将处于对数期生长状态良好的BV2细胞用于进一步的实验。使用不同浓度的青蒿素(ART)来处理经过脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞。采用CCK8法来检测ART对BV2小胶质细胞的作用浓度。通过ELISA来检测ART对促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平的影响。采用Western blot来检测NF-κB蛋白(P65)、IKBα的表达水平,以及ART对诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧合酶2(COX-2)的基因表达的影响。结果通过CCK8法检测出当ART的剂量范围为0.1至10μmol/L时其对BV2小胶质细胞不具有明显的毒性作用,为方便进一步的实验操作,因此选择1μmol/L作为ART的有效作用浓度。ELISA实验结果表明,在使用ART预先处理过的BV2小胶质细胞中,促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌水平显著降低。Western blot的结果显示,ART预处理组细胞中的NF-κB(P65)、IKBα的蛋白表达水平显著升高,炎症诱导酶i NOS、COX-2的表达水平则显著降低。结论ART可以调节LPS活化的BV2小胶质细胞中炎性因子的分泌及炎症诱导酶的表达,发挥其抗炎作用,这一抗炎作用可能是通过对NF-κB信号通路的调控来实现的。
【图文】：

小胶质细胞,炎性因子,对照组

1 不同浓度的 ART 对 BV2 小胶质细胞活性的影注: * P ＜ 0.05，，与对照组相比cts of different concentrations of ART on the viability BV2 小胶质细胞内炎性因子释放的影响测结果表明，与对照组相比，LPS 诱导后的 BV2 小TNF-α 的分泌水平明显升高（P＜0.01）；与 LPS 组相/L）促炎因子 IL-1β、TNF-α 的分泌水平显著降低（

细胞内,对照组,表达水平

图 3 Western blot 检测各组细胞内 P65、IKBα、iNOS、COX2 的表a、b、c、d 分别为 P65、IKBα、iNOS、COX-2 相对表达量注：* P ＜0.01 与对照组相比，**P＜0.01 与 LPS 组相比，#P＜0.05 与对比，##P＜0.05 与 LPS 组相比Fig.3 The expression levels of P65, IKBα, iNOS and COX2 in each grodetected by Western blot
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】