参芪抑瘤方联合顺铂对MFC荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

发布时间：2020-05-17 18:43

【摘要】：目的:通过观察参芪抑瘤方联合顺铂对MFC荷瘤小鼠肿瘤的干预作用,探讨本方对肿瘤的抑制作用,并从肿瘤细胞增殖凋亡和侵袭转移方面探讨其作用机制。方法:50只BALB/c-nu小鼠适应饲养7天后造模,右前腋下接种MFC胃癌细胞悬液造模。在接种第7天,随机挑选接种部位带结节的小鼠雌雄各1只,取结节,经病理诊断均为肿瘤组织时,提示造模成功。模型小鼠按体重随机分为6组即模型组、顺铂组、参芪抑瘤方低剂量组(中药低组)、参芪抑瘤方高剂量组(中药高组)、参芪抑瘤方低剂量联合顺铂组(联合低组)、参芪抑瘤方高剂量联合顺铂组(联合高组),每组8只,雌雄各半,另设空白组。参芪抑瘤方高、低剂量组分别给予56.92g/kg、28.46g/kg,连续治疗15d。顺铂组及联合组,腹腔注射顺铂,给药量为:2.5mg/kg,于第1、8d给药。完整剥取脾脏、肿瘤组织。观察指标:(1)一般情况和瘤体情况;(2)脾指数、抑瘤率及q值;(3)病理学观察;(4)实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测瘤体XIAP、PTEN、TGF-β、MMP13mRNA及蛋白的表达。结果:(1)造模后瘤体逐渐增大,肿瘤表面由圆形、椭圆形逐渐变为不规则形,活动度较差;中药组与联合组小鼠一般情况优于模型组和顺铂组。(2)脾指数:与模型组相比,中药低组、中高高组分别升高了31.86%、36.27%(P0.01),与顺铂组相比,联合低组、联合高组分别升高了19%、39%(P0.01)。(3)抑瘤率:顺铂组为55.25%,中药低组为27.7%,中药高组为30.58%,联合低组为66.3%,联合高组67.78%;联合用药组优于单纯用药组;差异具有统计学意义(P0.01)。q值:联合低组、中药低组及顺铂组三组计算q≈0.942,联合高组、中药高组及顺铂组三组计算q≈0.983。(4)病理组织显示,模型组细胞数量多,其肿瘤细胞异型性明显;各治疗组肿瘤细胞数量减少,坏死增加。(5)与模型组相比,顺铂组、中药组、联合组中XIAP、TGF-β、MMP13 mRNA及蛋白的表达均降低,PTEN mRNA及蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.01)。(6)与顺铂组、中药低组和中药高组相比,联合低组和联合高组中XIAP、TGF-β、MMP13 mRNA及蛋白的表达均降低,PTEN mRNA及蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:参芪抑瘤方具有一定的抗MFC胃癌移植瘤作用,并与化疗药物顺铂联合具有减毒增效作用。其作用可能是通过下调瘤组织中TGF-β、MMP13、XIAP的表达,上调PTEN mRNA和蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤侵袭转移,促进肿瘤细胞的凋亡。
【图文】：

小鼠,结节,HE染色,抑瘤

10×20 10×20图 1 小鼠接种部位结节组织 HE 染色分组及给药造模后，将 48 只 BALB/c-nu 小鼠随机分 6 组，每组 8 只，另设空白组 8按参芪抑瘤方成人（70kg）剂量 83g，通过人与小鼠体表面积比例换算用量为成人剂量的 12 倍，即小鼠的剂量为 14.23g/kg。中药低剂量为换算后剂量的 2 倍量即 28.46g/kg，中药高剂量为换算后小鼠剂量的 4 倍量即 56.g。BALB/c-nu 小鼠腹腔注射量为 2.5mg /kg。参芪抑瘤方药液连续给药 1日 1 次。顺铂于第 1、8d 给药。第 15 天 18:00 开始禁食，不禁水。第 16 天小鼠，取材供检测。（见表 3）

HE染色,肿瘤组织,中药,顺铂

参芪抑瘤方联合顺铂对 MFC 荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究分细胞核固缩，，可见小灶性坏死，间质血管丰富，肿瘤细胞周围胶原纤维增多；中药低组、中药高组、顺铂组、联合低组、联合高组均可见肿瘤细胞数量减少，排列疏松，细胞体积明显缩小，核固缩，细胞坏死明显增加，间质血管数量减少，胶原纤维增多。（见图 4）。模型组 10×40 顺铂组 10×40 中药低组 10×40
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】