银杏叶中异鼠李素对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其分子机制

发布时间：2020-05-18 14:52

【摘要】：目的探讨银杏叶中异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其可能的相关分子机制。方法在核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞的同时,加入不同浓度的ISO(1~10μM),研究其对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响,通过CCK8法检测及评估各作用浓度ISO的细胞毒性,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resis-tant acid phosphatase staining,TRAP)染色及骨片吸收效果判定其对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。实时定量PCR检测破骨细胞分化过程的标志性基因:TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)、金属基质蛋白酶9(matrix metallo protein,MMP-9);分化相关转录因子:原癌基因c-Fos(proto-oncogene protein,c-Fos)、核转录因子激活的T细胞1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)的表达及破骨细胞分化下游因子NF-κB p65信号通路的磷酸化水平。结果不同浓度的ISO(1~10μM)对RAW264.7细胞无细胞毒性,并且能抑制TRAP活性,减少骨吸收陷窝数量,在浓度为10μM时最为显著;ISO能显著降低TRAP、Ctsk、MMP-9、c-Fos、NFATc1及NF-κB p65的m RNA表达。结论 ISO对RAW264.7细胞向破骨细胞的分化具有抑制作用,其机制可能与经典NF-κB通路的抑制有关。
【图文】：

yISOtreatmentasdetectedbyPCR0μM1μM2μM5μM10μM1.51.00.50.0吸收面积相对比****a：空白对照组（0μMISO＋0ng/mLRANKL）；b：阳性对照组（0μMISO＋50ng/mLRANKL）；c：1μMISO＋50ng/mLRANKL；d：2μMISO＋50ng/mLRANKL；e：5μMISO＋50ng/mLRANKL；f：10μMISO＋50ng/mLRANKL；g：阳性对照组和实验组的相对于对照组的骨吸收面积比值；*为与阳性对照组比较P<0.05；**为与阳性对照组比较P<0.01；***为与阳性对照组比较P<0.001。ISO：异鼠李素；RANKL：核因子κB受体活化因子配基。图5ISO作用后各组骨片骨吸收陷窝形成情况扫描电镜×400Figure5SEMpicturesoftheboneresorptionlacuna（×400）defabcg100500吸收面积相对百分比（%）****g阳性对照组1μMISO组2μMISO组5μMISO组10μMISO组组别defabca：空白对照组（0μMISO＋0ng/mLRANKL）；b：阳性对照组（0μMISO＋50ng/mLRANKL）；c：1μMISO组（1μMISO＋50ng/mLRANKL）；d：2μMISO组（2μMISO＋50ng/mLRANKL）；e：5μMISO组（5μMISO＋50ng/mLRANKL）；f：10μMISO组（10μMISO＋50ng/mLRANKL）；g：阳性对照组和实验组相对于空白对照组的骨吸收面积百分比；*为与阳性对照组比较P<0.05；**为与阳性对照组比较P<0.01。ISO：异鼠李素；RANKL：核因子κB受体活化因子配基。图5ISO作用后各组骨片骨吸收陷窝形成情况扫描电镜×400Figure5SEMimagesofboneresorptionlacuna×400·163·

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 黄晓斌;孙元明;李雨民;杨福军;;破骨细胞分化成熟因子及其信号转导通路[J];中国骨质疏松杂志;2007年11期

2 史淇月;杨柳;魏铂沅;范金柱;王龙;颉强;刘建;罗卓荆;;雌激素通过调节EphB4/EphrinB2信号参与破骨细胞分化[J];中国骨质疏松杂志;2014年04期

3 郎红梅;金小岚;万勇;游志清;;低氧对小鼠破骨细胞分化影响的时间依赖关系[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年28期

4 曾润铭 ,张忠民 ,金大地;类风湿关节炎滑膜细胞向破骨细胞分化实验研究[J];中华风湿病学杂志;2005年03期

5 李世昌;季浏;马涛;罗剑;李珍惜;郑庆云;;不同方式跑台运动对去卵巢小鼠破骨细胞分化及相关调节因子的影响[J];中国体育科技;2011年05期

6 贾鹏;张增利;徐又佳;林华;;铁超载对小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响[J];中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志;2011年01期

7 石国勋;郑祥雄;任天丽;;破骨细胞分化刺激因子在佐剂性关节炎大鼠滑膜中的表达及意义[J];山东医药;2011年33期

8 赵国阳;狄东华;何银锋;沈光思;徐又佳;;铁调素对小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响[J];中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志;2013年03期

9 丛悦;饶亚岚;陈肖华;董波;李峰生;王治东;罗庆良;;钙结合蛋白S100A8在γ射线损伤小鼠巨噬细胞RAW264.7中的作用[J];辐射研究与辐射工艺学报;2010年05期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 贾鹏;徐又佳;;铁离子对破骨细胞分化及骨吸收的影响[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年

2 赵国阳;徐又佳;狄东华;;高铁环境对成骨细胞、破骨细胞分化的影响[A];中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编[C];2013年

3 赵国阳;徐又佳;;铁调素对小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响[A];中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编[C];2013年

4 田s，

本文编号：2669892