共价交联大黄多糖、淫羊藿多糖明胶水凝胶及其性能评价

发布时间：2020-05-18 19:25

【摘要】：目前组织工程学是解决组织和器官替代品不足的一种有效方式。选择合适的生物材料来模拟细胞外基质是组织工程学的重点。细胞外基质是细胞之间的动态富含水的网状结构,由胶原、蛋白聚糖及糖蛋白等大分子物质组成,而这种结构与具有多孔三维网状的水凝胶很类似,所以目前组织和器官体外重建时常选用水凝胶作为细胞外基质。但天然的细胞外基质分子除胶原外,其它分子制备成本较高,我们前期研究显示中药多糖活性广泛,如果能与明胶制备成水凝胶,则可能模拟细胞外基质,甚至赋予细胞外基质更多的活性。因此本研究选择了两种具有很多生物活性的中药多糖,大黄多糖和淫羊藿多糖,与明胶一起制备了水凝胶,探索该水凝胶在组织工程学中的应用的可能性。本研究首先提取了大黄多糖和淫羊藿多糖,然后用不同量的高碘酸钠氧化了两种多糖,且测定了氧化后多糖中的醛基含量;用乙二胺改性明胶,且用TNBS法(三硝基苯磺酸法)测定改性前后明胶中的氨基含量。再以氧化后的大黄多糖和氨基化明胶为材料,按体积比为1:1、2:1、1:2制备出六种水凝胶(DGH-1、DGH-2、DGH-3、DGH-1’、DGH-2’、DGH-3’),氧化后的淫羊藿多糖也用此法制备了六种水凝胶(YGH-1、YGH-2、YGH-3、YGH-1’、YGH-2’、YGH-3’),通过电镜分析、红外光谱分析、体外溶胀、降解、释放实验、流变分析、细胞相容性实验等对制备的水凝胶进行评价,红外光谱分析结果表明,制备的大黄多糖明胶水凝胶出现了席夫碱键的特征吸收峰,电镜结果显示大黄多糖明胶水凝胶和淫羊藿多糖明胶水凝胶都具有明显的多孔结构,且互相贯穿连接,多孔的直径大小不一,从几十微米到几百微米不等。体外溶胀结果表明,在酸性溶液中,大黄多糖明胶水凝胶和淫羊藿多糖明胶水凝胶的溶胀率都高于中性和碱性溶液。体外降解结果显示,在测试的降解期限内,多糖和氨基化明胶的体积比为1:1时,大黄多糖明胶水凝胶和淫羊藿多糖明胶水凝胶的降解率都高于其它比例。体外释放结果表明,在释放144h后,多糖和氨基化明胶的体积比为1:1时,大黄多糖明胶水凝胶和淫羊藿多糖明胶水凝胶的释放率都高于其它比例。流变结果显示,两种多糖水凝胶都具有一定的机械强度。细胞相容性结果显示,两种多糖水凝胶对BMSC细胞(骨髓间充质干细胞)无毒性,且具有一定的促增殖作用。综上所述,由共价交联法制备的大黄多糖明胶水凝胶和淫羊藿多糖明胶水凝胶,可以在模拟细胞外基质,组织工程学中有一定的应用潜力。
【图文】：

大黄多糖的色谱图

12图 2.2 淫羊藿多糖的色谱图图中 LS 为激光扫描，DRI 为示差扫描，根据软件分析后得出大黄多糖的重均分子量(Mw)为 1.682×106，多分散系,数(Mw/Mn)为 2.764，，属于中等分布宽度样品，淫羊藿多糖的重均分子量(Mw)为 6.495×105，多分散系,数(Mw/Mn)为 2.898，也属于中等分布宽度样品；多分散系数(Mw/Mn) 在 2 ～ 3 时，属于中等分布宽度样品，多分散系数接近 1 时，属于窄分布样品，当多分散系数(Mw/Mn)等于 1 时，则可以认定待测样品的相对分子质量分布是均一的[122]。2.4.2 大黄多糖、淫羊藿多糖的含量由图 2.3 可知，葡萄糖的标准方程为 y=8.7382x+0.0193，将测得大黄多糖的吸光度为 0.521 和淫羊藿多糖的吸光度 0.333 代入到该方程，最后推算出提取的大黄多糖的含
【学位授予单位】：兰州理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R283.6

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本文编号：2670207