苦参素通过下调ABCG2表达影响阿霉素抗人肝癌耐药裸鼠移植瘤的作用

发布时间：2020-05-16 01:27

【摘要】：目的:探讨苦参素能否通过调控三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)表达影响阿霉素抗人肝癌耐药裸鼠移植瘤的作用。方法:裸鼠腋下接种人肝癌细胞HepG2/阿霉素耐药细胞(HepG2/ADM),构建移植瘤模型。将20只雌性裸鼠随机分成对照组、阿霉素组、苦参素组、联合组(阿霉素联合苦参素)。干预14d后,取出瘤体,HE染色法观察移植瘤组织细胞的形态,RT-qPCR检测ABCG2的mRNA水平,免疫组化及ELISA法检测ABCG2蛋白水平,并对组间数据进行对比。结果:(1)我们观察发现药物干预以后对照组裸鼠刚开始精神状态及生活习性无明显改变,到后期随瘤体增大而表现为精神及睡眠不佳,进食减少;阿霉素组裸鼠表现为精神差、活动量下降、进食及大小便减少,而苦参组及联合组裸鼠一般情况良好,精神状态、睡眠、饮食及大小便均未见明显改变。(2)HE染色法结果显示:与对照组相比,阿霉素组抗移植瘤坏死作用不明显,其他两组有促移植瘤坏死作用;与单独苦参素组相比,联合组促移植瘤坏死效果更好。(3)RT-qPCR检测结果显示:与对照组相比,阿霉素组ABCG2 mRNA表达上升,苦参素组和联合组ABCG2 mRNA表达下降(P0.05)。(4)免疫组化结果显示ABCG2阳性染色呈棕色,大多分布在胞浆内,部分在胞膜;与对照组相比,阿霉素组ABCG2蛋白表达较高,苦参素组和联合组中ABCG2蛋白水平明显下降(P0.05)。(5)ELISA结果显示:与对照组相比,阿霉素组ABCG2蛋白表达上调,苦参素组和联合组中ABCG2蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1、苦参素可减轻阿霉素的药物不良反应,改善实验裸鼠生存质量;2、苦参素可提高阿霉素抗人肝癌耐药裸鼠移植瘤的抑瘤作用及促进肝癌对阿霉素的敏感性,其机制可能与下调ABCG2 mRNA与蛋白表达有关。
【图文】：

裸鼠,苦参素,阿霉素,对照组

果瘤情况及裸鼠一般情况实验发现接种人肝癌 HepG2/ADM 细胞后约 7 天左右可见肿瘤生长，大约 1瘤直径约 0.6cm，未见裸鼠死亡现象，成瘤率 100%，造模成功。我们观察预以后对照组裸鼠刚开始精神状态及生活习性无明显改变，到后期随瘤体增精神及睡眠不佳，进食减少；阿霉素组裸鼠表现为精神差、活动量下降、进减少，而苦参组及联合组裸鼠一般情况良好，，精神状态、睡眠、饮食及大小显改变。

苦参素,移植瘤,阿霉素,对照组

图 2-2 干预 14 天后各组移植瘤大小Figure2-2 xenograft sizes in four groups after intervention for 14 days注：A：对照组；B：阿霉素组；C：苦参素组；D：联合组E 染色结果对比 200 倍数光学显微镜下观察 HE 染色（参见图 2-3）。镜下观察移植瘤的形态的形态相似，体现为肝癌实体：细胞质为嗜碱性，核浆比例增多，核分裂较胞有脂肪变性的现象，有些呈现小片或大量细胞坏死。对照组（图 2-3A）与（图 2-3B）镜下观察细胞形态大致相仿，仅见少许细胞出现核固缩，未见核碎解，提示细胞坏死较少。在苦参素组（图 2-3C）中可见大部分细胞出现核固生核碎裂，未见核溶解现象。在联合组（图 2-3D）中可见大量细胞坏死，表分细胞发生核碎裂，甚至发生核溶解现象。
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【参考文献】