参地补肾胶囊对高糖诱导的HK-2细胞转分化中ZO-1、α-SMA的影响

发布时间：2020-05-16 12:19

【摘要】：目的通过观察参地补肾胶囊含药血清对高糖诱导的人肾小管上皮(HK-2)细胞转分化中细胞形态学变化及对ZO-1、α-SMA表达的影响,从分子生物学水平探讨参地补肾胶囊干预肾小管上皮细胞转分化的机制。方法1.健康雄性SD大鼠40只,随机分成四组后,分别给予参地补肾胶囊、贝那普利、生理盐水连续灌胃7天,于末次灌胃2h后,制备大鼠含药血清。2.将体外培养的人肾小管上皮细胞随机分为四组,C组空白对照组(10%大鼠正常血清+K-SFM培养基+5.5m M D-葡萄糖)、H组高糖模型组(10%大鼠正常血清+K-SFM培养基+25m M D-葡萄糖)、B组贝那普利组(10%大鼠贝那普利药物血清+K-SFM培养基+25m M D-葡萄糖)、S组参地补肾组(10%大鼠参地补肾药物血清+K-SFM培养基+25m M D-葡萄糖),作用72h后,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,用Western Blot方法检测ZO-1、α-SMA蛋白的表达情况,用Real Time PCR方法检测ZO-1m RNA的表达情况。结果1.各组细胞形态学变化:空白对照组细胞贴壁生长,细胞呈方形或多角形,细胞间紧密连接,形成典型“铺路石”样形态。高糖模型组细胞变大变长,呈梭型改变,表现为成纤维细胞样形态,细胞间隙变大,排列松散,大量细胞脱落,丧失原有“铺路石”样外观。贝那普利组及参地补肾组细胞接近空白对照组细胞,与高糖模型组比较,脱落细胞及“变形”细胞减少,细胞间隙缩小,大部分细胞仍呈贴壁生长,呈多边鹅卵石状。贝那普利组及参地补肾组细胞无明显差异。2.各组细胞ZO-1、ZO-1m RNA的表达情况:空白对照组细胞ZO-1呈高表达,高糖模型组、贝那普利组与参地补肾组表达量均低于空白对照组,差异有统计学意义(p0.05);与高糖模型组比较,贝那普利组、参地补肾组ZO-1表达量均高于高糖模型组,差异有统计学意义(p0.05),与贝那普利组比,参地补肾组ZO-1表达量更高,差异有统计学意义(p0.05)。Real time PCR检测结果显示,与空白对照组比较,高糖模型组、贝那普利组及参地补肾组ZO-1m RNA表达量均低于空白对照组,高糖模型组与空白对照组差异有统计学意义(p0.05),贝那普利组与空白对照组差异有统计学意义(p0.05),参地补肾组与空白对照组差异无统计学意义(p0.05);与高糖模型组比,贝那普利组及参地补肾组ZO-1m RNA表达量高于高糖模型组,差异有统计学意义(p0.05),与贝那普利组比较,参地补肾组ZO-1m RNA表达量更高,差异有统计学意义(p0.05)。3.各组细胞a-SMA的表达情况:空白对照组细胞a-SMA呈低表达,高糖模型组、贝那普利组、参地补肾组a-SMA表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(p0.05)。与高糖模型组比,贝那普利组及参地补肾组a-SMA表达均低于高糖模型组,差异有统计学意义(p0.05)。与贝那普利组比,参地补肾组a-SMA表达低于贝那普利组,有统计学意义(p0.05)。结论1.参地补肾胶囊能够抑制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞转分化。2.参地补肾胶囊可能是通过上调细胞ZO-1,下调α-SMA的表达延缓肾小管上皮细胞EMT。
【图文】：

各组勿维T}1mRIVA的表达偏祝

黑龙江省中医药科学院硕士学位论文表 7 各组细胞 ZO-1mRNA 表达结果（ X ± S ）组别 ZO-1mRNA空白对照组（C 组）1.00±0.010A0.37±0.008C0.69±0.096B0.91±0.013A高糖模型组（H 组）贝那普利组（B 组）参地补肾组（S 组）标有不同字母表示组间差异显著（P<0.05），，数值均为半定量标准化表达数
【学位授予单位】：黑龙江省中医药科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 邓明玲;;丹参多酚酸盐对早期糖尿病肾病治疗效果和炎症因子水平的影响[J];实用糖尿病杂志;2017年01期

2 谭成;冉小库;窦德强;;白术对大鼠肾阳虚型下焦水肿影响的实验研究[J];中华中医药学刊;2017年02期

3 贺李娴;谭钢;;ZO-1/ZONAB信号通路与细胞的增殖分化[J];中国细胞生物学学报;2017年01期

4 刘丽;王旭慧;袁易;;抗高血压药盐酸贝那普利的研究进展[J];中南药学;2016年06期

5 张慧儒;吕会新;康希;林丽霞;;茯苓多糖抗2型糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化作用研究[J];当代医学;2016年08期

6 文玉敏;张并璇;严美花;张浩军;李平;;大黄及其制剂在慢性肾衰竭治疗中的概述[J];辽宁中医杂志;2015年10期

7 陈伯成;;慢性肾脏病的流行病学调查[J];中国卫生产业;2015年09期

8 毛志敏;万毅刚;孙伟;陈好利;黄燕如;史喜苗;姚建;;黄葵胶囊抑制糖尿病肾病肾组织氧化应激和p38MAPK信号通路活性改善肾纤维化的作用和机制[J];中国中药杂志;2014年21期

9 顾刘宝;卞茸文;涂s

本文编号：2666724