大黄素、栀子苷配伍对酵母多糖致全身炎症反应综合征大鼠模型肠屏障功能受损保护作用的研究
发布时间：2020-05-19 15:51
【摘要】：目的:探讨栀子的有效组分栀子苷与大黄的有效组分大黄素配伍对酵母多糖致全身炎症反应综合征大鼠模型肠屏障功能受损的保护作用,并运用免疫组化方法,从核转录因子和Toll样受体4蛋白表达方面来探讨其可能的作用机制。方法:取SD雄性大鼠一次性腹腔注射500 mg/kg酵母多糖建立全身炎症反应综合征大鼠肠屏障功能受损模型。将模型大鼠随机分为模型组、栀子苷组(20 mg/kg)、大黄素组(20 mg/kg)、大黄素与栀子苷配伍组(栀子苷20mg/kg+大黄素20 mg/kg)、乌司他丁组(2700 U/kg),在大鼠造模即刻给药干预1次,12小时重复给药干预一次。造模24小时后检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、D-乳酸(D-lactate,D-LA)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、内毒素(endotoxin,ET)水平,并取小肠进行病理组织学检查。采用免疫组化法测定小肠组织内核转录因子-?Bp65(nuclear transcription factor-?Bp65,NF-?Bp65)及Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR-4)的蛋白表达。结果:模型组大鼠的体温升高,白细胞计数减少,血清TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-6、D-LA、DAO和ET较正常对照组明显升高(P㩳0.01);病理组织学检查可见病理组织学检查可见小肠黏膜明显水肿,黏膜上皮细胞排列紊乱,黏膜上皮细胞脱落,黏膜上皮炎症细胞增多,杯状细胞减少,固有层松散、充血,提示大鼠给予酵母多糖后出现了全身炎症反应,大鼠的小肠黏膜屏障出现了损伤;免疫组化检查可见小肠组织中NF-?B及TLR-4蛋白表达增强(P㩳0.05)。与模型组比较,栀子苷组、大黄素组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-6、D-LA、DAO和ET水平升高(P㩳0.05,P㩳0.01);病理组织学检查可见黏膜上皮水肿,黏膜上皮细胞排列紊乱,黏膜上皮炎症细胞增多,杯状细胞减少,固有层松散、充血;小肠组织中NF-?Bp65及TLR-4蛋白表达增强(P㩳0.05)。栀子苷与大黄素配伍组大鼠体温下降,白细胞计数增加,血清TNF-α、IL-1β、IL-6、D-LA、DAO和ET水平降低(P㩳0.05,P㩳0.01),IL-10水平升高(P㩳0.01);小肠病理组织学检查可见大鼠小肠黏膜轻度水肿,固有层充血减轻,杯状细胞增多,炎症细胞浸润减轻;栀子苷与大黄素配伍能下调NF-?Bp65及TLR-4蛋白表达,且优于栀子苷单用组、大黄素单用组(P㩳0.01)。结论:栀子苷与大黄素配伍可以减轻酵母多糖所致的全身炎症反应,对酵母多糖所引起的小肠黏膜屏障损伤具有保护作用,且其作用优于栀子苷、大黄素单用组,其作用机制可能与其抑制NF-?Bp65及TLR-4蛋白表达有关。
【图文】：
肠组织NF-B蛋白表达（×400）
343.2 各组肠组织 Toll 样受体 4 蛋白表达比较结果见图10与表3。正常对照组肠组织Toll样受体4（TLR-4）蛋白表达 较 少 。 与 正 常 对 照 组 比 较 ， 模 型 组 肠 组 织 TLR-4 蛋 白 表 达 增 强（P<0.01），TLR-4蛋白表达部位主要在肠黏膜上皮，固有层有少量表达。与模型组比较，大黄素单用组、栀子苷单用组、大黄素与栀子苷配伍组肠组织TLR-4蛋白表达均有所减弱（P<0.01）。大黄素与栀子苷配伍组TLR-4蛋白表达较大黄素组、栀子苷单用组降低。表 3 各组大鼠肠组织 NF- B p65 和 TLR-4 的蛋白表达比较（ x±s）组别 剂量 nTLR-4 表达量（AOD）NF- B 表达量（AOD）正常对照组 — 10 0.27±0.04 0.30±0.06模型组 — 8 0.59±0.08##0.65±0.07##栀子苷组 20 mg/kg 9 0.47±0.08**0.49±0.07**大黄素组 20 mg/kg 8 0.49±0.03**0.50±0.06**配伍组 20+20mg/kg 9 0.36±0.08**▲☆0.42±0.06**▲☆乌司他丁组 2700 U/kg 9 0.42±0.06**0.46±0.09**与正常对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，，**P<0.01；与栀子苷组比较，▲P<0.05；与大黄素组比较
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
本文编号：2671121
【图文】：
肠组织NF-B蛋白表达（×400）
343.2 各组肠组织 Toll 样受体 4 蛋白表达比较结果见图10与表3。正常对照组肠组织Toll样受体4（TLR-4）蛋白表达 较 少 。 与 正 常 对 照 组 比 较 ， 模 型 组 肠 组 织 TLR-4 蛋 白 表 达 增 强（P<0.01），TLR-4蛋白表达部位主要在肠黏膜上皮，固有层有少量表达。与模型组比较，大黄素单用组、栀子苷单用组、大黄素与栀子苷配伍组肠组织TLR-4蛋白表达均有所减弱（P<0.01）。大黄素与栀子苷配伍组TLR-4蛋白表达较大黄素组、栀子苷单用组降低。表 3 各组大鼠肠组织 NF- B p65 和 TLR-4 的蛋白表达比较（ x±s）组别 剂量 nTLR-4 表达量（AOD）NF- B 表达量（AOD）正常对照组 — 10 0.27±0.04 0.30±0.06模型组 — 8 0.59±0.08##0.65±0.07##栀子苷组 20 mg/kg 9 0.47±0.08**0.49±0.07**大黄素组 20 mg/kg 8 0.49±0.03**0.50±0.06**配伍组 20+20mg/kg 9 0.36±0.08**▲☆0.42±0.06**▲☆乌司他丁组 2700 U/kg 9 0.42±0.06**0.46±0.09**与正常对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，，**P<0.01；与栀子苷组比较，▲P<0.05；与大黄素组比较
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【参考文献】
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本文编号：2671121
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